巨菌草汁作为非致病性尖孢镰刀菌发酵培养基的应用制造技术

本发明专利技术提供了巨菌草汁作为非致病性尖孢镰刀菌发酵培养基的应用；步骤如下：S1、生产用液体菌种的制备：以尖孢镰刀菌FJAT

【技术实现步骤摘要】
巨菌草汁作为非致病性尖孢镰刀菌发酵培养基的应用


[0001]本专利技术涉及细菌培养基
，尤其是涉及巨菌草汁作为非致病性尖孢镰刀菌发酵培养基的应用。

技术介绍

[0002]尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)的非致病性菌株因能够在植株中定殖、不造成植物病害且对致病性菌株有良好的拮抗作用，被作为天然的植物疫苗菌株，已应用于多种作物枯萎病的防治(Shishido et al.,2005；Veloso et al.,2012；Pu et al.,2014)。现有技术已公开的非致病性尖孢镰刀菌菌株FJAT
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9290是一种天然的植物疫苗菌株，前期研究已表明，该菌株不会引起茄科、葫芦科、芭蕉科和百合科等作物发病，且在茄科、葫芦科及芭蕉科等作物上具有良好的定殖能力，可达40
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90天。采用提前施用的方法能促进植物生长，且对番茄枯萎病有较好的防治效果，其中盆栽防治效果为 76.70％，田间小区防治效果为69.56％，略高于化学农药50％多菌灵可湿性粉剂处理的防治效果68.64％(肖荣凤等，2015.非致病性尖孢镰刀菌FJAT
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9290的定殖特性及对番茄枯萎病的防治效果.植物保护学报,2:169
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175)。
[0003]现有技术中，非致病性尖孢镰刀菌的发酵培养基，通常使用真菌常用的PDB培养基。
[0004]巨菌草是系多年生禾本科直立丛生型植物，根系发达，生长迅速，已知其富含有机酸、多酚类、蛋白质、纤维素、糖类等生物物质。巨菌草适应能力强，在我国各地区被广泛种植。目前巨菌草多用于饲料、沼气发酵生产、燃烧发电、生物质乙醇制造等传统领域上。
[0005]目前，还未见过利用巨菌草汁作为非致病性尖孢镰刀菌的发酵培养基的报道，对于巨菌草的高附加值利用具有重要意义。

技术实现思路

[0006]本专利技术要解决的技术问题是提供一种巨菌草汁作为非致病性尖孢镰刀菌发酵培养基的应用。该应用方法以巨菌草汁为培养基，进行非致病性尖孢镰刀菌的发酵，发酵方法简单、成本低，经过发酵后的非致病性尖孢镰刀菌菌含量与真菌常用的PDB 培养基发酵效果相当，且可使巨菌草汁废弃物变废为宝，对于提高巨菌草的高附加值利用具有重要意义。
[0007]为解决上述技术问题，本专利技术采用如下的技术方案：
[0008]巨菌草汁作为非致病性尖孢镰刀菌发酵培养基的应用。
[0009]作为一种实施方式，所述非致病性尖孢镰刀菌是尖孢镰刀菌FJAT
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9290。
[0010]本申请中所述尖孢镰刀菌FJAT
‑
9290：
[0011]分类命名：尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)
[0012]保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心
[0013]保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号
[0014]保藏日期：2012年3月29日
[0015]保藏编号：CGMCC No.5910
[0016]作为一个优选的实施方式，所述应用的方法步骤如下：
[0017]S1、生产用液体菌种的制备：
[0018]以尖孢镰刀菌FJAT
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9290为菌种，以马铃薯葡萄糖琼脂PDB培养基为菌种用培养基，制备生产用液体菌种；
[0019]S2、尖孢镰刀菌植物疫苗制剂的制备：
[0020]以巨菌草汁为液体培养基，灭菌后，接种步骤S1所制备的液体菌种，26
‑
30℃、 160
‑
200r/min振荡培养6
‑
8d，获得非致病性尖孢镰刀菌植物疫苗制剂。
[0021]作为一个优选的实施方式，步骤S1中，所述生产用液体菌种的制备的具体步骤如下：
[0022]S11、菌种的活化：
[0023]配置PDA培养基，121℃灭菌20min，冷却至45℃倒于灭菌平板中，备用；取
ꢀ‑
70℃保存的非致病性尖孢镰刀菌FJAT
‑
9290菌株于PDB培养基平板上划线培养， 28
‑
30℃恒温培养5
‑
7天，获得菌丝；
[0024]S12、制备生产用液体菌种
[0025]配置PDB液体培养基，挑取步骤S11中的菌丝接种于PDB液体培养基中， 28
‑
30℃，170
‑
200r/min摇床培养5
‑
7天，即为生产用液体菌种。
[0026]作为一种实施方式，步骤S11中，所述PDA培养基中包括：马铃薯浸粉5g/L，蛋白胨10.0g/L，葡萄糖15.0g/L，氯化钠5.0g/L，琼脂20g/L，且pH＝7.0。
[0027]作为一种实施方式，步骤S12中，所述PDB液体培养基中包括：马铃薯浸粉5g/L，蛋白胨10.0g/L，葡萄糖15.0g/L，氯化钠5.0g/L，且pH＝7.0。
[0028]作为一个优选的实施方式，步骤S2中，所述尖孢镰刀菌植物疫苗制剂的制备的具体步骤如下：
[0029]S21、以新鲜巨菌草为材料，采用榨汁机压榨后出汁液，过滤废渣后得巨菌草汁；
[0030]S22、以纯巨菌草汁为液体培养基或巨菌草汁与PDB液体培养液的混合物为培养基，调整pH值为7.0，121℃灭菌20min；
[0031]S23、向灭菌后的液体培养基中按接种量1％接种步骤S1中得到的生产用液体菌种，在30℃恒温下，180r/min振荡培养30h，即得尖孢镰刀菌植物疫苗制剂。
[0032]本专利技术所记载的任何范围包括端值以及端值之间的任何数值以及端值或者端值之间的任意数值所构成的任意子范围。
[0033]如无特殊说明，本专利技术中的各原料均可通过市售购买获得，本专利技术中所用的设备可采用所属领域中的常规设备或参照所属领域的现有技术进行。
[0034]本专利技术的有益效果
[0035]本专利技术的应用方法以巨菌草汁为培养基，进行非致病性尖孢镰刀菌的发酵，发酵方法简单、成本低，经过发酵后的非致病性尖孢镰刀菌菌含量与真菌常用的PDB培养基发酵效果相当，且可使巨菌草汁废弃物变废为宝，对于提高巨菌草的高附加值利用具有重要意义。
具体实施方式
[0036]为了更清楚地说明本专利技术，下面结合优选实施例对本专利技术做进一步的说明。本领域技术人员应当理解，下面所具体描述的内容是说明性的而非限制性的，不应以此限制本专利技术的保护范围。
[0037]除非另有说明，本文中所用的所有百分比和比率均以总组合物重量计。除非另有说明，本文提及的所有成分的百分数、比例和含量均基于该成分的实际含量，并不包括在市售产品找那个可以与这些成分组合的溶剂、填料或其它物质。
[0038]本文中的术语“包含/包括”是指可加入不影响最终结果的其它步骤和成分。
[0039]本文中的术语“优选地”和它的变体是指在特定环境下能够提供特定有益效果本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.巨菌草汁作为非致病性尖孢镰刀菌发酵培养基的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述非致病性尖孢镰刀菌是尖孢镰刀菌FJAT
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9290。3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述应用的方法步骤如下：S1、生产用液体菌种的制备：以尖孢镰刀菌FJAT
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9290为菌种，以马铃薯葡萄糖培养基PDB为菌种用培养基，制备生产用液体菌种；S2、尖孢镰刀菌植物疫苗制剂的制备：以巨菌草汁为液体培养基，灭菌后，接种步骤S1所制备的液体菌种，26
‑
30℃、160
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200r/min振荡培养6
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8d，获得非致病性尖孢镰刀菌植物疫苗制剂。4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于：步骤S1中，所述生产用液体菌种的制备的具体步骤如下：S11、菌种的活化：配置PDA培养基，121℃灭菌20min，冷却至45℃倒于灭菌平板中，备用；取
‑
70℃保存的非致病性尖孢镰刀菌FJAT
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9290菌株于PDB培养基平板上划线培养，28
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30℃恒温培养5
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7天，获得菌丝；...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘波，陈燕萍，刘平山，王志明，王阶平，张海峰，吕祥熙，车建美，郑雪芳，刘欣，
申请(专利权)人：福建华闽晟业生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：