一种余甘子提取物的制备方法及其在防治紫外线损伤中的应用技术

本发明专利技术公开了一种余甘子提取物的制备方法及其在防治紫外线损伤中的应用，对余甘子果实进行简单的提取干燥后可以得到富含总多酚的提取物，方法简单易于工业扩大化生产，得率高，由于使用单一部位进行提取，批次间质量稳定。得到的余甘子提取物可以显著提高由UVA/UVB引起的角质细胞损伤的细胞存活率，且具有优异的抗凋亡、抗氧化和抗炎功效，可以有效保护由UVA/UVB引起的角质细胞凋亡、氧化及炎症损伤，具有显著的防治紫外损伤的能力，可以应用于防晒类化妆品中。用于防晒类化妆品中。用于防晒类化妆品中。

【技术实现步骤摘要】
一种余甘子提取物的制备方法及其在防治紫外线损伤中的应用


[0001]本专利技术涉及一种余甘子提取物的制备方法及其在防治紫外线损伤中的应用。

技术介绍

[0002]紫外线是引起皮肤损伤的重要因素之一，会导致不可逆的细胞损伤、皮肤炎症、光老化和皮肤癌，其机制可能为UV引起的基因毒性、氧化应激、神经内分泌和炎症等。UV分为长波紫外线UVA(波长为320
‑
340nm)、中波紫外线UVB(波长为280
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320nm)和短波紫外线UVC(波长200
‑
280nm)。可以辐照到地面的紫外线95％为UVA，5％为UVB，UVA和UVB的照射会引起表皮组织中活性氧(ROS)生成量增加，过多的ROS会引发细胞内蛋白质、DNA、膜脂等成分的氧化损伤，破坏正常的细胞结构，引起皮肤的光损伤和光老化，甚至会进一步引起皮肤癌等疾病。过量的紫外线照射也可以引起细胞分泌一系列炎症因子，诱发皮肤炎症及加速皮肤损伤。紫外辐射可以诱导人体皮肤产生基质金属蛋白酶(Matrix metalloproteinase,MMP)，MMP能特异地降解几乎所有的细胞外基质成分，在皮肤光老化中起着重要作用。
[0003]角质形成细胞是表皮的主要组成细胞，具有保护机体免受外界物理、化学和微生物等多种因素损伤的作用。HaCaT细胞是一种被转化但非致癌的角质形成细胞，是国际上研究角质形成细胞最为常用的细胞株。建立了一种使用UVA/UVB诱导HaCaT细胞的光损伤模型，通过评估细胞保护、细胞凋亡、抗氧化能力、抗炎能力和抗光老化能力，可以研究植物提取物的防治紫外线能力。
[0004]余甘子又名油甘子，为大戟科叶下珠属植物余甘子(Phyllanthus emblica L.)的干燥成熟果实，味甘、酸、涩、凉，具有生津止咳、抗炎、抗氧化、抗肿瘤、抗血脂等功效。余甘子为药食同源植物，富含多酚、维生素、多糖、黄酮、氨基酸及生物碱，多酚为余甘子最为显著的抗氧化有效成分。
[0005]目前国内外对余甘子的研究主要集中在提取制备及抗氧化、抗衰方面，现有专利201310526465.5公开了一种余甘子提取物在制备具有抗辐射和抗衰老功效的保健食品和化妆品中的应用，检测了其对3T3细胞的UVA辐照保护作用、DNA损伤保护作用及抗炎作用。该专利使用甲醇、正丁醇作为提取溶剂，可能会使提取物残留甲醇、正丁醇有机溶剂，不适用于护肤品的制备，存在一定的安全风险。现有专利201711249854.3公开了一种余甘子具有提高基底膜相关基因和抗衰老相关基因表达能力，用于制备皮肤外用剂的应用。该专利没有进一步探究在护肤品中应用的实例。现有专利201911366808.0公开了一种余甘子提取物及其制备方法，使用醇提、高岭土吸附及柱层析，所得多酚含量≥98％，但是该专利提取物得率在1.36％左右，其方法较为繁琐，得率较低，不适用于工业扩大化生产。本专利使用更安全的试剂提取及更简单的提取方法，将余甘子提取物得率提升至60％，并且对UVA/UVB全面的紫外线防护，具有良好的防晒护肤品应用前景。

技术实现思路

[0006]本专利技术的目的是克服现有技术的缺陷，提供一种余甘子提取物的制备方法，对余甘子进行简单的提取干燥后可以得到富含总多酚的提取物，方法简单易于工业扩大化生产，得率高，由于使用单一部位进行提取，批次间质量稳定。
[0007]本专利技术的另外一个目的是提供一种余甘子提取物在防治紫外线损伤中的应用。
[0008]实现上述目的一种技术方案是：一种余甘子提取物的制备方法，包括以下步骤：
[0009]S1，粉碎步骤：将干燥洁净的余甘子果实用植物粉碎机粉碎，过4～6目筛，得到余甘子粉末原料；
[0010]S2，提取步骤：以60～80％的乙醇水混合液为溶剂，将粉碎好的余甘子粉末原料和溶剂按固液质量比1:5～10g/ml，提取温度为50～80℃进行加热回流提取；
[0011]S3，浓缩步骤：使用旋转蒸发仪、水浴加热对提取液进行浓缩，浓缩温度为40～70℃，浓缩至无醇味，得到浓缩液；
[0012]S4，冷冻干燥步骤：使用冷冻干燥机将浓缩液在低温下干燥成粉末，获得余甘子提取物。
[0013]上述的一种余甘子提取物的制备方法，所述粉碎步骤中，余甘子果实采用大戟科叶下珠属云南植物余甘子的干燥去核果实。
[0014]上述的一种余甘子提取物的制备方法，所述回流提取步骤中，采用乙醇水混合液对余甘子粉末原料进行1～3次加热回流提取，每次加热回流提取时间为1～3h。
[0015]上述的一种余甘子提取物的制备方法，余甘子提取物的得率≥60.0％，其中余甘子提取物的多酚含量≥40.0％，没食子酸含量≥2.0％。
[0016]本专利技术还提供了一种余甘子提取物在防治紫外线损伤中的应用。
[0017]上述的一种余甘子提取物在防治紫外线损伤中的应用，其中，将所述余甘子提取物作为皮肤防护紫外线有效成分，用于制备防治紫外线损伤护肤品中。
[0018]上述的一种余甘子提取物在防治紫外线损伤中的应用，其中，所述余甘子提取物用于保护由UVA辐照和/或UVB辐照引起的角质细胞的损伤和凋亡，以及清除产生的活性氧簇、降低炎症因子的释放、减少基质金属蛋白酶的产生。
[0019]采用本专利技术的余甘子提取物的制备方法及其应用的技术方案，积极进步效果在于：
[0020](1)采用本专利技术的制备方法所得的余甘子提取物，制备工艺简单，适于工业化扩大生产；得率高，可以充分利用资源，制备成本低，具有市场竞争力；主要成分为总多酚，含量高，易于质量控制；
[0021](2)采用本专利技术的制备方法所得的余甘子提取物，配制成溶液时，颜色澄清透明，可以在护肤品等对颜色要求高的产品中广泛使用；
[0022](3)采用本专利技术的制备方法所得的余甘子提取物，可以有效保护由于UVA及UVB辐照引起的角质细胞的损伤和凋亡，以及清除产生的活性氧簇、降低炎症因子的释放和减少基质金属蛋白酶(MMP3)的产生，具有显著的防护紫外线损伤能力，可以用于制备防治紫外线损伤护肤品中；
[0023](4)采用本专利技术的制备方法所得的余甘子提取物，通过光毒性检测试验，确保其不具有光毒性，保证了其安全性；通过致敏实验，确保其不具有致敏性；通过稳定性实验，确保
其良好的稳定性。
附图说明
[0024]图1为实施例1的总多酚含量测定中没食子酸标准品的线性关系图谱。
[0025]图2为实施例1的余甘子提取物的液相色谱图。
[0026]图3为实施例1的没食子酸含量测定中没食子酸标准品的线性关系图谱。
[0027]图4为本专利技术的一种具有防治紫外线损伤能力的余甘子提取物的实施例2对HaCaT细胞成长的影响(n＝3)。
[0028]图5为余甘子提取物对UVA/UVB辐照后HaCaT细胞增殖活性的影响(n＝3)。
[0029]图6为余甘子提取物对UVA/UVB辐照后HaCaT细胞活性氧簇(ROS)表达量的影响(n＝本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种余甘子提取物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：S1，粉碎步骤：将干燥洁净的余甘子果实用植物粉碎机粉碎，过4～6目筛，得到余甘子粉末原料；S2，提取步骤：以60～80％的乙醇水混合液为溶剂，将粉碎好的余甘子粉末原料和溶剂按固液质量比1:5～10g/ml，提取温度为50～80℃进行加热回流提取；S3，浓缩步骤：使用旋转蒸发仪、水浴加热对提取液进行浓缩，浓缩温度为40～70℃，浓缩至无醇味，得到浓缩液；S4，冷冻干燥步骤：使用冷冻干燥机将浓缩液在低温下干燥成粉末，获得余甘子提取物。2.如权利要求1所述的一种余甘子提取物的制备方法，其特征在于，所述粉碎步骤中，余甘子果实采用大戟科叶下珠属云南植物余甘子的干燥去核果实。3.如权利要求1所述的一种余甘子提取物的制备方法，其特征在于，所述回流提取步骤中，采用乙...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈月月，曲丽萍，王飞飞，吴巧霞，马骁，郭振宇，
申请(专利权)人：美达丝上海生物科技有限公司云南云科特色植物提取实验室有限公司上海际研生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：