一种用于治疗神经损伤疾病的基因药物制造技术

本发明专利技术涉及一种用于治疗神经损伤疾病的基因药物，属于基因治疗技术领域；本发明专利技术一方面公开了Porf

【技术实现步骤摘要】
一种用于治疗神经损伤疾病的基因药物


[0001]本专利技术涉及一种用于治疗神经损伤疾病的基因药物，属于基因治疗


技术介绍

[0002]视神经(optic nerve)是由视网膜神经节细胞(retinal ganglion cell，RGC)发出的轴突在视神经盘处会聚，再穿过巩膜而构成，是胚胎发生时间脑向外突出形成视器过程中的一部分，本质上属于中枢神经系统。
[0003]视神经损伤，也被称为外伤性视神经炎病变(traumatic optic neuropathy)，是颅脑损伤中常见和严重的并发症之一。车祸伤、坠落伤和打击伤容易造成视神经损伤，尤其是车祸伤。锐器刺伤视神经引起的直接损伤以及视神经其他部位的直接损伤在临床上比较少见，90％以上的视神经损伤是视神经管段的间接性损伤。具体来说，间接性视神经损伤是指眼眶外侧，一般指眉弓颞上部受到撞击，外力通过颅骨传递至视神经管，引起视神经管变形或骨折，造成视神经损伤而引起的视力、视野障碍等。
[0004]关于视神经损伤的临床治疗，目前常见的治疗方法主要包括保守治疗、激素治疗、手术治疗(例如，视神经管减压术、自体移植治疗等)、视神经的保护及再生。传统的保守治疗、激素治疗或手术治疗都无法达到很好的治疗效果。由于RGCs的再生能力低下，视神经损伤后RGCs难以再生从而导致视神经萎缩和失明的情况；因此，如何使受损的视神经修复再生，恢复视神经功能，是目前国内外眼科临床研究的难题。
[0005]研究表明，找准合适的靶点来增强受损RGCs的再生能力，是能够促进视神经再生的，也有相关的基因治疗的科研成果。
[0006]关于基因治疗的手段，以腺相关病毒为载体的基因治疗技术经过近二十年的发展取得了一定成果。腺相关病毒(adeno associated virus，AAV)属于微小病毒科依赖病毒属，是目前发现的一类结构最简单的无被膜、具有二十面体结构的单链DNA缺陷型病毒，需要辅助病毒(通常为腺病毒)参与复制。腺相关病毒的两个末端的反向重复序列(ITR)中包含了cap和rep基因，其中，cap基因编码病毒衣壳蛋白，rep基因参与病毒的复制和整合。野生型AAV感染人类19号染色体的概率约为19％，但经过改造后的重组腺相关病毒(rAAV)因其无法合成Rep蛋白，从而使其确缺失定点整合的能力，主要以游离体的形式存在，发生插入突变和激活癌基因的概率极低；鉴于重组腺相关病毒的安全性好、宿主细胞范围广、免疫源性低，在体内表达外源基因时间长等特点，被视为最有前途的基因转移载体之一，在世界范围内的基因治疗研究中得到广泛应用。
[0007]目前，AAV载体可分为有12种血清型(AAV
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1～AAV
‑
12)以及100多种变异体(例如一些衍生的嵌合AAV载体)。不同AAV载体对不同细胞或组织的转染效率不尽不同。其中AAV2、AAV9被证明对于神经系统相对来说有较高的转染效率。
[0008]但对于神经损伤疾病的基因治疗，尤其是对于视神经损伤疾病的治疗仍有很长的一段路要走；因此，本领域希望能够寻找到未来可以应用于临床的关键性靶点，并开发有效治疗神经损伤疾病、尤其是视神经损伤疾病的方法和药物。

技术实现思路

[0009]本专利技术公开了，以RNA干扰(RNAi)为手段研究了Porf
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2基因在视神经损伤疾病的治疗/改善方面的作用，并由此提供了一种治疗/改善视神经损伤疾病的方法，该方法包括向患者的视神经组织施用一种能够特异性抑制Porf
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2基因的转录或翻译，或能够特异性抑制Porf
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2蛋白的表达或活性的分子，从而治疗/改善视神经损伤疾病。
[0010]鉴于Porf
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2基因除了在视神经组织中存在以外，还存在于其他神经组织中；在本专利技术的专利技术人公开了“以RNAi手段揭示的Porf
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2基因在视神经损伤疾病的治疗/改善方面的作用”的基础之上，本领域技术人员可以合理地延伸到：Porf
‑
2基因还可以应用于其他神经损伤疾病的治疗/改善。
[0011]因此，本专利技术第一方面提供了Porf
‑
2基因在治疗/改善神经损伤疾病方面的用途。
[0012]所述治疗/改善神经损伤疾病方面的用途中，向患者的神经组织施用的分子的用量为足够降低Porf
‑
2基因的转录或翻译，或者足够降低Porf
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2蛋白的表达或活性的剂量。优选的，所述Porf
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2基因的表达至少被降低30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％、95％或99％。
[0013]所述向患者的神经组织施用的分子可选自但不限于：核酸分子、碳水化合物、脂类、小分子化学药、抗体药、多肽、蛋白或干扰病毒。
[0014]所述核酸包括但不限于：反义寡核苷酸、双链RNA(dsRNA)或者短发夹RNA(shRNA)。
[0015]所述双链RNA(dsRNA)或者短发夹RNA(shRNA)含有Porf
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2基因的启动子序列或编码区序列的信息。
[0016]优选的，所述双链RNA(dsRNA)为小干扰RNA(siRNA)。所述小干扰RNA包含相互互补形成RNA二聚体的第一链和第二链；所述第一链的序列与所述Porf
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2基因中的15
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27个连续的核苷酸序列(靶序列)基本相同。所述siRNA能够特异性结合靶序列所编码的mRNA片段，并特异性沉默Porf
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2基因的表达。
[0017]所述Porf
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2基因中的靶序列即为：当所述siRNA特异性沉默Porf
‑
2基因表达时，与所述的siRNA互补结合的mRNA片段所对应的Porf
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2基因中的片段。
[0018]优选的，所述Porf
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2基因为来源于人的Porf
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2基因。
[0019]优选的，所述神经损伤疾病为视神经损伤疾病。
[0020]本专利技术第二方面提供了Porf
‑
2基因或Porf
‑
2蛋白在制备或筛选神经损伤疾病的治疗/改善药物方面的用途。
[0021]所述治疗/改善神经损伤疾病方面的用途中，向患者的神经组织施用的分子的用量为足够降低Porf
‑
2基因的转录或翻译，或者足够降低Porf
‑
2蛋白的表达或活性的剂量。优选的，所述Porf
‑
2基因的表达至少被降低30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％、95％或99％。
[0022]所述向患者的神经组织施用的分子可选自但不限于：核酸分子、碳水化合物、脂类、小分子化学药、抗体药、多肽、蛋白或干扰病毒。
[0023]所述核酸包括但不限于：反义寡核苷酸、双链RNA(dsRNA)或者短发夹RN本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.Porf
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2基因在制备或筛选神经损伤疾病的治疗/改善药物方面的用途。2.如权利要求1所述用途，其特征在于：所述用途为分离的Porf
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2基因或Porf
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2蛋白在筛选神经损伤疾病的治疗/改善药物方面的用途。3.如权利要求1或2所述用途，其特征在于：所述神经损伤疾病为视神经损伤疾病。4.一种治疗/改善神经损伤疾病的分离的核酸分子，其特征在于：所述分离的核酸分子包含靶向神经组织中Porf
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2基因、并敲低所述神经组织中Porf
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2基因表达的双链RNA和/或shRNA。5.如权利要求4所述的分离的核酸分子，其特征在于：所述Porf
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2基因的靶序列为如SEQ ID NO：1～6中任一序列所示；所述双链RNA为siRNA，其包含相互互补形成RNA二聚体的第一链和第二链；所述第一链的序列与所述Porf
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2基因的靶序列相同或基本相同；所述shRNA包含正义链片段和反义链片段，以及连接所述正义链片段和反义链片段的茎环片段，所述正义链片段和所述反义链片段的序列互补，并且所述正义链片段的序列与所述Porf
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2基因的靶序列相同或基本相同。6.一种Porf
‑
2...

【专利技术属性】
技术研发人员：冯东福，
申请(专利权)人：上海市奉贤区中心医院，
类型：发明
国别省市：