【技术实现步骤摘要】
一种硫酸丝素蛋白/壳聚糖/羟基磷灰石三维复合支架制备方法
[0001]本专利技术涉及复合材料制备
,具体为一种硫酸丝素蛋白/壳聚糖/羟基磷灰石三维复合支架制备方法。
技术介绍
[0002]慢性难愈创面(如大面积烧伤、压疮、糖尿病引起的溃疡等),伤口不能及时自行愈合,极易出现体液流失和感染等后果,甚至导致患者死亡。目前,国内外尚无完全满足临床需求的理想的皮肤创面修复产品,传统医用纱布敷料不具备治疗修复功能,新型湿性敷料促伤口愈合能力较为有限,脱细胞真皮基质价格昂贵,易发生皮下积血。本专利技术构建的新型组织工程支架材料通过自身三维结构,透气保湿、能促进内皮细胞血管植入与肉芽组织生成,是良好的伤口护理组织工程皮肤替代物,可实现难愈合缺损创面的快速愈合,有效恢复皮肤缺损部位的组织功能。
[0003]丝素蛋白是天然蚕丝成分,具有较好的生物相容性与机械韧性,被用作皮肤真皮支架,在皮肤修复方面可诱导微血管植入和肉芽组织生成,通过对丝素蛋白进行硫酸化改性,可增加蛋白的抗凝血作用和细胞黏附力,并保留原蛋白的三维结构与支撑作用。壳聚糖以其优良的抗菌性、生物相容性和化学改性被广泛应用于皮肤创伤、软骨损伤修复中。羟基磷灰石有优良的生物相容性和骨传导性,对细胞合成、分泌胶原等细胞外基质有一定的促进作用。本专利技术复合三种材料制备出一种用于复杂创面的抗感染、促创面修复愈合的三维组织工程支架,帮助患者修复皮肤缺损或难愈的皮肤创面,对缓解或解除患者痛苦、减轻医疗负担、提升生活质量有重大意义。
技术实现思路
[0004] ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种硫酸丝素蛋白/壳聚糖/羟基磷灰石三维复合支架制备方法,包括如下步骤:步骤1,丝素蛋白制备;步骤1.1,用0.05%的Na2CO3煮沸生丝5次,每次1h;步骤1.2,用蒸馏水洗净步骤1.1处理后的生丝,在50℃下烘干,得到纯丝素纤维;步骤1.3,将CaCl2、CH3CH2OH、H2O三元溶剂溶解,在自来水下透析后加入步骤1.2的纯丝素纤维,于40℃
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60℃下搅拌溶解1
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2h得到混合溶液;步骤1.4,混合溶液冷却后注入纤维素透析膜,在流水下透析3d;步骤1.5,将步骤1.4透析后的溶液浓缩,得到丝素蛋白浓缩水溶液,4℃下保存备用。步骤2,硫酸化丝素蛋白制备;步骤2.1,在通风橱中将10ml氯磺酸与放在冰浴中的60ml吡啶混合,并加热到80℃;步骤2.2,在通风橱中将1g干丝素悬浮在40ml吡啶中并加热到80℃,然后倒入步骤2.1得到的混合溶液中,反应10h;步骤2.3,充分反应后,加入200ml水,然后用等摩尔的NaoH中和溶液;步骤2.4,用真空过滤法去除不溶物,可溶部分用500ml甲醇沉淀,沉淀物用离心过滤法收集并溶解在少量的水中;步骤2.5,透析脱盐后进行冷冻干燥得到硫酸化丝素蛋白。步骤3,羟基磷灰石制备步骤3.1,按摩尔比为:CaO:H3PO4=10:6的比例称取CaO和H3PO4;步骤3.2,将CaO粉体加入到蒸馏水中(盛于大烧杯中),用磁力搅拌器进行搅拌,形成浓度为0.5mol/l的Ca(OH)2悬浊液,作为母液;步骤3.3,将经蒸馏水稀释的H3PO4溶液(浓度为2.5mol/l)放置于固定在支架上的分液漏斗中,缓慢滴入到Ca(OH)2母液中,PH值控制在11
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14之间;步骤3.4,滴定完成后,母液在室温下放置至少48h,此过程为陈化,最后得到羟基磷灰石水溶胶;步骤3.5,将清洗后的干凝胶在120℃下干燥6h,然后再650℃下煅烧2h,最后得到羟基磷灰石粉末。步骤4,硫酸丝素蛋白/壳聚糖/羟基磷灰石三维复合支架的制备步骤4.1,用蒸馏水将步骤2制备的硫酸丝素蛋白配制成浓度为1%的硫酸丝素蛋白溶液,用2%的醋酸溶液将壳聚糖配置成浓度为4%的壳聚糖溶液;步骤4.2,将步骤4.1制备的硫酸丝素蛋白溶液和壳聚糖溶液与步骤3制备的羟基磷灰石粉末以体积/体积/质量比V/V/M=4:16:1的比例进行混合,搅拌真空脱气;步骤4.3,在步骤4.2的混合溶液中加入3%的甘油,得到混合黏液;步骤4.4,在步骤4.3的混合黏液中加入0.05%的戊二醛溶液,反应2h,涡旋搅拌或真空混匀;步骤4.5,将步骤4.4处理的溶液倒入模具中,
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20℃预冷过夜,在冷冻干燥机
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80℃~
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60℃...
【专利技术属性】
技术研发人员:马佩芬,李孟芸,胡敬龙,李丹茜,奎玉凤,蒋涛涛,
申请(专利权)人:兰州大学,
类型:发明
国别省市:
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