一种基于TLR7激动剂偶联肽的新型冠状病毒纳米乳疫苗及其制备制造技术

本发明专利技术涉及一种以TLR7激动剂偶联肽为抗原，乳剂为佐剂的新型冠状病毒疫苗。其中，所述偶联肽的抗原多肽是衍生自冠状病毒SARS

【技术实现步骤摘要】
一种基于TLR7激动剂偶联肽的新型冠状病毒纳米乳疫苗及其制备


[0001]本专利技术属于生物医药
，具体地，涉及一种基于TLR7激动剂偶联肽的冠状病毒SARS
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CoV
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2纳米乳疫苗的制备及其在预防冠状病毒SARS
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CoV
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2野毒株和突变株感染中的应用。

技术介绍

[0002]严重急性呼吸系统综合征冠状病毒2(Severe acute respiratory syndrome coronavirus 2，SARS
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CoV
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2)，是一种具有包膜的正链单股RNA病毒，属于冠状病毒科乙型冠状病毒属严重急性呼吸道综合征相关冠状病毒种。该病毒的宿主包括哺乳动物和禽类动物，是导致2019冠状病毒病(COVID
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19)的病原体。截至2021年4月7日，全球已有192个国家和地区累计报告逾1.32亿名确诊病例，其中逾287.3万人死亡、7,522.1万人治愈，目前数字仍在迅速攀升中。病毒迅速传播的同时也在发生变异。在抗击COVID
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19的紧迫形势下,多肽疫苗有望为疫苗的开发和研制节省时间和成本。
[0003]与减毒疫苗和灭活疫苗相比，病毒抗原表位多肽疫苗更适用于应对病毒的变异；能达到快速、高效生产的要求，降低疫苗制作的成本；疫苗中无完整的病毒结构，安全性较高。但是与传统的灭活或活体疫苗相比，由基因工程重组抗原或化学合成多肽组成的现代疫苗往往存在免疫原性弱等问题，因此免疫佐剂是合成多肽疫苗制剂中的重要组成部分。
[0004]疫苗中的佐剂可有效增强机体对抗原的免疫应答或改变免疫反应的类型。目前已研发和批准上市了多种疫苗佐剂包括铝佐剂、乳剂、脂质体、病毒体等。铝佐剂是应用最广泛的免疫佐剂，可作为“抗原库”，缓慢释放抗原，延长免疫刺激效果，同时促进注射部位巨噬细胞的应答。另外，乳剂型佐剂研发历史悠久，目前主要用于流感、利仕曼病、疟疾等疫情的储备佐剂，迄今已应于用30多个国家。与铝佐剂的作用机制不同乳剂型免疫佐剂主要以间接方式递送抗原，它可增强抗原递呈细胞(APC)的对抗原物质的吞噬及胞饮作用，刺激单核细胞、巨噬细胞、粒细胞分泌CCL2、CXCL8、CCL3和CCL4等因子，并促进单核细胞向DC分化。乳剂佐剂不是直接以DC为靶标增强抗原摄取，而是介导其上游的DC前体细胞募集及其后续的分化来发挥佐剂作用。近来的研究发现乳剂佐剂还能将抗原从注射位点引流到淋巴结，与免疫细胞激发反应从而极大地提高免疫应答，产生更高水平的保护性抗体。
[0005]前期研究显示铝佐剂与高纯度的小分子蛋白抗原共同使用时存在激发细胞免疫应答能力不足的问题，不适用于多肽疫苗的开发。而基于角鲨烯的水包油型纳米乳剂可增加抗原的稳定性，有利于降低疫苗剂量或抗原浓度，还可以增强细胞免疫应答。
[0006]已批准上市的角鲨烯的水包油型纳米乳剂，如MF
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、AS03，处方设计不利于COVID
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19多肽抗原发挥最佳的免疫应答效应。专利文献CN201010247976.0公开了一种含角鲨烯、聚醚、聚氧乙烯蓖麻油的亚微乳佐剂，但聚氧乙烯蓖麻油在注射给药中具有较大毒性，易引起变态反应、中毒性肾损伤、神经毒性、心脏血管毒性等。专利文献CN200910193930.2公开了一种水包油型复方疫苗佐剂，但其中的蜂胶组成复杂，含多种不
明成分，且制备过程需要用到70％乙醇，易造成溶剂残留，仅适用于兽用疫苗。
[0007]因此，本领域迫切需要研发更为安全有效的人用新型佐剂，配合TLR7激动剂偶联肽发挥作用，并且需要制备快速简便，可在短期内实现大规模生产用于应对突发疫情。

技术实现思路

[0008]本专利技术的目的在于提供一种基于TLR7激动剂偶联肽的冠状病毒SARS
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2纳米乳疫苗及其制备方法。
[0009]本专利技术的第一方面，提供了一种冠状病毒SARS
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CoV
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2纳米乳疫苗制剂，所述疫苗制剂包含：
[0010](a)冠状病毒SARS
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CoV
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2疫苗多肽，所述疫苗多肽包括抗原多肽以及任选地与所述抗原多肽偶联的TLR7激动剂；
[0011](b)佐剂，所述佐剂是基于角鲨烯的水包油型纳米乳剂；和
[0012](c)药学上可接受的载体、赋形剂或稀释剂。
[0013]在另一优选例中，所述佐剂包含以下组分：角鲨烯1
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15％(w/w)，α
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生育酚0
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15％(w/w)，乳化剂0.1
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10.0％(w/w)，和嵌段共聚物0.005
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10％(w/w)，按所述制剂的总重量计。
[0014]在另一优选例中，所述佐剂还包含水相介质。
[0015]在另一优选例中，所述佐剂包含油相部分和水相部分。
[0016]在另一优选例中，所述佐剂的油相部分包含：角鲨烯1
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15％(w/w)，α
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生育酚0
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15％(w/w)，和乳化剂0.1
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10.0％(w/w)；所述佐剂的水相部分包含：嵌段共聚物0.005
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10％(w/w)和水相介质，按所述制剂的总重量计。
[0017]在另一优选例中，所述佐剂包含角鲨烯1
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5％(w/w)，较佳地2
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2.5％(w/w)。
[0018]在另一优选例中，所述佐剂包含α
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生育酚0
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5％(w/w)，较佳地2.5
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4％(w/w)。
[0019]在另一优选例中，所述佐剂包含乳化剂1
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5％(w/w)，较佳地1
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2％(w/w)。
[0020]在另一优选例中，所述佐剂包含嵌段共聚物0.01
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5％(w/w)，较佳地0.01
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0.5％(w/w)。
[0021]在另一优选例中，所述角鲨烯来源于鲨鱼肝脏(特别是同齿刺鲨鱼、喙吻田氏鲨、南方乌鲨等)、橄榄油、棕榈油、麦胚油和/或酵母等。
[0022]在另一优选例中，所述乳化剂选自下组：磷脂、聚山梨酯类、蔗糖酯、柠檬酸脂肪酸甘油酯类、脂肪酸甘油脂类、脂肪酸山梨坦类、环糊精、聚氧乙烯脂肪酸酯类、聚氧乙烯脂肪醇醚类、聚乙二醇、甲壳质、甲壳胺、胆酸及其盐类、或其组合。
[0023]在另一优选例中，所述乳化剂选自下组：磷脂、聚山梨酯、或其组合。
[0024]在另一优选例中，所述乳化剂包括聚山梨酯80。
[0025]在另一优选例中，所述乳化剂包括聚山梨酯80和磷脂的组合。
[0026]在另一优选例中，所述嵌段共聚物为医用嵌段共本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种冠状病毒SARS
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2纳米乳疫苗制剂，其特征在于，所述疫苗制剂包含：(a)冠状病毒SARS
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CoV
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2疫苗多肽，所述疫苗多肽包括抗原多肽以及任选地与所述抗原多肽偶联的TLR7激动剂；(b)佐剂，所述佐剂是基于角鲨烯的水包油型纳米乳剂；和(c)药学上可接受的载体、赋形剂或稀释剂。2.如权利要求1所述的制剂，其特征在于，所述佐剂包含以下组分：角鲨烯1
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15％(w/w)，α
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生育酚0
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15％(w/w)，乳化剂0.1
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10.0％(w/w)，和嵌段共聚物0.005
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10％(w/w)，按所述制剂的总重量计。3.如权利要求1或2所述的制剂，其特征在于，所述角鲨烯来源于鲨鱼肝脏、橄榄油、棕榈油、麦胚油和/或酵母。4.如权利要求2所述的制剂，其特征在于，所述乳化剂选自下组：磷脂、聚山梨酯类、蔗糖酯、柠檬酸脂肪酸甘油酯类、脂肪酸甘油脂类、脂肪酸山梨坦类、环糊精、聚氧乙烯脂肪酸酯类、聚氧乙烯聚氧丙烯共聚物类、聚氧乙烯脂肪醇醚类、聚乙二醇、泊洛沙姆、甲壳质、甲壳胺、胆酸及其盐类、或其组合。5.如权利要求2所述的制剂，其特征在于，所述嵌段共聚物选自下组：甲氧基聚乙二醇
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聚己内酯、甲氧基聚乙二醇聚乳酸
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羟基乙酸、聚乳酸羟基乙酸
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聚乙烯亚胺、聚乳酸
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聚乙二醇、聚磷酸酯两嵌段共聚物、聚氧乙烯聚氧丙...

【专利技术属性】
技术研发人员：张馨欣，宫丽崑，任进，靳广毅，黄蔚，甘勇，孙建华，刘婷婷，龙益如，缪云秋，秦秋平，唐峰，余盼，郭琳苗，
申请(专利权)人：深圳大学，
类型：发明
国别省市：