产生物乳化剂的细菌及应用、用于生产生物乳化剂的方法技术

本发明专利技术公开了产生物乳化剂的细菌及应用、用于生产生物乳化剂的方法，属于细菌开发领域。该产生物乳化剂的细菌为苍白空气芽孢杆菌Aeribacillus pallidus，在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏编号为CGMCC No.19082。利用该菌株产生的乳化剂能使原油乳化评级达到++++，油滴粒径达到4μm，并且该菌株为高温嗜碱菌，适应性强。适应性强。适应性强。

【技术实现步骤摘要】
产生物乳化剂的细菌及应用、用于生产生物乳化剂的方法


[0001]本专利技术涉及细菌开发领域，特别涉及产生物乳化剂的细菌及应用、用于生产生物乳化剂的方法。

技术介绍

[0002]生物乳化剂是一类由微生物代谢产生的大分子生物表面活性物质，一般由多糖、蛋白质、脂多糖、脂蛋白，或者这些物质的复合物组成。生物乳化剂具有稳定界面膜的作用，可与石油烃等疏水物质形成稳定的油水乳状液，并且无毒、可生物降解、与环境兼容性好，在石油开采、石油运输、油罐清洗、污染治理、化妆品、食品等领域具有潜在的应用前景。
[0003]目前，国外常见的生物乳化剂包括3种：Emulsan、Alasan和Liposan。Emulsan 是由乙酸钙不动杆菌(Acinetobacter calcoaceticus)RAG
‑
1以乙醇为碳源发酵产生的胞外生物乳化剂，能使石油明显分散，形成稳定的石油乳状液。Alasan是由抗辐射不动杆菌(Acinetobacter radioresistens)KA53以乙醇为碳源的发酵液中分离出来的阴离子生物乳化剂，由杂多糖和蛋白组成。Liposan是一种由碳氢化合物和蛋白质组成的生物乳化活性物质，由嗜石油假丝酵母(Candidapetrophilum)发酵烃类物质的发酵液中分离得到。国内也分离到了多株能够产生乳化剂的菌株:Rhodococcus erythropolis、Brevibacillus sp.、Dietzia sp.、 Ochrobactrum sp.、Pusillimonas sp.、Sphingopyxis sp.、Achromobacter、Geobacilluspallidus和Geobacillus stearothermophilus等。
[0004]在实现本专利技术的过程中，专利技术人发现现有技术中至少存在以下问题：
[0005]目前，还有大量的具有开发潜力的乳化剂产生菌种等待被发现及研究。

技术实现思路

[0006]鉴于此，本专利技术提供一种产生物乳化剂的细菌及应用、用于生产生物乳化剂的方法，能够解决上述技术问题。
[0007]具体而言，包括以下的技术方案：
[0008]一方面，本专利技术实施例提供了一种产生物乳化剂的细菌，所述产生物乳化剂的细菌为苍白空气芽孢杆菌Aeribacillus pallidus；
[0009]所述苍白空气芽孢杆菌Aeribacillus pallidus在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏编号为CGMCC No.19082。
[0010]另一方面，本专利技术实施例还提供了用于生产生物乳化剂的方法，所述方法使用了上述所述的产生物乳化剂的细菌。
[0011]在一些可能的实现方式中，所述方法包括：在保持搅拌的条件下，于50℃
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60℃的温度下，使所述产生物乳化剂的细菌于培养基中培养设定时间，得到生物乳化剂粗产品。
[0012]在一些可能的实现方式中，所述搅拌的搅拌速率为150rpm
‑
250rpm。
[0013]在一些可能的实现方式中，使所述产生物乳化剂的细菌于培养基中培养48 小时
‑
62小时。
[0014]在一些可能的实现方式中，所述培养基包括以下质量百分比的组分： 0.3％
‑
0.5％的葡萄糖、0.3％
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0.5％的氯化铵、0.2％
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0.4％的磷酸二氢钠、0.15％
‑
0.3％的玉米浆干粉、余量为水；
[0015]所述培养基的初始pH为7
‑
8。
[0016]在一些可能的实现方式中，所述方法还包括：
[0017]在得到所述生物乳化剂粗产品之后，将培养所得发酵液依次进行第一离心处理和抽滤处理，得到处理液；
[0018]向所述处理液中加入设定量的乙醇进行醇沉处理，然后再次进行第二离心处理，得到含生物乳化剂粗产品的产物；
[0019]利用超纯水溶解所述含生物乳化剂粗产品的产物，然后进行透析处理，分离得到所述生物乳化剂粗产品。
[0020]在一些可能的实现方式中，所述第二离心处理的操作条件如下所示：离心温度为3℃
‑
5℃，离心转速为10000rpm
‑
14000rpm。
[0021]在一些可能的实现方式中，所述透析处理采用MD8000
‑
14000的透析袋进行。
[0022]再一方面，本专利技术实施例还提供了上述产生物乳化剂的细菌在生产生物乳化剂中的应用。
[0023]本专利技术实施例提供的技术方案的有益效果至少包括：
[0024]本专利技术实施例提供了一种新型的能够用于生产生物乳化剂的细菌，利用该菌株产生的乳化剂能使原油乳化评级达到++++，油滴粒径达到4μm，并且，该菌株为高温嗜碱菌，具有较强的适应性。
附图说明
[0025]为了更清楚地说明本专利技术实施例中的技术方案，下面将对实施例描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本专利技术的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
[0026]图1为本专利技术实施例提供的灭菌培养基中不添加外源菌培养后得到的发酵液对原油的乳化效果图；
[0027]图2为本专利技术实施例提供的灭菌培养基中添加苍白空气芽孢杆菌 (Aeribacillus pallidus)HB1菌株培养后得到的发酵液对原油的乳化效果图；
[0028]图3为本专利技术实施例提供的利用苍白空气芽孢杆菌(Aeribacillus pallidus) HB1菌株乳化后的油滴粒径显微图像；
[0029]图4为本专利技术实施例提供的苍白空气芽孢杆菌(Aeribacillus pallidus)HB1 菌株序列系统发育树。
具体实施方式
[0030]为使本专利技术的技术方案和优点更加清楚，下面将结合附图对本专利技术实施方式作进一步地详细描述。
[0031]一方面，本专利技术实施例提供了一种产生物乳化剂的细菌，该产生物乳化剂的细菌
为苍白空气芽孢杆菌Aeribacillus pallidus；
[0032]该苍白空气芽孢杆菌Aeribacillus pallidus于2019年12月04日在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏编号为CGMCC No.19082。其中，中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心位于中国北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所。
[0033]本专利技术提供的苍白空气芽孢杆菌Aeribacillus pallidus简称苍白空气芽孢杆菌HB1，该苍白空气芽孢杆菌HB1的特征如下：
[0034]好氧，能运动，内生芽孢；菌体大小0.38μm x 2.75μm，菌落呈白色，湿润，表面光滑。菌株HB1为耐碱嗜热菌，生长pH范围为6.0...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种产生物乳化剂的细菌，其特征在于，所述产生物乳化剂的细菌为苍白空气芽孢杆菌Aeribacillus pallidus；所述苍白空气芽孢杆菌Aeribacillus pallidus在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏编号为CGMCC No.19082。2.用于生产生物乳化剂的方法，其特征在于，所述方法使用了权利要求1所述的产生物乳化剂的细菌。3.根据权利要求2所述的用于生产生物乳化剂的方法，其特征在于，所述方法包括：在保持搅拌的条件下，于50℃
‑
60℃的温度下，使所述产生物乳化剂的细菌于培养基中培养设定时间，得到生物乳化剂粗产品。4.根据权利要求3所述的用于生产生物乳化剂的方法，其特征在于，所述搅拌的搅拌速率为150rpm
‑
250rpm。5.根据权利要求3所述的用于生产生物乳化剂的方法，其特征在于，使所述产生物乳化剂的细菌于培养基中培养48小时
‑
62小时。6.根据权利要求3所述的用于生产生物乳化剂的方法，其特征在于，所述培养基包括以下质量百分比的组分：0.3％
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0.5％的葡萄糖、0.3％
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【专利技术属性】
技术研发人员：谷溢，马挺，余吉良，李国强，王冠，支博，张田田，吴珍珍，段丽莎，郭素贞，
申请(专利权)人：中国石油天然气股份有限公司，
类型：发明
国别省市：