SCD1在制备肝癌患者预后诊断试剂或药物筛选中的应用制造技术

本发明专利技术提供了SCD1在制备肝癌患者预后诊断试剂或预后药物筛选中的应用。通过检测SCD1表达水平可有效预测肝癌患者预后情况，有助于肝癌患者预后随访和辅助治疗方案的制定。此外，本发明专利技术还发现肝癌细胞基质硬度提高促进肝癌细胞的侵袭和转移，降低SCD1表达水平可有效降低肝癌细胞的侵袭和转移能力，可以作为肝癌预后预防或治疗的药物潜在靶点。预后预防或治疗的药物潜在靶点。

【技术实现步骤摘要】
SCD1在制备肝癌患者预后诊断试剂或药物筛选中的应用


[0001]本专利技术涉及肝癌预后
，尤其涉及SCD1在制备肝癌患者预后诊断试剂或药物筛选中的应用。

技术介绍

[0002]2020年全球恶性肿瘤流行病学资料表明，肝癌新发人数位于第六位，死亡人数位于第三位，是一种难以治疗的恶性肿瘤。原发性肝癌具有发病率高、预后差、死亡率高的特点。由于原发性肝癌早期没有典型的临床症状多数患者在确诊时已进入中晚期,仅有不到20％的患者能采用外科手术切除治疗。肝移植术是肝癌治疗的二线治疗方案, 但是手术治疗后,肝癌的复发率高,侵袭性强,术后需要采用肝动脉化疗、射频消融治疗、放疗等方式进一步缩小残留肿瘤,减少复发或转移。对于无法手术治疗的肝癌患者,常用的非手术治疗方式包括肝动脉栓塞化疗(TACE)、射频治疗、微波消融、无水乙醇注射PEI)、高频率超声聚焦消融(HFU)、中药治疗、免疫治疗等,其中TECA是无法手术切除的肝癌患者治疗的首选方案,但是单独应用患者的预后并不够理想,需要综合其他治疗方法进行治疗。
[0003]硬酯酰辅酶A去饱和酶1(Stearoyl
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CoA Desaturase 1,SCD1)是将脂肪酰基δ9键去饱和催化饱和脂肪酸C16:0、C18:0生成单不饱和脂肪酸C16:1、C18:1的重要限速酶。SCD1主要分布在肝脏，对体内三酰甘油、胆固醇酯、磷脂和蜡酯等的合成起关键作用。王宏伟等研究显示，下调SCD1表达可抑制人肝癌细胞株HepG2的增殖，并促进其凋亡 (王宏伟,李莉,杨志立,等.小分子干扰RNA下调硬脂酰辅酶A去饱和酶
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1对肝癌HepG2细胞增殖及凋亡的影响[J].新乡医学院学报,2015,032(001):1
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3,7.)。苏改改等研究显示，脂代谢相关基因 SCD1与血管生成相关，SCD1是抑制血管生成和肿瘤发展的潜在靶点 (苏改改,刘红丽,孙永健,等.脂代谢相关基因PPARγ2和SCD1与血管内皮生长因子VEGF在肝细胞癌组织的蛋白表达相关性及临床意义[J].河南师范大学学报(自然科学版),2020,v.48；No.211(02):106
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110.)。现有研究对SCD1的研究主要集中其脂质代谢作用以及抑制其在癌细胞中高表达进而获得一定的肿瘤控制作用。
[0004]由于肝癌患者出院后，难以实现对患者体内肿瘤的长期有效监控，使得肿瘤初期复发或进展难以及时发现并给与干预，目前临床也缺乏快速有效的肝癌预后检测手段，耽误早期干预时机，不利于肝癌患者预后生存。

技术实现思路

[0005]为了解决肝癌预后较差的问题，本专利技术提供了一种新的肝癌预后标志物SCD1，通过检测SCD1表达水平可有效预测肝癌患者预后情况，有助于肝癌患者预后随访和辅助治疗方案的制定。此外，本专利技术还发现肝癌细胞基质硬度提高促进肝癌细胞的侵袭和转移，降低SCD1表达水平可有效降低肝癌细胞的侵袭和转移能力，可以作为肝癌预后预防或治疗的药物潜在靶点。
[0006]为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供了SCD1在制备肝癌患者预后诊断试剂或预后
药物筛选中的应用。
[0007]本专利技术还提供了一种肝癌预后预测试剂盒，包括SCD1表达水平的检测试剂。
[0008]优选的，所述肝癌患者预后的诊断试剂盒的诊断项目包括：诊断肝癌患者预后肝癌细胞侵袭能力、诊断肝癌患者预后肝癌细胞转移能力、肝癌患者无瘤生存率和肝癌患者总生存率中的一种或多种。
[0009]优选的，所述诊断试剂盒的诊断对象包括肝基质细胞硬度高于 1.6kPa的肝癌患者。
[0010]优选的，所述检测SCD1表达水平的试剂包括SCD1免疫组化检测试剂、RT
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qPCR或Western Blot。
[0011]本专利技术还提供了降低SCD1表达水平的试剂在制备预防或治疗肝癌患者预后的药物中的应用。
[0012]优选的，所述降低SCD1表达水平的试剂包括SCD1抑制剂、SCD1 表达基因抑制剂和SCD1前体物质表达水平抑制剂中的一种或多种。
[0013]与现有技术相比，本专利技术的有益效果：
[0014]1、本专利技术发现SCD1是一种新的肝癌细胞基质硬度响应蛋白，可作为肝癌预后预防或治疗药物筛选靶标。
[0015]采用高、低硬度的聚丙烯酰胺凝胶模拟基质硬度，体外培养肝癌细胞并进行脂质组学分析。发现在高基质硬度培养条件下，肝癌细胞中大多数脂质类别中的单不饱和脂肪酸/饱和脂肪酸(MUFA/SFA)的比率增加；在这些脂质中，含有C18:1不饱和脂肪酸的膜磷脂占优势， C16:1脂肪酰链的有增加趋势；同时，肝癌细胞MHCC97H中含有C18:0 的磷脂或Huh7肝癌细胞中含有C16:0的磷脂显著降低。这些表明SCD1 是肝癌细胞基质硬度响应蛋白，重编程肝癌细胞脂质代谢。进一步，通过western blot确认随着基质硬度增加，SCD1表达发生相应变化。在高、低不同基质硬度培养条件下，改变SCD1表达/活性，引起肝癌细胞脂质成分改变，膜流动性和体外侵袭能力的改变。敲除SCD1后可抑制肝癌细胞的侵袭和转移能力。
[0016]更进一步的，基于SCD1对因肝脏基质细胞硬度所致的肝癌细胞侵袭、转移能力增加，可以利用降低SCD1表达水平的试剂制备相关预防或治疗药物。
[0017]第二方面，本专利技术发现SCD1作为肝癌患者预后预测指标的潜在临床应用价值。
[0018]人肝癌组织标本中，SCD1表达与肝癌患者术后无瘤生存率和总生存率相关，表明SCD1能预测肝癌患者预后，有利于患者随访和辅助治疗方案制定。本专利技术意外发现肝脏基质细胞硬度与肝癌患者预后生存率有显著相关性，SCD1表达水平与肝脏基质细胞硬度呈正相关，进而试验验证显示，人肝癌组织样本中，SCD1表达量与肝癌患者术后无瘤生存率和总生存率相关，表明通过SCD1的表达水平可预测肝癌患者的预后情况，可作为肝癌患者预后情况预测的标志物。
附图说明
[0019]图1为实施例1中基质硬度检测结果图；
[0020]图2为实施例1中SCD1蛋白在不同硬度基质胶的表达结果图；
[0021]图3为实施例1中肝癌细胞系在不同基质硬度下的细胞体外侵袭能力检测结果图；
[0022]图4为敲低SCD1或SCD1抑制剂CAY10566抑制高硬度基质诱导的细胞侵袭能力检测结果图；
[0023]图5为不同SCD1表达水平下肝癌细胞体外侵袭能力检测结果图；
[0024]图6为不同SCD1表达水平下肝癌细胞细胞膜流动性检测结果图；
[0025]图7为不同SCD1表达水平下肝癌细胞原位成瘤能力检测结果图；
[0026]图8为肝癌组织高表达SCD1的患者无瘤生存率及总生存率结果图。
具体实施方式
[0027]在本专利技术中，“肝癌”包括源于肝细胞本身的肝细胞癌和其他组织传播到肝脏的转移性肝癌，优选的，“肝癌”指肝细胞癌。
[0028]在本专利技术中，所本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.SCD1在制备肝癌患者预后诊断试剂或预后药物筛选中的应用。2.一种肝癌患者预后的诊断试剂盒，其特征在于，包括SCD1表达水平的检测试剂。3.根据权利要求2所述的诊断试剂盒，其特征在于，所述肝癌患者预后的诊断试剂盒的诊断项目包括：诊断肝癌患者预后肝癌细胞侵袭能力、诊断肝癌患者预后肝癌细胞转移能力、肝癌患者无瘤生存率和肝癌患者总生存率中的一种或多种。4.根据权利要求2所述的诊断试剂盒，其特征在于，所述诊断试剂盒的诊断对象包括肝基质细胞硬度高于1.6kPa的肝癌患...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘华华，陈荣新，崔杰峰，任正刚，
申请(专利权)人：复旦大学附属中山医院，
类型：发明
国别省市：