胰高血糖素和GLP-1受体的钉合烯烃共激动剂制造技术

本发明专利技术的钉合肽及其药学上可接受的盐是胰高血糖素和GLP

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】胰高血糖素和GLP
‑
1受体的钉合烯烃共激动剂
[0001]对序列表的引用
[0002]本申请包含以ASCII格式电子提交的序列表，并在此其整体通过引用并入。所述ASCII副本创建于2020年11月18日，名称为24934
‑
WO
‑
PCT
‑
SEQLIST.txt并且大小为20Kb。

技术介绍

[0003]本专利技术涉及胰高血糖素和GLP
‑
1受体的钉合共激动剂肽，以及这些钉合GLP
‑
1受体/GCG受体共激动剂用于治疗代谢紊乱的用途。
[0004]前高血糖素原是一种158个氨基酸的前体多肽，其在不同组织中加工以形成许多不同的高血糖素原衍生的肽，包括胰高血糖素、胰高血糖素样肽
‑
1(GLP
‑
1)、胰高血糖素样肽
‑
2(GLP
‑
2)和胃泌酸调节素(OXM)，它们参与多种生理功能，包括葡萄糖体内稳态、胰岛素分泌、胃排空和肠生长，以及食物摄入的调节。胰高血糖素是一种与前高血糖素原的氨基酸33
‑
61对应的29
‑
氨基酸肽，而GLP
‑
1以37个氨基酸肽的形式产生，其对应于前高血糖素原的72
‑
108位氨基酸。GLP
‑
1(7
‑
36)酰胺或(7
‑
37)酸是GLP
‑
1的生物有效形式，其对GLP/>‑
1受体表现出基本上等同的活性。
[0005]在低血糖症期间，当血糖水平降至正常以下时，胰高血糖素给肝脏发信号以分解糖原和释放葡萄糖，从而造成血糖水平向正常水平升高。低血糖症是胰岛素疗法在具有糖尿病所致的高血糖症(升高的血糖水平)的患者中的常见副作用。因此，胰高血糖素在葡萄糖调节中最公认的作用是抵消胰岛素的作用并维持血糖水平。
[0006]与胰高血糖素相比，GLP
‑
1具有不同的生物活性。它的作用包括刺激胰岛素合成和分泌，抑制胰高血糖素分泌，和抑制食物摄入。已经证实GLP
‑
1会减轻糖尿病患者中的高血糖症。毒蜥外泌肽
‑
4(Exendin
‑
4，一种来自蜥蜴毒液的肽，其与GLP
‑
1具有约50％氨基酸同一性)会活化GLP
‑
1受体且同样已经被证实会减轻糖尿病患者中的高血糖症。
[0007]还有证据表明GLP
‑
1和毒蜥外泌肽
‑
4可以减少食物摄入和促进重量减轻，所述效果不仅对糖尿病患者而且对遭受肥胖的患者都是有益的。肥胖患者具有较高的糖尿病、高血压、高脂血症、心血管疾病和肌肉骨骼疾病的风险。
[0008]胰高血糖素是一种在结构上与GLP
‑
1相关的肽激素，其由于它的通过刺激糖原分解和糖异生来增加血糖的急性能力而为人熟知(Jiang&Zhang,Am.J.Physio.l Endocrinol.Metab.284:E671
–
E678(2003))。较少知道的是以产热、饱腹感、脂解、脂肪酸氧化和生酮作用的增加为特征的胰高血糖素药理学的慢性作用(Habegger等人,Nat.Rev.Endocrinol.6:689
–
697(2010))。数十年以前首次报道了胰高血糖素的重复施用以产生啮齿动物代谢的改善，伴有较低的体重(Salter,Am.J.Clin.Nutr.8:535
–
539(1960))。尽管如此，高血糖症的固有风险，特别是在胰岛素抵抗状态诸如T2DM中，已经使这些观察结果向人研究的转移变得复杂化。
[0009]激素胃泌酸调节素(OXM，胰高血糖素
‑
37)是在肠和中枢神经系统(CNS)中加工的前高血糖素原的翻译后产物，并且响应于食物摄入而从肠中的L
‑
细胞分泌。在1983年发现的OXM已经涉及食物摄入和能量消耗的调节(Jarrouse等人,Endocrinol.115:102
‑
105
58:2258
‑
2266(2009))。相关重要的是与胃泌酸调节素(OXM)(胰高血糖素的一种内源性前体，其在餐后由空回肠的L
‑
细胞分泌)以及GLP
‑
1一起工作(Holst,Regul.Pept.93:45
‑
51(2000)；Drucker,Nat.Clin.Pract.Endocrinol.Metab.1:22
‑
31(2005)。
[0015]已经在公布的国际申请号WO2008/1010017、WO2009/155258、WO2011/075393、WO2012/177444、WO2012/177443；WO2016/065090；和WO2019/060660中公开了经修饰以在GLP
‑
1受体和GCG受体处具有多种活性程度的胰高血糖素肽类似物和衍生物。在其中报道了一些公开的胰高血糖素肽类似物在GLP
‑
1受体和GCG受体处具有活性；但是，仍然需要在GLP
‑
1受体和GCG受体处具有相对平衡的活性或效能的共激动剂肽。

技术实现思路

[0016]本专利技术提供了胰高血糖素(GCG)和胰高血糖素样蛋白1(GLP
‑
1)的钉合共激动剂肽，其由于在两个肽氨基酸之间形成分子内环而具有α
‑
螺旋构象。本专利技术的钉合肽的α螺旋结构由于蛋白水解降解的减少而导致物理稳定性增加，并且通过氢键自缔合形成β
‑
折叠的倾向降低，减少了原纤维形成和肽间聚集。原纤维形成和肽间聚集的减少可导致肽功效的增加，并允许使用较低剂量的肽以获得相同的生理或药理作用。此外，原纤维形成和肽间聚集的减少导致无菌肽溶液和肽制剂中不期望的沉淀形成量的减少。沉淀物的形成可导致混浊和凝胶状的悬浮液，这可能会对给药准确性产生不利影响，并可能在注射时引起免疫原性反应。
[0017]本专利技术的肽可用于治疗代谢性疾病或病症，例如但不限于，糖尿病(例如，1型糖尿病、2型糖尿病或妊娠糖尿病)、非酒精性脂肪肝病(NAFLD)、非酒精性脂肪性肝炎(NASH)和/或肥胖。
[0018]专利技术详述
[0019]本专利技术提供了具有下述氨基酸序列的胰高血糖素(GCG)受体和胰高血糖素样蛋白1(GLP
‑
1)受体的钉合肽共激动剂。
[0020]在一个实施方案中，本专利技术的GCG受体/GLP
‑
1受体共激动剂肽包含天然人胰高血糖素的氨基酸序列(SEQ ID NO:1)，其中
[0021]1)X2处的L
‑
丝氨酸被α
‑
氨基异丁酸(Aib)或D
‑
丝氨本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种肽，其包含天然人胰高血糖素的氨基酸序列HSQGTFTSDYSKYLDSRRAQDFVQWLMNT(SEQ ID NO:1)其中1)X2处的L
‑
丝氨酸被α
‑
氨基异丁酸或D
‑
丝氨酸替换；2)X
10
处的酪氨酸被赖氨酸、与脂肪酸缀合的赖氨酸或与脂肪二酸缀合的赖氨酸替换；3)X
16
处的L
‑
丝氨酸被α
‑
氨基异丁酸或谷氨酸替换；并且4)X
30
不存在或是通过γ
‑
谷氨酸间隔物缀合的赖氨酸；并且至多8个另外氨基酸替换选自：1)X
12
处的赖氨酸任选地被(R)
‑2‑
氨基
‑2‑
甲基辛
‑7‑
烯酸替换；2)X
17
处的精氨酸任选地被(R)
‑2‑
氨基
‑2‑
甲基辛
‑7‑
烯酸替换；3)X
19
处的丙氨酸任选地被(S)
‑2‑
氨基
‑2‑
甲基壬
‑8‑
烯酸替换；4)X
20
处的谷氨酰胺任选地被(R)
‑2‑
氨基
‑2‑
甲基辛
‑7‑
烯酸、(S)
‑2‑
氨基
‑2‑
甲基庚
‑6‑
烯酸或(S)
‑2‑
氨基庚
‑6‑
烯酸替换；5)X
21
处的天冬氨酸任选地被(R)
‑2‑
氨基
‑2‑
甲基辛
‑7‑
烯酸替换；6)X
24
处的谷氨酰胺任选地被(S)
‑2‑
氨基
‑2‑
甲基壬
‑8‑
烯酸、(S)
‑2‑
氨基
‑2‑
甲基庚
‑6‑
烯酸或(S)
‑2‑
氨基庚
‑6‑
烯酸替换；7)X
27
处的甲硫氨酸任选地被亮氨酸或(S)
‑2‑
氨基
‑2‑
甲基壬
‑8‑
烯酸替换；并且8)X
28
处的天冬酰胺任选地被天冬氨酸、(S)
‑2‑
氨基
‑2‑
甲基壬
‑8‑
烯酸、(S)
‑2‑
氨基
‑2‑
甲基庚
‑6‑
烯酸或(S)
‑2‑
氨基庚
‑6‑
烯酸替换；前提条件是所述肽包含环化形成含双键环的至少两个氨基酸，其选自：(R)
‑2‑
氨基
‑2‑
甲基辛
‑7‑
烯酸、(S)
‑2‑
氨基
‑2‑
甲基壬
‑8‑
烯酸、(S)
‑2‑
氨基
‑2‑
甲基庚
‑6‑
烯酸和(S)
‑2‑
氨基庚
‑6‑
烯酸；或其药学上可接受的盐。2.根据权利要求1所述的肽，其中环化形成含双键环的所述两个氨基酸选自：1)一个(R)
‑2‑
氨基
‑2‑
甲基辛
‑7‑
烯酸和一个(S)
‑2‑
氨基
‑2‑
甲基壬
‑8‑
烯酸；2)两个(S)
‑2‑
氨基
‑2‑
甲基庚
‑6‑
烯酸；和3)两个(S)
‑2‑
氨基庚
‑6‑
烯酸；或其药学上可接受的盐。3.根据权利要求1所述的肽，其包含下式HX2QGTFTSDX
10
SX
12
YLDX
16
X
17
AX
19
X
20
X
21
FVX
24
WLX
27
X
28
TX
30
‑
NH2(SEQ ID NO:20)其中X2是α
‑
氨基异丁酸或D
‑
丝氨酸；X
10
是赖氨酸、与脂肪酸缀合的赖氨酸或与脂肪二酸缀合的赖氨酸；X
12
是(R)
‑2‑
氨基
‑2‑
甲基辛
‑7‑
烯酸或赖氨酸；X
16
是α
‑
氨基异丁酸(Aib)或谷氨酸；X
17
是(R)
‑2‑
氨基
‑2‑
甲基辛
‑7‑
烯酸或精氨酸；X
19
是(S)
‑2‑
氨基
‑2‑
甲基壬
‑8‑
烯酸或丙氨酸；X
20
是谷氨酰胺、(R)
‑2‑
氨基
‑2‑
甲基辛
‑7‑
烯酸、(S)
‑2‑
氨基
‑2‑
甲基庚
‑6‑
烯酸或(S)
‑2‑
氨基庚
‑6‑
烯酸；
X
21
是天冬氨酸或(R)
‑2‑
氨基
‑2‑
甲基辛
‑7‑
烯酸；X
24
是谷氨酰胺、(S)
‑2‑
氨基
‑2‑
甲基壬
‑8‑
烯酸、(S)
‑2‑
氨基
‑2‑
甲基庚
‑6‑
烯酸或(S)
‑2‑
氨基庚
‑6‑
烯酸；X
27
是亮氨酸、(S)
‑2‑
氨基
‑2‑
甲基壬
‑8‑
烯酸或甲硫氨酸；X
28
是天冬氨酸、(S)
‑2‑
氨基
‑2‑
甲基壬
‑8‑
烯酸、(S)
‑2‑
氨基
‑2‑
甲基庚
‑6‑
烯酸或(S)
‑2‑
氨基庚
‑6‑
烯酸；X
30
不存在或是通过γ
‑
谷氨酸间隔物缀合的赖氨酸；前提条件是所述肽包含环化形成含双键环的至少两个氨基酸，其选自(R)
‑2‑
氨基
‑2‑
甲基辛
‑7‑
烯酸、(S)
‑2‑
氨基
‑2‑
甲基壬
‑8‑
烯酸、(S)
‑2‑
氨基
‑2‑
甲基庚
‑6‑
烯酸和(S)
‑2‑
氨基庚
‑6‑
烯酸；并且其中所述肽任选地包括保护基团，如果存在，其连接至所述肽的C
‑
端羧基；或其药学上可接受的盐。4.根据权利要求3所述的肽，其中环化形成含双键环的所述两个氨基酸选自：1)一个(R)
‑2‑
氨基
‑2‑
甲基辛
‑7‑
烯酸和一个(S)
‑2‑
氨基
‑2‑
甲基壬
‑8‑
烯酸；2)两个(S)
‑2‑
氨基
‑2‑
甲基庚
‑6‑
烯酸；和3)两个(S)
‑2‑
氨基庚
‑6‑
烯酸；或其药学上可接受的盐。5.根据权利要求3所述的肽，其中所述脂肪二酸包含C14、C15、C16、C17、C18、C19或C20脂肪二酸，和在位置10处的所述脂肪酸包含C14、C16、C17、C18、C19或C20脂肪酸；或其药学上可接受的盐。6.根据权利要求3所述的肽，其中X
10
是赖氨酸或与脂肪酸缀合的赖氨酸；或其药学上可接受的盐。7.根据权利要求3所述的肽，其中X
10
是赖氨酸或通过γ
‑
谷氨酸
‑
γ
‑
谷氨酸接头与脂肪酸缀合的赖氨酸；或其药学上可接受的盐。8.根据权利要求3所述的肽，其中X
10
是赖氨酸或通过γ
‑
谷氨酸
‑
γ
‑
谷氨酸接头与C16脂肪酸缀合的赖氨酸；或其药学上可接受的盐。9.根据权利要求1所述的肽，其包含下式HX2QGTFTSDX
10
SX
12
YLDX
16
X
17
AX
19
X
20
X
21
FVX
24
WLX
27
X
28
TX
30
‑
NH2(SEQ ID NO:20)其中X2是α
‑
氨基异丁酸或D
‑
丝氨酸；X
10
是赖氨酸或与脂肪酸缀合的赖氨酸；X
12
是(R)
‑2‑
氨基
‑2‑
甲基辛
‑7‑
烯酸或赖氨酸；X
16
是α
‑
氨基异丁酸或谷氨酸；X
17
是(R)
‑2‑
氨基
‑2‑
甲基辛
‑7‑
烯酸或精氨酸；X
19
是(S)
‑2‑
氨基
‑2...

【专利技术属性】
技术研发人员：E，
申请(专利权)人：默沙东有限公司，
类型：发明
国别省市：