一种阿贝西利有关物质的检测方法技术

本发明专利技术公开了一种阿贝西利有关物质的检测方法，属于医药技术领域。该检测方法采用高效液相色谱法，将待测物在C

【技术实现步骤摘要】
一种阿贝西利有关物质的检测方法


[0001]本专利技术属于医药
，具体涉及一种抗乳腺癌药物阿贝西利有关物质的检测方法。

技术介绍

[0002]乳腺癌是危害女性健康的主要恶性肿瘤，其发病率以每年2.0％的速度增长。多数乳腺癌患者因早期缺乏特异性表现，确诊时多为晚期，5年生存率仅为28.1％。据报道，在所有的乳腺癌患者中，多于70％的乳腺癌患者为激素受体(hormone receptor，HR)阳性和人表皮生长因子受体2(human epidermal growth factor receptor 2，HER
‑
2)阴性。因此，研究针对HR阳性与HER
‑
2阴性乳腺癌的治疗药物具有重大意义。
[0003]细胞周期蛋白依赖性激酶(cyclin
‑
dependent，CDK)是调控肿瘤细胞周期的主要因子，而肿瘤细胞周期过程紊乱会影响细胞的增殖、生长。研究表明：CDK4和CDK6是HR阳性与HER
‑
2阴性乳腺癌发生和进展的关键驱动因子，可作为重要的治疗靶点。因此，作为靶向细胞周期的CDK4/6抑制剂已成为治疗晚期乳腺癌的主要研究热点。目前，全球上市的CDK4/6抑制剂包括哌柏西利(Palbociclib)、阿贝西利(Abemaciclib)与Ribociclib，这三款CDK4/6抑制剂的出现，显著提高了HR阳性、HER2阴性乳腺癌患者的疗效，延长了患者生存期。基于CDK4/6抑制剂在临床研究中显示的可靠的疗效和良好的安全性，国内外指南一致推荐CDK4/6抑制剂作为HR阳性HER
‑
2阴性晚期乳腺癌患者的一、二线标准用药。阿贝西利是继哌柏西利、Ribociclib后FDA批准的第三款CDK4/6抑制剂，已于2020年12月在我国批准上市，也是第一个在以中国患者为主的HR阳性、HER
‑
2阴性晚期乳腺癌女性中证实CDK4/6抑制剂临床获益的Ⅲ期研究。
[0004]有关物质是指药品中除主成分以外的杂质，药品中的杂质多数具有潜在生物活性，会对药物的稳定性，疗效产生不利的影响，有些杂质不仅对人体有害，甚至产生新的副作用。因此，有关物质的研究与控制是保证药品安全，有效的重要因素。
[0005]目前，发现关于阿贝西利质量研究的文献较少，尤其是阿贝西利有关物质的检测方法未见报道。

技术实现思路

[0006]本专利技术的目的是提供一种抗乳腺癌药物阿贝西利有关物质的检测方法。
[0007]为了实现上述目的，本专利技术采用以下技术方案：
[0008]一种阿贝西利有关物质的检测方法，采用高效液相色谱法，将待测物在C
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反相柱中进行梯度洗脱，采用紫外检测器检测洗脱液；
[0009]所述待测物含有阿贝西利和/或阿贝西利有关物质；
[0010]所述梯度洗脱所使用的流动相为流动相A和流动相B，流动相A为磷酸二氢钾溶液和乙腈的混合溶液，流动相B为乙腈；
[0011]所述梯度洗脱的程序为：0～3min，0％B
→
0％B；3～10min，0％B
→
18％B；10～
20min，18％B
→
22％B；20～30min，22％B
→
45％B；30～40min，45％B
→
65％B；40～41min，65％B
→
0％B；41～50min，0％B
→
0％B。
[0012]进一步地，所述C
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反相柱的柱长为200～300mm，内径为4～5mm，填料粒径为4～6μm。优选色谱柱的规格为4.6mm
×
250mm，填料粒径为5μm。
[0013]进一步地，所述梯度洗脱的流速为0.9～1.1mL
·
min
‑1，优选为1.0mL
·
min
‑1。
[0014]进一步地，所述梯度洗脱的进样体积为5～20μL，优选为10μL。
[0015]进一步地，所述梯度洗脱的柱温为20～30℃，优选为25℃。
[0016]进一步地，所述紫外检测器的检测波长为295～305nm，优选为300nm。
[0017]进一步地，所述流动相A中磷酸二氢钾溶液和乙腈的体积比为90∶10，所述磷酸二氢钾溶液为含有0.4％三乙胺的0.025mol
·
L
‑1磷酸二氢钾溶液。
[0018]更进一步地，所述磷酸二氢钾溶液的pH为2.4～2.6，优选为2.5。
[0019]进一步地，所述待测物的溶剂为50％甲醇水溶液或甲醇。
[0020]本专利技术建立一种有效检测抗乳腺癌新药阿贝西利有关物质检测的高效液相色谱法，并对该检测方法进行验证。结果表明该方法专属性好，灵敏度高，线性关系、重复性、耐用性良好。本专利技术可为抗乳腺癌新药阿贝西利后续研究提供有价值的参考。
附图说明
[0021]图1为液相色谱条件优化的色谱图其中：A为甲醇
‑
水(80∶20)；B为乙腈
‑
水(80∶20)；C为甲醇
‑
水(60∶40)；D为乙腈
‑
水(60∶40)；E为梯度洗脱条件1；F为梯度洗脱条件2。
[0022]图2为系统适用性的色谱图。
[0023]图3为强降解试验的色谱图。
具体实施方式
[0024]下面结合附图和具体实施例对本专利技术作进一步详细说明，但不应理解为对本专利技术的限制。在不背离本专利技术精神和实质的情况下，对本专利技术方法、步骤或条件所作的修改或替换，均属于本专利技术的范围。实施例中未注明具体条件的实验方法及未说明配方的试剂均为按照本领域常规条件。
[0025]本专利技术使用的阿贝西利购于上海麦克林生化科技有限公司；甲醇、乙腈购自Merck公司(色谱纯)；盐酸、磷酸、氢氧化钠、双氧水、三乙胺购自国药集团化学试剂有限公司(分析纯)。
[0026]实施例1
[0027]检测方法的建立
[0028]1、溶剂的选择
[0029]取阿贝西利适量，分别用甲醇、乙腈超声溶解制成每1mL约含0.5、1、2mg的溶液。样品制备过程中发现，用乙腈作为溶剂，阿贝西利溶解度差，有沉淀物，未能充分溶解；用甲醇作为溶剂，阿贝西利样品均能充分溶解。秉着减少有机溶剂用量，降低污染，节约成本的原则，后续分别用50％甲醇水溶液、甲醇作为溶剂溶解样品，阿贝西利也可以充分溶解。
[0030]进一步考察用50％甲醇水溶液、甲醇作为溶剂样品溶液的稳定性。分别于室温下于0、1、2、5、10d取样检测。样品中有关物质均无明显变化。由此，选择50％甲醇水溶液作为
阿贝西利的溶剂。
[0031]2、液相色谱条件的优化
[0032]本专利技术所采用的系统适用性溶液是用碱性降解溶液与氧化降解溶液等比例混合制得，这样制得的系统适用性溶液具有杂质本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种阿贝西利有关物质的检测方法，其特征在于：采用高效液相色谱法，将待测物在C
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反相柱中进行梯度洗脱，采用紫外检测器检测洗脱液；所述待测物含有阿贝西利和/或阿贝西利有关物质；所述梯度洗脱所使用的流动相为流动相A和流动相B，流动相A为磷酸二氢钾溶液和乙腈的混合溶液，流动相B为乙腈；所述梯度洗脱的程序为：0~3 min，0%B
→
0%B；3~10 min，0%B
→
18%B；10~20 min，18%B
→
22%B；20~30min，22%B
→
45%B；30~40 min，45%B
→
65%B；40~41 min，65%B
→
0%B；41~50 min，0%B
→
0%B。2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：所述C
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反相柱的柱长...

【专利技术属性】
技术研发人员：蔡亮亮，马晓菲，韩勇，吴雯仪，
申请(专利权)人：南通大学附属医院，
类型：发明
国别省市：