M蛋白测定及其用途制造技术

本公开文本提供了用于测量从受试者获得的生物样品中的M蛋白的方法，所述方法包括将纯化的免疫球蛋白施加至液相色谱(LC)质谱法(MS)。在一些方面，使用免疫捕获(IC)纯化所述免疫球蛋白。在某些方面，所述受试者患有浆细胞障碍，例如多发性骨髓瘤。例如多发性骨髓瘤。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】M蛋白测定及其用途
相关申请的交叉引用
[0001]本PCT申请要求2019年11月5日提交的美国临时申请号62/931,063的优先权权益，将其通过引用以其整体并入本文。


[0002]本公开文本提供了用于测量生物样品中的M蛋白的方法。

技术介绍

[0003]单克隆丙种球蛋白病是特征在于一种或多种通常称为M蛋白的单克隆免疫球蛋白的异常产生的血液障碍。M蛋白通过骨髓中的快速分裂的克隆浆细胞表达并且分泌到血流中，因此恶性浆细胞可以通过测量血液中的M蛋白来检测。M蛋白本质上是多样的：每位患者的过度产生的抗体的可变区是不同的；然而，个体的恶性浆细胞表达与其原始前体细胞具有相同的分子质量的确定的免疫球蛋白。
[0004]M蛋白的测量对于多发性骨髓瘤患者的诊断和监测是必需的。由于与M蛋白共迁移的免疫球蛋白或其他血清蛋白的存在，因此当前基于凝胶电泳的M蛋白测定具有较差的灵敏度、特异性并且在极低M蛋白浓度下无法定量。因此，存在对于用于测量生物样品中的M蛋白的改善方法的需要。

技术实现思路

[0005]本公开文本的某些方面涉及一种测量从患有浆细胞障碍的受试者获得的样品中的M蛋白的方法，所述方法包括：(i)通过免疫捕获纯化所述样品中的免疫球蛋白和游离轻链，以及(ii)将所述免疫球蛋白和游离轻链施加至液相色谱(LC)质谱法(MS)。
[0006]本公开文本的某些方面涉及一种在用于浆细胞障碍的疗法后在确定完全反应者时减少假阳性的方法，所述方法包括：(i)通过免疫捕获纯化所述生物样品中的免疫球蛋白和游离轻链，以及(ii)将所述纯化的免疫球蛋白和游离轻链施加至液相色谱(LC)质谱法(MS)。
[0007]本公开文本的某些方面涉及一种鉴定患有残留病的受试者的方法，所述方法包括测量从所述受试者获得的生物样品中的M蛋白，其中所述M蛋白通过以下方式测量：(1)通过免疫捕获纯化所述生物样品中的免疫球蛋白和游离轻链，以及(2)将所述纯化的免疫球蛋白和游离轻链施加至液相色谱(LC)质谱法(MS)；其中所述患者先前被鉴定为患有浆细胞障碍。
[0008]本公开文本的某些方面涉及一种鉴定适于用于治疗浆细胞障碍的疗法的受试者的方法，所述方法包括：(i)测量从所述受试者获得的生物样品中的M蛋白，其中所述M蛋白通过以下方式测量：(1)通过免疫捕获纯化所述生物样品中的免疫球蛋白和游离轻链，以及(2)将所述纯化的免疫球蛋白和游离轻链施加至液相色谱(LC)质谱法(MS)。在一些方面，所述方法进一步包括：(ii)向被鉴定为具有M蛋白的受试者施用用于治疗所述浆细胞障碍的
疗法。
[0009]在一些方面，所述受试者患有浆细胞障碍。
[0010]本公开文本的某些方面涉及一种治疗患有浆细胞障碍的受试者的方法，所述方法包括：测量从所述受试者获得的生物样品中的M蛋白，其中所述M蛋白通过以下方式测量：(1)通过免疫捕获纯化所述生物样品中的免疫球蛋白和游离轻链，以及(2)将所述纯化的免疫球蛋白和游离轻链施加至液相色谱(LC)质谱法(MS)；并且向被鉴定为具有M蛋白的受试者施用用于治疗所述浆细胞障碍的疗法。
[0011]本公开文本的某些方面涉及一种治疗患有浆细胞障碍的受试者的方法，所述方法包括：(i)向所述受试者施用用于所述浆细胞障碍的疗法；(ii)测量从所述受试者获得的生物样品中的M蛋白，其中所述M蛋白通过以下方式测量：(1)通过免疫捕获纯化所述生物样品中的免疫球蛋白和游离轻链，以及(2)将所述纯化的免疫球蛋白和游离轻链施加至液相色谱(LC)质谱法(MS)；以及(iii)向所述受试者施用用于所述浆细胞障碍的另外的疗法。
[0012]在一些方面，所述生物样品是尿液样品或血清样品。
[0013]本公开文本的某些方面涉及一种治疗患有浆细胞障碍的受试者的方法，所述方法包括向所述受试者施用用于所述浆细胞障碍的疗法，其中所述受试者已经被鉴定为具有血清和/或尿液M蛋白，并且其中所述血清和/或尿液M蛋白是通过将使用免疫捕获纯化的免疫球蛋白和游离轻链施加至液相色谱(LC)质谱法(MS)在从所述受试者获得的生物样品中测量的。
[0014]在一些方面，所述受试者接受过用于治疗浆细胞障碍的先前疗法。在一些方面，所述先前疗法包括免疫疗法。在一些方面，所述用于浆细胞障碍的疗法包括免疫疗法。在一些方面，所述免疫疗法包括抗体疗法。在一些方面，所述免疫疗法包括检查点抑制剂的疗法。在一些方面，所述抗体包括特异性结合选自以下的蛋白质的抗体或其抗原结合部分：SLAMF7、PD
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1、CTLA
‑
4、LAG3、TIGIT、TIM3、NKG2a、OX40、ICOS、CD137、KIR、TGFβ、IL
‑
10、IL
‑
8、IL
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2、CD96、VISTA、B7
‑
H4、Fas配体、CXCR4、间皮素、CD27、GITR、CD40、CD56、CD38、CD229、CD200、CD28、CD19、BCMA、CD317、CD70、B2M及其任何组合。在一些方面，所述用于浆细胞障碍的疗法包括抗SLAMF7抗体。
[0015]在一些方面，所述用于浆细胞障碍的疗法包括环磷酰胺、多柔比星、依托泊苷、脂质体多柔比星、美法仑、长春新碱、硼替佐米、来那度胺、卡非佐米、泊马度胺、帕比司他、沙利度胺、干细胞移植、CAR
‑
T疗法或其任何组合。
[0016]在一些方面，所述M蛋白包括IgG、IgA、和IgM、IgD、其片段或其任何组合。在一些方面，所述M蛋白包括κ同种型或λ同种型。在一些方面，所述M蛋白包含一条或多条游离轻链。
[0017]在一些方面，所述MS包括电喷雾(ESI)飞行时间(TOF)MS。在一些方面，所述MS包括激光解析电离(MALDI)TOF。在一些方面，所述MS包括MALDI TOF MS。
[0018]在一些方面，所述免疫捕获是自动化免疫捕获。在一些方面，所述纯化的免疫球蛋白被解离为轻链和重链。在一些方面，所述方法进一步包括将所述纯化的免疫球蛋白解离为轻链和重链。在一些方面，所述纯化的免疫球蛋白通过化学还原解离。在一些方面，所述纯化的免疫球蛋白是通过使所述纯化的免疫球蛋白与选自以下的试剂接触来解离：三(2
‑
羧乙基)膦(TCEP)；TCEP
‑
HCl和其他TCEP盐；DTT(2,3二羟基丁烷
‑
1,4
‑
二硫醇)、DTE(2,3二羟基丁烷
‑
1,4
‑
二硫醇)；巯基乙醇酸盐；亚硫酸盐；亚硫酸氢盐；硫化物；二硫化物；2
‑
巯基
乙醇；2
‑
巯基乙醇
‑
HCl；Bond
‑
Breaker TCEP溶液，中性pH；半胱氨酸
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HCl；胍
‑
HCl；尿素；及其任何组合。
[0019]本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种测量从患有浆细胞障碍的受试者获得的样品中的M蛋白的方法，所述方法包括：(i)通过免疫捕获纯化所述样品中的免疫球蛋白和游离轻链，以及(ii)将所述免疫球蛋白和游离轻链施加至液相色谱(LC)质谱法(MS)。2.一种在用于浆细胞障碍的疗法后在确定完全反应者时减少假阳性的方法，所述方法包括：(i)通过免疫捕获纯化所述生物样品中的免疫球蛋白和游离轻链，以及(ii)将所述纯化的免疫球蛋白和游离轻链施加至液相色谱(LC)质谱法(MS)。3.一种鉴定患有残留病的受试者的方法，所述方法包括测量从所述受试者获得的生物样品中的M蛋白，其中所述M蛋白通过以下方式测量：(1)通过免疫捕获纯化所述生物样品中的免疫球蛋白和游离轻链，以及(2)将所述纯化的免疫球蛋白和游离轻链施加至液相色谱(LC)质谱法(MS)；其中所述受试者先前被鉴定为患有浆细胞障碍。4.一种鉴定适于用于治疗浆细胞障碍的疗法的受试者的方法，所述方法包括：(i)测量从所述受试者获得的生物样品中的M蛋白，其中所述M蛋白通过以下方式测量：(1)通过免疫捕获纯化所述生物样品中的免疫球蛋白和游离轻链，以及(2)将所述纯化的免疫球蛋白和游离轻链施加至液相色谱(LC)质谱法(MS)。5.根据权利要求3或4所述的方法，所述方法进一步包括：(ii)向被鉴定为具有M蛋白的受试者施用用于治疗所述浆细胞障碍的疗法。6.根据权利要求1至5中任一项所述的方法，其中所述受试者患有浆细胞障碍。7.一种治疗患有浆细胞障碍的受试者的方法，所述方法包括：(i)测量从所述受试者获得的生物样品中的M蛋白，其中所述M蛋白通过以下方式测量：(1)通过免疫捕获纯化所述生物样品中的免疫球蛋白和游离轻链，以及(2)将所述纯化的免疫球蛋白和游离轻链施加至液相色谱(LC)质谱法(MS)；以及(ii)向被鉴定为具有M蛋白的受试者施用用于所述浆细胞障碍的疗法。8.一种治疗患有浆细胞障碍的受试者的方法，所述方法包括：(i)向所述受试者施用用于所述浆细胞障碍的疗法；(ii)测量从所述受试者获得的生物样品中的M蛋白，其中所述M蛋白通过以下方式测量：(1)通过免疫捕获纯化所述生物样品中的免疫球蛋白和游离轻链，以及(2)将所述纯化的免疫球蛋白和游离轻链施加至液相色谱(LC)质谱法(MS)；以及(iii)向所述受试者施用用于所述浆细胞障碍的另外的疗法。9.根据权利要求1至8中任一项所述的方法，其中所述生物样品是尿液样品或血清样品。10.一种治疗患有浆细胞障碍的受试者的方法，所述方法包括向所述受试者施用用于所述浆细胞障碍的疗法，其中所述受试者已经被鉴定为具有血清和/或尿液M蛋白，并且其中所述血清和/或尿液M蛋白是通过将使用免疫捕获纯化的免疫球蛋白和游离轻链施加至液相色谱(LC)质谱法(MS)在从所述受试者获得的生物样品中测量的。11.根据权利要求1至10中任一项所述的方法，其中所述受试者接受用于治疗浆细胞障碍的先前疗法。
12.根据权利要求11所述的方法，其中所述先前疗法包括免疫疗法。13.根据权利要求2、4至8和10至12中任一项所述的方法，其中所述用于浆细胞障碍的疗法包括免疫疗法。14.根据权利要求13所述的方法，其中所述免疫疗法包括抗体疗法。15.根据权利要求14所述的方法，其中所述免疫疗法包括检查点抑制剂的疗法。16.根据权利要求14所述的方法，其中所述抗体包括特异性结合选自以下的蛋白质的抗体或其抗原结合部分：SLAMF7、PD
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1、CTLA
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4、LAG3、TIGIT、TIM3、NKG2a、OX40、ICOS、CD137、KIR、TGFβ、IL
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10、IL
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8、IL
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2、CD96、VISTA、B7
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H4、Fas配体、CXCR4、间皮素、CD27、GITR、CD40、CD56、CD38、CD229、CD200、CD28、CD19、BCMA、CD317、CD70、B2M及其任何组合。17.根据权利要求2、4至8和10至12中任一项所述的方法，其中所述用于浆细胞障碍的疗法包括抗SLAMF7抗体。18.根据权利要求2、4至8和10至12中任一项所述的方法，其中所述用于浆细胞障碍的疗法包括环磷酰胺、多柔比星、依托泊苷、脂质体多柔比星、美法...

【专利技术属性】
技术研发人员：R，
申请(专利权)人：百时美施贵宝公司，
类型：发明
国别省市：