一种安吉白茶组织培养快速繁殖的方法技术

本发明专利技术公开了一种安吉白茶组织培养快速繁殖的方法，包括以下步骤：将安吉白茶带腋芽茎段消毒后置于含聚乙烯吡咯烷酮(PVP)的诱导培养基中诱导腋芽分化，将萌发的腋芽置于含PVP的分化培养基中诱导多丛芽；然后将多丛芽转入含PVP的生根培养基中，诱导生根获得无菌种苗，最后经过驯化培养移植大田。本发明专利技术简单易操作便，生产成本低、增殖倍数和生根率高，可快速促进安吉白茶种苗繁育和规模化生产。快速促进安吉白茶种苗繁育和规模化生产。快速促进安吉白茶种苗繁育和规模化生产。

【技术实现步骤摘要】
一种安吉白茶组织培养快速繁殖的方法


[0001]本专利技术属于植物组织培养
，特别涉及一种安吉白茶组织培养快速繁殖的方法。

技术介绍

[0002]安吉白茶是一种罕见白化茶树品种，叶狭长椭圆,叶片中茶多酚含量低，氨基酸含量高，是普通茶树品种的2倍左右。以安吉白茶芽叶为原料制成的白茶，形态美观，香气优雅，滋味甘醇鲜爽，汤色清澈明亮，叶底色白如玉。
[0003]褐化现象是组织培养过程中常见的问题之一,酚类物质是造成外植体发生褐变的重要底物，如何有效降低外植体褐化率是目前一个技术难题。
[0004]安吉白茶为茶树优良品种，常用扦插繁育的方式进行繁殖，但该繁殖方法易受自然条件限制，多年连续无性繁殖和病虫危害会产生良种种性退化问题，影响产量和品质。组织培养技术可以加快优良品种的繁育，并且能够保持良种种性，促进种苗复壮、提高产量和品质。如何建立高效的再生技术体系，实现良种快速繁育，是目前急需解决的一个问题。

技术实现思路

[0005]为加快安吉白茶良种繁育，本专利技术提供了一种安吉白茶的组织培养方法。
[0006]本专利技术提供了一种安吉白茶组织培养快速繁殖的方法，包括以下步骤：
[0007](1)外植体选择，选用当年生枝芽饱满的半木质化新梢作为外植体。
[0008](2)外植体消毒，去除外植体叶片，流水清洗后，剪成短茎段，然后用消毒液浸泡，最后在无菌水中漂洗，获得消毒的外植体。
[0009](3)抑制外植体褐化，将步骤(2)获得的消毒外植体接种到含抑制外植体褐化的抗氧化剂PVP或AC的基础培养基上。
[0010](4)初代诱导培养，将消毒的外植体接种到初代诱导培养基中，诱导外植体腋芽萌发。
[0011](5)继代增殖培养，将萌发的外植体转接到增殖培养基中，诱导多丛芽生长。
[0012](6)生根培养，将多丛芽切成单芽，接种至生根培养基，诱导出白色根，获得无菌种苗。
[0013]优选的，步骤(2)所述的茎段含至少1个饱满腋芽，采用酒精和次氯酸钠消毒。
[0014]优选的，步骤(2)所述的消毒的方法具体指用清水清洗茎段，然后用70％酒精处理，用2％次氯酸钠处理，最后用无菌水清洗。
[0015]更优选的，步骤(2)所述消毒的方法具体为：将外植体在流水下小心冲洗1
‑
2h，然后在超净台中剪成2
‑
3cm茎段，用无菌水清洗3次；接着用70％酒精处理60s，用无菌水清洗3
‑
4次；再用2％次氯酸钠溶液处理25min，最后用无菌水清洗3
‑
4次。
[0016]优选的，步骤(3)所述的抑制外植体褐化的抗氧化剂PVP的浓度为1.5g L
‑1、2.0g L
‑1或2.5g L
‑1，活性炭AC的浓度为0.5g L
‑1、1.0g L
‑1或1.5g L
‑1。
[0017]更优选的，步骤(3)所述的抑制外植体褐化的最适抗氧化剂是浓度为2.0g L
‑1的PVP。优选的，步骤(3)所述的基础培养基为MS+6
‑
BA 4.0mg
·
L
‑1+IBA 1.5mg
·
L
‑1+蔗糖30g
·
L
‑1+琼脂8g
·
L
‑1，pH值为5.8。
[0018]优选的，步骤(4)所述的初代诱导培养基为MS+6
‑
BA 2.0mg
·
L
‑1+IBA 1.5mg
·
L
‑1+PVP 2.0g
·
L
‑1+蔗糖30g
·
L
‑1+琼脂8g
·
L
‑1，pH值为5.8，用于诱导腋芽萌发。
[0019]优选的，步骤(5)所述的继代增殖培养基为MS+IBA0.1mg
·
L
‑1+6
‑
BA 1.5mg
·
L
‑1+PVP 2.0
[0020]g
·
L
‑1+蔗糖30
·
g L
‑1+琼脂8
·
g L
‑1，pH值为5.8，用于增殖培养。
[0021]优选的，步骤(6)所述的生根培养基为1/2MS+IBA 1.0mg
·
L
‑1+PVP 2.0g
·
L
‑1+蛭石，用于多丛芽生根。
[0022]优选的，步骤(3)、步骤(4)、步骤(5)和步骤(6)所述的培养条件均为每天光照培养16h，光照强度90μmol
·
m
‑2·
s
‑1条件下，温度为28℃；黑暗培养8h，温度为23℃。
[0023]本专利技术提供了一种安吉白茶组织培养快繁的方法，包括抑制外植体褐化的抗氧化剂筛选，初代诱导培养，继代增殖培养和生根培养。该快繁技术能够快速高效的繁殖安吉白茶植株，在短时间内为生产提供大量优质幼苗，为规模化生产安吉白茶提供种源。因此实用性强、应用前景大。
附图说明
[0024]图1为安吉白茶腋芽分化。
[0025]图2为安吉白茶多丛芽增殖。
[0026]图3为安吉白茶生根。
具体实施方式
[0027]下面结合实施例对本专利技术提供的技术方案进行详细的说明，应当理解本专利技术的保护范围并不受具体实施方式的限制。
[0028]实施例1
[0029](1)外植体预处理
[0030]选择安吉白茶新萌发无病虫害带腋芽茎段，将采集的茶树带腋芽茎段剪去叶片，保留在叶柄部位，0.5％洗洁精溶液浸泡50min，用流动水冲洗30min。
[0031](2)外植体消毒
[0032]茎段消毒：将预处理的外植体移至超净工作台，用70％酒精消毒1min，无菌水清洗3
‑
4次后，用2％次氯酸钠消毒25min，无菌水清洗5
‑
6次。将消毒后的外植体放入带有滤纸的培养皿内(均灭菌)，吸干表面水分，剪成1.5cm长的茎段，上部平切，下部斜切，上短(1/3)下长(2/3)，插入培养基中。
[0033](3)抑制外植体褐化
[0034]将消毒后的茎段接种于含抑制外植体褐化的抗氧化剂PVP或AC的基础培养基上，20天后统计褐化率，筛选出抑制外植体褐化最适的抗氧化剂为2.0g
·
L
‑1的PVP。所述基础培养基为MS+6
‑
BA 4.0mg
·
L
‑
1+IBA 1.5mg
·
L
‑
1+蔗糖30g
·
L
‑
1+琼脂8g
·
L
‑
1，pH为5.8。
[003本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种安吉白茶组织培养快速繁殖方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)外植体选择，选用当年生无病虫害枝芽饱满的半木质化新梢作为外植体；(2)外植体消毒，去除2/3外植体叶片，流水清洗后，剪成短茎段，然后消毒获得消毒的外植体；(3)抑制外植体褐化，将步骤(2)获得的消毒外植体接种到含抑制外植体褐化的抗氧化剂聚乙烯吡咯烷酮PVP或活性炭AC的基础培养基上；(4)初代诱导培养，将消毒的外植体接种到诱导培养基中，诱导外植体腋芽萌发；(5)继代增殖培养，将萌发的外植体转接到增殖培养基中，诱导生长多丛芽；(6)生根培养，将多丛芽切成单芽，接种至生根培养基，诱导出白色根，获得无菌种苗。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤(2)所述的茎段含至少1个饱满腋芽。3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：步骤(2)所述获得消毒的外植体步骤为，将外植体在流水下小心冲洗1～2h，然后在超净台中剪成2
‑
3cm茎段，用无菌水清洗3次；接着用70％酒精处理60s，用无菌水清洗3
‑
4次；再用2％次氯酸钠溶液处理25min，最后用无菌水清洗3
‑
4次。4.根据权利要求1所述的方法，步骤(3)所述的含抑制外植体褐化的抗氧化剂聚乙烯吡咯烷酮PVP的浓度为1.5g L
‑1、2.0g L
‑1或2.5g L
‑1，活性炭AC的浓度为0.5g L
‑1、1.0g L
‑1或1.5g L
‑1。5.根据权利要求1所述的方法，步骤(3)所述的抗氧化剂聚乙烯吡咯烷酮PVP浓度为2.0g L
‑1。6.根据权利要求1所述的方法，步骤(3)所述的基础培养基为MS+6
‑
BA 4.0mg
·
L
‑1+IBA 1.5...

【专利技术属性】
技术研发人员：李敏，刘卫敏，张凯悦，周硕，黄晓琴，
申请(专利权)人：山东农业大学，
类型：发明
国别省市：