一种适用于现场检测的分子检测方法及装置制造方法及图纸

本发明专利技术涉及分子生物学检测领域，尤其涉及一种适用于现场检测的分子检测方法和装置，其中，分子检测装置，包括：一样品处理容器，一提取检测盒和一加热平台，所述提取检测盒包括核酸提取区和检测区；其中，所述核酸提取区包括：一样品腔、一核酸结合腔和一废液腔以及一收集腔，所述样品腔具有注入孔，且样品腔与核酸结合腔流体连通，所述核酸结合腔分别与所述废液腔和所述收集腔之间通过阀门控制流体连通或关闭；所述检测区包括：一反应腔和一检测腔，所述反应腔与所述收集腔流体连通，所述反应腔设置有注入孔。利用本发明专利技术的检测装置，将采样、核酸提取、扩增、检测一次性完成，可在30min内对生物样本进行分子检测，适合于现场检测，方便、快捷。快捷。快捷。

【技术实现步骤摘要】
一种适用于现场检测的分子检测方法及装置


[0001]本专利技术涉及分子生物学检测领域，尤其涉及一种适用于现场检测的分子检测方法和装置。

技术介绍

[0002]随着现代生物技术的迅速发展，利用分子检测技术来获取待检物内的分子信息，已经被广泛使用。在一些情况下，为了及时、快速获得检测结果，需要对样品进行现场检测。分子检测包括核酸提取、核酸扩增和产物监测三个必要步骤，目前实验室常用的DNA提取方法有CTAB法、SDS法、试剂盒法等。这些核酸提取方法需要用到离心机、移液器等实验设备，且操作繁琐，耗时较长。核酸扩增需要温度升降，操作复杂且需要昂贵的材料和设备，难以直接应用于现场检测。
[0003]等温核酸扩增，如环介导等温扩增(“LAMP”)，因为其只需恒温装置(例如:水浴锅)，便能进行快速且高效的扩增反应，对仪器设备要求低，已被广泛使用。而为了适应现场检测方便、快捷的需求，也做了不少技术、相关装置上的适应性改进。例如，CN209537484U公开了一种用于核酸等温扩增快速检测的装置，包括密封瓶1，密封瓶1内设有反应内插管2，在核酸等温扩增快速检测实验中，往反应内插管2内加入100ul体系，旋紧瓶盖102，使密封瓶1保持密闭，放入63℃的恒温环境下温浴60min，扩增体系进行反应。该装置虽然能简单方便实现扩增，但是在户外的现场检测过程，至少还涉及到样品的处理、试剂的操控等步骤，采用该装置无法实现。

技术实现思路

[0004]本专利技术提供一种适用于现场检测的分子检测装置，结合核酸扩增和微流控技术，可以在微流控芯片上同时实现核酸提取和基因扩增的功能，将采样、核酸提取、扩增、检测一次性完成，可在30min内对生物样本进行分子检测，适合于现场检测。
[0005]本专利技术采用如下的技术方案：一种适用于现场检测的分子检测装置，包括：一样品处理容器，用于对样品进行细胞裂解处理；一提取检测盒，包括核酸提取区和检测区；一加热平台，对提取检测盒的全部或检测区部分进行加热，达到核酸扩增的反应温度；其中，所述核酸提取区包括：一样品腔、一核酸结合腔和一废液腔以及一收集腔，所述样品腔具有注入孔，且样品腔与核酸结合腔流体连通，所述核酸结合腔分别与所述废液腔和所述收集腔之间通过阀门控制流体连通或关闭；所述核酸结合腔内置供核酸分子结合的提取载体；所述检测区包括：一反应腔和一检测腔，所述反应腔与所述收集腔流体连通，所述反应腔设置有注入孔。
[0006]现场检测技术涉及到样品的处理、试剂的操控和结果分析。微流控技术是一种在微纳米尺度上对流体进行精确操控的技术，能够利用小体积液体，在芯片中实现样品和试剂的自动处理、快速反应等，非常适合现场检测应用。本专利技术结合核酸扩增和微流控技术，利用结构上的巧妙设计，将样品核酸的提取与基因扩增集成在同一装置内进行，装置结构紧凑，体积小，占用空间小，且方便操作，简单、快捷实现核酸提取和基因扩增。
[0007]作为优选，所述核酸提取区还包括：一清洗液腔和一洗脱液腔，两者均设置有注入孔，所述清洗液腔与洗脱液腔均与所述收集腔之间流体连通。
[0008]本方案中，独立设置清洗液腔和洗脱液腔，清洗液与洗脱液分开注入，还可以将洗脱液或者清洗液预先存放于对应的腔内，关闭相对应的阀门，无需另外携带洗脱液与清洗液的存放装置，更加便携，使用时，只需要打开对应的阀门即可。在开口处配置密封盖。
[0009]作为优选，所述检测区还包括：一定量腔，所述定量腔进口端与所述收集腔流体连通，出口端与所述反应腔流体连通。定量腔的设置可以对反应液进行定量，满足检测的定量需要。
[0010]作为优选，所述检测区设置为多个，多个定量腔均与收集腔流体连通。可以实现一对多的高通量检测。
[0011]作为优选，所述加热平台具有加热槽，供提取检测盒的全部或部分插入。
[0012]作为优选，所述加热平台可用电池、电源或USB接口供电，也可搭建太阳能板，平台为多层，可同时加热多个芯片。
[0013]作为优选，该分子检测装置包含有对样品进行研磨的研磨工具，适用于需要研磨的样品处理，例如果实、叶片、根茎等样品。
[0014]更加具体地，所述研磨工具包括研磨棒和研磨管，也可以仅仅包含研磨棒，直接在样品处理容器内进行研磨。
[0015]作为优选，所述提取载体为滤纸或硅胶膜。
[0016]作为优选，该分子检测装置还包含取样工具，取样工具有取样管和取样剪，取样管一端是手柄，用来手握，另一端切口为斜面，取样时可以对待测样品进行刮擦采样，也可以刺入待测样品内部进行采集。根据所需样品多少，可以选择不同规格大小的取样管。样品坚硬或干燥不适于用取样管时，可以用取样剪进行采集，也可用取样剪将样品剪碎以方便核酸提取。
[0017]作为优选，该分子检测装置还包含抽取器，将样品处理容器内经过裂解的样品液抽取至样品腔内。
[0018]作为优选，所述抽取器为前端设置有毛细管的注射器。
[0019]在清洗液或者洗脱液经过样品腔对样品进行清洗或洗脱时，由于提取载体的存在，使得清洗液或者洗脱液的经过受阻，流经速度很慢，因此优选，所述样品腔的注入孔处设置有密封橡胶圈，密封橡胶圈的中心孔与注射器的毛细管口径适配，这样设置，注射器的毛细管插入后，可以与密封橡胶圈之间形成相对密封的状态，利用注射器像样品腔内注射，提供一定的压力，有利于清洗液或者洗脱液经过样品的速度，提高清洗与洗脱效率。
[0020]同理，也优选，在其它注入孔，例如反应腔的注入孔、检测腔的注入孔也设置密封橡胶圈，密封橡胶圈的中心孔与注射器的毛细管口径适配。需要对相应的腔室内的液体提供推送力，即可使用抽取器推送，使液体顺利进入下一程序。
[0021]作为优选，该分子检测装置还包括箱体，用于容纳样品处理容器和提取检测盒等原件，便于整个装置的收纳、存放、携带。在箱体上设置提手。
[0022]本专利技术的另一目的是提供一种适用于现场检测的分子检测方法，使用上述的分子检测装置。
[0023]具体包括如下步骤：S
‑
1.取样、处理样品；S
‑
2.样品注入样品腔内；S
‑
3.清洗液腔内注入清洗液，打开清洗液腔与样品腔之间的阀门，清洗液流经所述核酸结合腔对样品进行清洗，清洗废液进入废液腔；此时所述核酸结合腔与所述收集腔之间的阀门也处于关闭状态；S
‑
4. 洗脱液腔内注入洗脱液，打开洗脱液腔与样品腔之间的阀门，洗脱液流经所述核酸结合腔将提取载体上的核酸洗脱下来，进入收集腔；此时所述核酸结合腔与所述废液腔之间的阀门也处于关闭状态；S
‑
5.经过洗脱获得的核酸分子进入定量腔进行定量，定量完成随即进入反应腔；S
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6.向反应腔内注入反应液，使用加热平台加热至反应温度，进行扩增反应；S
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7.将反应液送入检测室进行检测，观察、记载检测结果。
[0024]通过实施上述技术方案，本专利技术具有如下的有益效果：利用本专利技术的检测装置和方法，将采样本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种适用于现场检测的分子检测装置，其特征在于，包括：一样品处理容器，用于对样品进行细胞裂解处理；一提取检测盒，包括核酸提取区和检测区；一加热平台，对提取检测盒的全部或检测区部分进行加热，达到等温扩增的反应温度；其中，所述核酸提取区包括：一样品腔、一核酸结合腔和一废液腔以及一收集腔，所述样品腔具有注入孔，且样品腔与核酸结合腔流体连通，所述核酸结合腔分别与所述废液腔和所述收集腔之间通过阀门控制流体连通或关闭；所述核酸结合腔内置供核酸分子结合的提取载体；所述检测区包括：一反应腔和一检测腔，所述反应腔与所述收集腔流体连通，所述反应腔设置有注入孔。2.根据权利要求1所述的一种适用于现场检测的分子检测装置，其特征在于，所述核酸提取区还包括：一清洗液腔和一洗脱液腔，两者均设置有注入孔，所述清洗液腔与洗脱液腔均与所述收集腔之间流体连通。3.根据权利要求1所述的一种适用于现场检测的分子检测装置，其特征在于，所述检测区还包括：一定量腔，所述定量腔...

【专利技术属性】
技术研发人员：王爱英，刘淑华，唐健，杨保军，罗举，
申请(专利权)人：中国水稻研究所，
类型：发明
国别省市：