一种抗肿瘤多肽偶联药物的制备及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种抗肿瘤多肽偶联药物及其应用。该多肽偶联药物的分子序列为：MTX

【技术实现步骤摘要】
一种抗肿瘤多肽偶联药物的制备及其应用


[0001]本专利技术涉及蛋白多肽药物领域，特别是肝癌、卵巢癌和淋巴癌治疗过程中的所涉及的抗肿瘤药物领域，具体涉及一种多肽和MTX药物的偶联及其应用。

技术介绍

[0002]癌症已发展为困扰全球的一个重大的健康问题，是全球范围内导致人类死亡的主要原因之一。据世界卫生组织统计，2018年接近1000万人死于癌症。更为严重的是，世界上新增癌症病例以每年接近两千万速度增长，仅2020年新增癌症病例达1930万例，死亡病例接近1000万例。
[0003]癌症的治疗方法有很多，例如化学疗法、放射疗法、免疫疗法和手术切除等方法。在这些治疗方法中，手术切除和放射疗法经常被用于非转移性癌症的治疗，抗癌药物(化学疗法、激素)经常被用于转移性癌症的治疗。
[0004]小分子在代谢稳定性、膜渗透性等方面具有显着优势，但也具有更高的脱靶效应，因此具有更高的毒性风险。
[0005]和其他小分子类药物相比，肽类药物有一些独特的优势：肽类分子的潜在毒性低于小分子、相对较少的脱靶副反应等。
[0006]肽
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药物缀合物(Peptide
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drug conjugates,PDC)是一种新型的分子药物递送系统，一般由多肽、共价连接子和有效载荷三部分组成。通常药物通过共价连接子与多肽的结合后，赋予多肽和药物的双向功能，能够起到促进药物的杀伤或靶向作用，PDC药物是一种有前景的癌症治疗方式。
[0007]蜜蜂毒素Melittin是从欧洲蜜蜂毒液中提取出来的生物活性多肽。蜜蜂毒素Melittin 是一种含有26个氨基酸残基的细胞穿透性α螺旋肽。Melittin能够产生多靶点的抗肿瘤作用，包括破坏细胞膜、抗增殖、抗侵袭和抗转移等作用。
[0008]甲氨蝶呤(methotrexate,MTX)是一种常被用于治疗白血病的药物，但是其耐药性等限制了它的进一步应用。另外，MTX的低细胞摄取率是MTX癌症治疗过程中的一大挑战。
[0009]共价连接子包含的类型多样，包括脂肪链、聚乙二醇、氨基酸等诸多类型。其中，氨基酸是化学合成中最常用的共价连接子之一。GFLG四肽序列已被广泛应用于组织蛋白酶
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B存在条件下可被切割的间隔区，GFLG四肽间隔区在分子递送系统中最为常见，能够实现在肿瘤环境中组织蛋白酶
‑
B的定点切割，从而发挥分子递送系统中的共价连接子作用。
[0010]针对MTX低细胞摄取率这一不足，我们设计了MTX的多肽偶联药物。MTX通过 GFLG和蜜蜂毒素Melittin连接，构成了以Melittin多肽为载体、MTX作为有效载荷的药物分子递送系统。其中，MTX和多肽中的甘氨酸通过酰胺键实现化学合成，从而成功构建了 MTX
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GFLG
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Melittin分子递送系统。
[0011]固相多肽合成(SPPS)是目前合成天然多肽和非天然多肽的主要应用方法。固相多肽合成中常用的缩合体系如HCTU/DIPEA、HATU/HOAt/DIPEA和DIC/HOBt。这些缩合体系所使用的温度条件一般为30℃，温度相对来说较低，氨基酸的缩合反应时间相对较长。
[0012]有资料显示，在50℃的条件下利用DIC/Oxyma缩合体系能够完成多肽的快速合成。 50℃条件下，利用DIC/Oxyma缩合体系完成氨基酸的缩合反应具有以下优势：(1)多肽的合成速度相对较快，能够减少约1/2的氨基酸的缩合时间(2)氨基酸的缩合具有较强的稳健性(3)氨基酸缩合过程中的氨基酸消旋率比较低，在缩合过程中氨基酸的消旋率不高于3％。本法明采用了高温法对上述PDC药物中多肽部分的合成

技术实现思路

[0013]为解决甲氨蝶呤在抗肿瘤应用中的不足，尤其是经常用药而导致肿瘤细胞的耐药性和低的细胞摄取率，从而导致抗肿瘤效果降低。本专利技术的主要目的是提供一种抗肿瘤多肽偶联药物及其应用。
[0014]本专利技术第一方面提供一种多肽偶联药物，其包括所述抗肿瘤多肽、细胞毒性药物和连接子。其分子序列为MTX
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GFLG
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GIGAVLKVLTTGLPALISWIKRKRQQ
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NH2[0015]进一步地，所述细胞毒性药物为肿瘤化疗小分子药物。
[0016]优选地，所述肿瘤化疗药物为甲氨蝶呤。
[0017]进一步地，所述连接子为四个氨基酸序列Gly
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Phe
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Leu
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Gly，GFLG。GFLG可以被肿瘤微环境和肿瘤细胞内的高表达的酶，如组织蛋白酶
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B分解。
[0018]进一步地，所述多肽偶联药物具有如式A所示结构，其中，Melittin表示权利要求 1所述的抗肿瘤多肽及式A所述的peptide，其氨基酸序列为 H
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GIGAVLKVLTTGLPALISWIKRKRQQ
‑
NH2。
[0019][0020]本专利技术提供所述多肽偶联药物的制备方法，包括如下步骤：
[0021](1)50℃条件下，DIC/Oxyma缩合系统完成Melittin多肽链的合成。采用Fmoc固相合成方法，将Fmoc
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Gln
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OH偶联到Rink
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Amide AM树脂上，然后依次偶联Fmoc
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Gln
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OH、 Fmoc
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Arg
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OH、Fmoc
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Lys
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OH、Fmoc
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Arg
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OH、Fmoc
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Lys
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OH、Fmoc
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Ile
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OH、Fmoc
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Trp
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OH、 Fmoc
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Ser
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OH、Fmoc
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Ile
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OH、Fmoc
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Leu
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OH、Fmoc
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Ala
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OH、Fmoc
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Pro
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OH、Fmoc
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Leu
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OH、 Fmoc
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Gly
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OH、Fmoc
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Thr
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OH、Fmoc
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Thr
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OH、Fmoc
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Leu
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OH、Fmoc
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Val
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OH、Fmoc
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Lys
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OH、 Fmoc
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Leu
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OH、Fmoc
‑
Val
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种多肽偶联药物的制备及其作为抗肿瘤药物的应用，其特征在于蜜蜂毒素抗肿瘤多肽Melittin和MTX细胞毒性药物通过连接子GFLG连接。2.根据权利要求1所述的多肽偶联药物，其特征在于，所述多肽偶联药物具有如式A所示结构：3.根据权利要求2所述Peptide为蜜蜂毒素Melittin其氨基酸序列为：Gly
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Ile
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Gly
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Ala
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Val
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Leu
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Lys
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Val
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Leu
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Thr
‑
Thr
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Gly
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Leu
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Pro
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Ala
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Leu
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Ile...

【专利技术属性】
技术研发人员：齐昀坤，杜姗姗，贾世玺，杨立霞，
申请(专利权)人：青岛科技大学，
类型：发明
国别省市：