诱导记忆B细胞特异性分化的方法及其用途技术

本发明专利技术涉及特异性诱导记忆B细胞分化的方法及其用途，更具体地，涉及特异性诱导记忆B细胞分化的方法，包括采用抗CD3抗体或配体以及抗CD28抗体或配体处理从对象获得的生物学样品，以及使用特定抗原检测对其具有特异性的记忆B细胞的方法。忆B细胞的方法。忆B细胞的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】诱导记忆B细胞特异性分化的方法及其用途


[0001]本申请要求于2020年1月22日提交的韩国专利申请号10
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2020
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0008914的优先权，并且将其整体通过引用引入本文。
[0002]本专利技术涉及特异性诱导记忆B细胞分化的方法及其用途，更具体地，涉及特异性诱导记忆B细胞分化的方法，包括采用抗CD3抗体或配体以及抗CD28抗体或配体处理从对象获得的生物学样品，以及使用特定抗原检测对其具有特异性的记忆B细胞的方法。

技术介绍

[0003]当我们的身体受到病毒或细菌等病原体的攻击，或者遇到我们体内不存在的成分(如疫苗)的抗原时，我们的身体就会对病原体或抗原产生免疫记忆过程。免疫记忆过程被称为记忆应答，但由于我们体内形成的记忆，当我们的身体再次接触病原体或疫苗抗原时，相关的免疫应答发生得更强更快。导致这种免疫记忆应答的关键免疫细胞是B细胞和T细胞，其在获得性免疫中起重要作用。因此，如果这些免疫细胞被很好地分离和分析，那么每个人的免疫记忆的数量和质量可以被测量出来，不仅可以成为判断我们身体过去处于什么样的免疫状况的标准，而且还可以预测在未来病原体入侵的情况下，什么样的免疫防御机制会起作用。
[0004]然而，在临床实践中，由于细胞诊断技术的复杂性和难度限制，大多数医务人员并不能轻易地获得每位患者的最新免疫信息。目前，最常用的方法是间接测量和确定血液中抗体的方法，该抗体被认为是免疫记忆细胞活性的产物。然而，这种常规方法的缺点在于，抗体反应的维持程度因病原体的种类和宿主的不同而不同，且难以在没有形成抗体的疾病特定时期使用。
[0005]直接测量免疫记忆细胞的方法也有很大的局限性，最大的原因是体内负责免疫记忆的细胞数量非常少。此外，由于大多数细胞存在于免疫器官(脾脏、淋巴结和肠)中，而不是用于诊断的血液中，因此侵入性样本采集技术或制备过程复杂，需要使用间接成像医疗技术。
[0006]同时，根据Clinical and experimental immunology 177:333
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340，已知一种处理各种分化因子混合物以分析抗原特异性记忆B细胞的方法。然而，这种方法的局限性在于诱导分化为未暴露于抗原的幼稚B细胞而呈现非特异性抗原
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抗体反应。
[0007]因此，通过避免需要接触免疫器官等的侵入性方法，并使用最容易获得的血液，只有记忆B细胞非常准确地特异性分化，因此需要一种能够确认是否存在对特定抗原特异的记忆B细胞的方法。
[0008]技术问题
[0009]因此，本专利技术人进行了许多研究以开发能够特异性地仅诱导记忆B细胞分化的方法，该方法使用可以通过非侵入性方法获得的血液，结果发现仅记忆B细胞的分化可以通过抗CD3抗体或配体以及抗CD28抗体或配体处理从对象获得的生物学样品来特异性诱导，进而完成了本专利技术。
[0010]本专利技术的一个目的是提供特异性诱导记忆B细胞分化的方法，包括用抗CD3抗体或配体以及抗CD28抗体或配体处理从对象获得的生物学样品。
[0011]本专利技术的另一个目的是提供检测抗原特异性记忆B细胞的方法，包括(a)用抗CD3抗体或配体以及抗CD28抗体或配体处理从对象获得的生物学样品；(b)用抗原处理生物学样品；(c)检测与所述抗原特异性结合的抗体。
[0012]本专利技术的另一个目的是提供用于特异性诱导记忆B细胞分化的组合物，其包含抗CD3抗体或配体以及抗CD28抗体或配体。
[0013]本专利技术的另一个目的是提供用于特异性诱导记忆B细胞分化的组合物，该组合物由抗CD3抗体或配体以及抗CD28抗体或配体组成。
[0014]本专利技术的另一个目的是提供用于特异性诱导记忆B细胞分化的组合物，其主要由抗CD3抗体或配体以及抗CD28抗体或配体组成。
[0015]本专利技术的再一个目的是提供抗CD3抗体或配体以及抗CD28抗体或配体在制备用于特异性诱导记忆B细胞分化的试剂中的用途。
[0016]技术方案
[0017]根据本专利技术的一个方面，提供了特异性诱导记忆B细胞分化的方法，包括用抗CD3抗体或配体以及抗CD28抗体或配体处理从对象获得的生物学样品。
[0018]根据本专利技术的另一方面，提供了检测抗原特异性记忆B细胞的方法，包括(a)抗CD3抗体或配体以及抗CD28抗体或配体处理从对象获得的生物学样品；(b)用抗原处理所述生物学样品；(c)检测与所述抗原特异性结合的抗体。
[0019]根据本专利技术的另一方面，提供了用于特异性诱导记忆B细胞分化的组合物，其包含抗CD3抗体或配体以及抗CD28抗体或配体。
[0020]根据本专利技术的另一方面，提供了用于特异性诱导记忆B细胞分化的组合物，其由抗CD3抗体或配体以及抗CD28抗体或配体组成。
[0021]根据本专利技术的另一方面，提供了用于特异性诱导记忆B细胞分化的组合物，其主要由抗CD3抗体或配体以及抗CD28抗体或配体组成。
[0022]根据本专利技术的另一方面，提供了抗CD3抗体或配体以及抗CD28抗体或配体在制备特异性诱导记忆B细胞分化的试剂中的用途。
[0023]在下文中，将详述本专利技术。
[0024]根据本专利技术的示例性实施方案，证实了当用抗CD3抗体或配体以及抗CD28抗体或配体处理源自从对象获得的血液的PBMC时，诱导了记忆B细胞特异性分化，而幼稚B细胞分化没有被诱导。
[0025]因此，本专利技术提供了特异性诱导记忆B细胞分化的方法，包括用抗CD3抗体或配体以及抗CD28抗体或配体处理从对象获得的生物学样品。
[0026]在本专利技术中，“对象”的类型没有特别限定，例如可以是人、猴、狗、猫、兔、豚鼠、大鼠、小鼠、牛、绵羊、猪或山羊，优选是人。
[0027]特别地，对象可以是待分析过去是否有细菌或病毒感染史的对象。
[0028]在本专利技术中，“生物学样品”的类型没有特别限定，只要该生物学样品是从对象获得的样品即可。例如，生物学样品可以选自全血、血浆、血清、外周血单核细胞(PBMC)、尿液、粪便、唾液、痰液、汗液、泪液、组织及其组合，优选全血、血浆、血清、PBMC及其组合，最优选
PBMC。
[0029]在本专利技术中，“抗CD3抗体”或“抗CD28抗体”是指针对CD4
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T细胞表面表达的CD3或CD28的抗原区域的特异性蛋白质分子。在本专利技术中，抗体是指特异性结合CD3或CD28以激活CD4
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T细胞的抗体，包括所有的多克隆抗体、单克隆抗体和重组抗体。
[0030]本专利技术的抗体包括抗体分子的功能片段以及具有两条全长轻链和两条全长重链的完整形式。抗体分子的功能片段是指至少具有抗原结合功能的片段，包括Fab、F(ab')、F(ab')2、Fv等，但不限于此。
[0031]在本专利技术中，“配体”是指能够与CD3或CD28结合的各种分子。优选地，配体是指与CD3或CD28结合以激活CD4
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种特异性诱导记忆B细胞分化的方法，其包括：用抗CD3抗体或配体以及抗CD28抗体或配体处理从对象获得的生物学样品。2.根据权利要求1所述的方法，其中所述生物学样品选自：全血、血浆、血清、外周血单核细胞(PBMC)、尿液、粪便、唾液、痰液、汗液、泪液、组织及其组合。3.根据权利要求1所述的方法，还包括：在用抗CD3抗体或配体以及抗CD28抗体或配体处理从所述对象获得的生物学样品之前，从所述生物学样品中去除CD8
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T细胞。4.根据权利要求1所述的方法，其中诱导所述记忆B细胞的分化以分泌IgG和IgM。5.一种检测抗原特异性记忆B细胞的方法，包括以下步骤：(a)用抗CD3抗体或配体以及抗CD28抗体或配体处理从对象获得的生物学样品；(b)用抗原处理所述生物学样品；以及(c)检测与所述抗原特异性结合的抗体。6.根据权利要求5所述的方法，还包括：在步骤(a)中，在用抗CD3抗体或配体以及抗CD28抗体或配体处理从所述对象获得的生物学样品之前，从所述生物学样品中去除CD8
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T细胞。7.根据权利要求5所述的方法，其中所述抗原选自结核分枝杆菌抗原、炭疽抗原、甲型肝炎病毒(HAV)抗原、乙型肝炎病毒(HBV)抗原、丙型肝炎病毒(HCV)抗原、人类免疫缺陷病毒(HIV)抗原、流感病毒抗原、单纯疱疹病毒(HSV)抗原、b型流感嗜血杆菌(Hib)抗原、脑膜炎奈瑟菌抗原、白喉...

【专利技术属性】
技术研发人员：洪廷宙，G，
申请(专利权)人：韩国生命工学研究院，
类型：发明
国别省市：