商品植物油鉴定及溯源方法技术

本申请公开了一种商品植物油鉴定及溯源方法，旨在解决商品植物油难以鉴定真伪及溯源的技术问题。本申请利用可亲疏水性分离油脂结合蛋白，并通过PVPP吸附浓缩后，利用电泳和质谱技术分析鉴定，获得痕量蛋白的电泳图谱和蛋白质种类信息；通过痕量蛋白作为分子标签追溯植物油的原料来源，用于各种植物油中痕量蛋白的提取分离检测植物油的质量，本申请提供的方法简单快速、所需试剂无毒害、价格便宜、产率高、结果准确。结果准确。结果准确。

【技术实现步骤摘要】
商品植物油鉴定及溯源方法


[0001]本申请涉及食用油检测溯源
，具体涉及一种商品植物油鉴定及溯源方法。

技术介绍

[0002]植物油是以富含油脂的植物种仁为原料，经清理除杂、脱壳、破碎、软化、轧坯、挤压膨化等预处理后，再采用机械压榨或溶剂浸出法提取获得粗油，再经精炼后获得。食用植物油脂是人类的重要副食品，主要用于烹饪、糕点、罐头食品等，还可以加工成菜油、人造奶油、烘烤油等供人们食用。
[0003]当前市场上存在着众多的各种类型不同来源的商品植物油，由于利益的驱动，也存在一些以次充好甚至是假冒伪劣产品；而这些假冒伪劣植物油流入市场不仅危害消费者的身体健康，还会影响到一些知名商品植物油品牌的形象和效益。然而，现有的多数商品防伪手段难以从根本上鉴定真伪并进行有效的溯源。
[0004]公开于该
技术介绍
部分的信息仅用于加深对本公开的
技术介绍
的理解，而不应当被视为承认或以任何形式暗示该信息构成本领域技术人员所公知的现有技术。

技术实现思路

[0005]研究发现，无论植物油的生产是采用冷压榨、热压榨或化学萃取生产工艺，油脂产品中都会残留少量的油脂结合蛋白，而不同油料作物（如花生、油菜、大豆、向日葵、芝麻等）种子中的油脂结合蛋白种类和性质不同，不同的生产工艺条件下所残存的油脂结合蛋白也会有所不同；而且油脂结合蛋白质与核酸（DNA、RNA）相比，它在极端的物理化学条件下更加稳定。因而，植物油中的痕量蛋白特征谱可用作“分子标签”来追溯植物油的原料来源，痕量蛋白的特征谱还可以辅助检测植物油的品质和生产工艺。
[0006]鉴于以上技术问题中的至少一项，本申请提供了一种通过分离鉴定油中痕量蛋白作为植物油分子标签/标记的方法，利用油脂结合蛋白的可亲疏水性性质（同时含有亲水基团和疏水基团）来分离植物油中的痕量蛋白，即疏水基团和油脂结合，亲水基团和极性分子（水、盐等）结合，通过油和极性缓冲提取液的混合可以将油脂结合蛋白萃取到水相（加热可以促进亲水基团和极性分子结合，使萃取更快更完全）；再利用PVPP（聚乙烯聚吡咯烷酮）对萃取到水相的痕量蛋白进行吸附浓缩，然后利用电泳和质谱技术分析鉴定来获得痕量蛋白的电泳图谱和蛋白质种类信息。
[0007]根据本公开的一个方面，提供一种商品植物油鉴定方法，包括如下步骤：（1）取38～42 mL待鉴定植物油，向其中加入8～10 mL提取液后混合均匀，于45～55℃下振荡15～25 min；（2）将上步振荡所得混合溶液以4000～6000 g的离心力于室温离心3～5 min；（3）取离心后的下层水相，按900～1100 mL:1g的比例加入PVPP，振荡混匀3～5 min；
（4）再以4000～6000 g的离心力于室温下离心3～5 min；离心分离后弃上清液，然后加入0.8～1.5 mL乙醇冲洗沉淀后，回收沉淀；（5）将回收得到的沉淀晾干，向其中加入溶解蛋白的缓冲液得到蛋白溶液；（6）对所得蛋白溶液进行电泳和/或质谱分析鉴定，对比所获得的蛋白的电泳图谱和/或蛋白质种类信息，进而确定待鉴定植物油的来源或品牌标记的真伪。
[0008]在本公开的一些实施例中，所述提取液含0.1 mol/L 磷酸、0.01 mol/L NaCl，pH 6.8；该提取液能充分分离提取油脂中的痕量蛋白。
[0009]在本公开的一些实施例中，在所述步骤（5）中，所述缓冲液含0.5% SDS、10 mM巯基乙醇钠、2 M尿素、10%甘油、75 mM Tris
‑
HCl，pH 6.8。
[0010]根据本公开的一个方面，提供一种商品植物油溯源方法，包括如下步骤：（1）逐步收集各厂家出产或市场上销售的各种商品植物油，按照上述方法测定其中的蛋白电泳图谱和/或蛋白质种类信息，并将其作为对应的商品植物油的分子标签/记，从而建立商品植物油的产地、厂家、牌号或种类信息关联对应的分子标签/记的数据库；（2）取待溯源或待真伪鉴定的植物油样品，按照上述方法获取其蛋白电泳图谱和/或蛋白质种类信息作为分子标签/记，并在所述数据库中进行检索比对，根据匹配的结果确定植物油样品的来源或标记商品规格品牌的真伪。
[0011]本申请实施例中提供的一个或多个技术方案，至少具有如下任一技术效果或优点：相对于现有技术，本申请鉴定方法简便快速（1 h即可完成）、结果准确可靠；适用性广，可用于各种商业销售植物油的真伪鉴定及追踪溯源；检测鉴定成本低，试剂无毒、便宜容易购买。
附图说明
[0012]图1 本申请一实施例中某品牌花生油中痕量蛋白的SDS
‑
PAGE电泳分析图谱。
[0013]图2本申请一实施例中某品牌花生油中痕量蛋白的质谱鉴定图谱。
[0014]图3 本申请一实施例中某品牌玉米胚芽油中痕量蛋白的质谱鉴定图谱。
具体实施方式
[0015]下面结合实施例来说明本申请的具体实施方式，但以下实施例只是用来详细说明本申请，并不以任何方式限制本申请的范围。在以下实施例中所涉及的仪器设备如无特别说明，均为常规仪器设备；所涉及的工业原料如无特别说明，均为市售常规工业原料；所涉及的加工制作方法如无特别说明，均为常规方法。
[0016]为了更好的理解本申请技术方案，下面将结合说明书附图以及具体的实施方式对上述技术方案进行详细的说明。
[0017]实施例一本例公开一种商品植物油鉴定方法，包括如下步骤：（1）向离心管中加入40 mL植物油（某商场购买的金龙鱼纯正花生油）和8 mL提取液（0.1 mol/L磷酸缓冲液+0.01 mol/L NaCl，pH 6.8）混合均匀，50℃剧烈震荡20 min；（2）将步骤（1）所得混合溶液以5000 g的离心力于室温离心分离5 min；
（3）取步骤（2）离心后的下层水相，按照1000 mL：1g的比例加入PVPP，温和震荡混匀5 min；（4）再以5000 g的离心力于室温离心5 min，弃上清液后，加入1.2 mL 95%乙醇冲洗沉淀后，回收沉淀；（5）将步骤上步回收得到的沉淀晾干，加入溶解蛋白的缓冲液(0.5% SDS、10 mM β巯基乙醇、2 M尿素、10%甘油、75 mM Tris
‑
HCl，pH 6.8）得到蛋白溶液。
[0018]（6）对上步骤得到的蛋白溶液进行电泳和质谱鉴定，获得油脂结合蛋白的电泳图谱和蛋白质种类信息（见图1、图2），比对后确定待鉴定植物油来源于为花生，且并未检测出有毒有害蛋白，说明该植物油质量合格。
[0019]实施例二本例公开一种商品植物油鉴定方法，包括如下步骤：（1）向离心管中加入38 mL植物油（某商场购买的金龙鱼玉米胚芽油）和8 mL提取液（0.1 mol/L磷酸缓冲液+0.01 mol/L NaCl，pH 6.8）混合均匀，50℃剧烈震荡20 min；（2）将上步所得混合溶液以5000 g的离心力于室温离心分离4 min；（3）取离心分离后的下层水相，按照1000 mL: 1g的比例加入PVPP，温和震荡混匀4min；（本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种商品植物油鉴定方法，其特征在于，包括如下步骤：（1）取38～42 mL待鉴定植物油，向其中加入8～10 mL提取液后混合均匀，于45～55℃下振荡15～25 min；（2）将上步振荡所得混合溶液以4000～6000 g的离心力于室温离心3～5 min；（3）取离心后的下层水相，按900～1100 mL:1g的比例加入PVPP，振荡混匀3～5 min；（4）再以4000～6000 g的离心力于室温下离心分离3～5 min后弃上清液，然后加入0.8～1.5 mL乙醇冲洗沉淀后，回收沉淀；（5）将回收得到的沉淀晾干，向其中加入溶解蛋白的缓冲液得到蛋白溶液；（6）对所得蛋白溶液进行电泳和/或质谱分析鉴定，对比所获得的蛋白的电泳图谱和/或蛋白质种类信息，进而确定待鉴定植物油的来源或品牌标记的真伪。2.根据权利要求1所述的商品植物油鉴定方法，其特征在于，所述提取液含0.1 mol/L 磷酸、...

【专利技术属性】
技术研发人员：牛靓洁，王伟，吴晓林，刘辉，邰付菊，
申请(专利权)人：河南农业大学，
类型：发明
国别省市：