【技术实现步骤摘要】
一种复合交联酶聚集体催化剂及其制备方法与应用
[0001]本专利技术属于生物工程
,具体涉及一种复合交联酶聚集体催化剂及其制备方法与应用。
技术介绍
[0002]阿可拉定,又名淫羊藿素,来自天然植物淫羊藿,是一种典型的异戊烯丙基黄酮苷类化合物。研究表明,阿可拉定具有抗肿瘤、抗风湿、抗抑郁、改善心脏分化等多种药理作用,尤其在治疗晚期肝癌上活性突出,被誉为继青蒿素之后中药的又一重大突破。阿可拉定软胶囊作为新型肝癌治疗药物已完成Ⅲ期临床实验并于2022年1月获批上市,因此阿可拉定的高效制备意义重大。
[0003]目前,阿可拉定的制备方法主要有三种:直接提取法、化学合成法以及糖基去除法。由于在草本植物淫羊藿中的天然含量不足0.1%,直接提取分离阿可拉定步骤复杂,难以大量生产。化学合成制备阿可拉定所需催化剂昂贵、条件苛刻且副产物多,不符合绿色生产理念。如图1所示,朝藿定A/B/C、淫羊藿苷等在内的黄酮苷化合物是淫羊藿中的主要活性成分,3位碳与7位碳上糖基的不同导致活性差异不同。其中阿可拉定是不含糖基、极性最小、活性最高的 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种复合交联酶聚集体催化剂,其特征在于,为α
‑
L
‑
鼠李糖苷酶与β
‑
D
‑
葡萄糖苷酶的共固定化酶,为200
‑
300 nm的球状颗粒构成的网状或簇状结构,在1220
‑
1330 cm
‑1范围内有红外吸收峰。2.一种复合交联酶聚集体催化剂的制备方法,其特征在于:包括以下步骤:1)将α
‑
L
‑
鼠李糖苷酶粗酶液与β
‑
D
‑
葡萄糖苷酶粗酶液混合获得粗酶混合液;其中β
‑
D
‑
葡萄糖苷酶和α
‑
L
‑
鼠李糖苷酶的酶活比为1:1~1:4;2)在所述粗酶混合液中加入沉淀剂进行共沉淀反应;所述沉淀剂为饱和硫酸铵溶液、乙醇、异丙醇、丙酮中的一种或几种,粗酶混合液与沉淀剂的体积比为1:0.1~1:1;共沉淀反应条件为4~25
ꢀ°
C下孵育2~24 h;3)将共沉淀反应后的体系加入交联剂进行共交联反应;所述交联剂为戊二醛、京尼平、聚乙烯亚胺中的一种或几种;交联剂的体积占粗酶混合液体积的0.1%~0.5%,共交联反应条件为4~25
ꢀ°
C下孵育2~24 h;4)共交联后反应体系离心、洗涤获得所述复合交联酶聚集体催化剂。3.根据权利要求2所述的复合交联酶聚集体催化剂的制备方法,其特征在于:步骤1)中β
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