一种白桦酸聚合物整体柱的制备方法及应用技术

本发明专利技术属于色谱分析领域，公开了一种白桦酸聚合物整体柱的制备方法及应用。白桦酸聚合物整体柱的制备方法包括步骤：以3,23

【技术实现步骤摘要】
一种白桦酸聚合物整体柱的制备方法及应用


[0001]本专利技术属于色谱分析
，特别涉及一种白桦酸聚合物整体柱的制备方法及应用。

技术介绍

[0002]由于具有化学结构多样性和良好的类药性质，天然产物一直是新药发现的重要来源。蛋白靶点的发现与研究是天然药物研发过程中的重要一环，同时新靶点的发现可为药物筛选提供突破口，为候选化合物的发现和设计提供重要的理论依据。白桦酸(Betulinic acid,BA，又名白桦酸脂)，BA是一种从天然产物中分离得到的五环三萜类化合物，在多种植物如白桦树(Betula pubescens)、滇刺枣(Ziziphus mauritiana)、夏枯草(Prunella vulgaris)、夹竹桃(Apocynaceae)、毛茛科植物白头翁(Pulsatilla chinensis)等之中均有分布，尤其是桦木科植物中含量最丰富。其良好的治疗HIV、肿瘤、糖尿病效果正受到越来越多的关注。譬如，与目前临床应用的抗HIV
‑
1药物相比，白桦酸类化合物作用机理独特、毒性极低、不良反应较小，是一类极具前途的抗HIV
‑
1的候选化合物；此外，很多白桦酸类衍生物还可以通过抑制细胞生存和生长所需的特定酶(如鸟氨酸脱羧酶等)，从而抑制多种肿瘤和癌细胞的生物活性，如直肠癌、肺癌、白血病、淋巴癌、前列腺癌、卵巢癌等，因此，也是具有新型作用机制的抗肿瘤新药。
[0003]亲和色谱技术在天然产物研究中发挥着重要作用，包括纯化分离、活性成分筛选、质量控制、作用机制与作用靶点研究等等。在常见的亲和色谱基质材料中，硅胶具有良好的色谱性能，但耐酸碱性差；树脂和琼脂糖适用的pH范围较宽，但机械强度差。整体柱(Monolithic Column)是由单体、交联剂、引发剂、致孔剂的混合物在色谱柱内通过原位聚合而成的连续床固定相，适合快速分析和流速梯度模式，与传统的填充柱相比，具有制备方法简单、易于改性、柱效高、渗透性好、反压低、传质速度快等优点，同时它还具有可控制孔径的优点，在生物大分子的分离分析上具有很大的优势。对于键合BA类化合物的有机聚合物整体柱，目前尚未见相关文献报道。

技术实现思路

[0004]本专利技术旨在至少解决上述现有技术中存在的技术问题之一。为此，本专利技术提出一种白桦酸聚合物整体柱的制备方法及应用，通过采用一锅法，在石英毛细管内原位聚合得到白桦酸聚合物整体柱，该整体柱具有机械强度好、骨架结构稳定、通透性良好和重现性好等优点，对生物分子的富集具有特异性选择。
[0005]本专利技术的第一方面提供一种白桦酸聚合物整体柱的制备方法，包括以下步骤：
[0006]以3,23
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O
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二乙酰基
‑
28
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白桦酸胺乙基酰胺和甲基丙烯酸缩水甘油酯为单体，在生孔剂、交联剂和引发剂的条件下，通过热作用，在石英毛细管内发生原位聚合反应，得到所述白桦酸聚合物整体柱。
[0007]优选地，所述白桦酸聚合物整体柱的制备方法，包括以下步骤：
[0008]准确称量3,23
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O
‑
二乙酰基
‑
28
‑
白桦酸胺乙基酰胺(EDA
‑
BA)9.7mg、甲基丙烯酸缩水甘油酯(GMA)13.7mg、正丙醇55mg和1,4
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丁二醇45mg，装入1mL玻璃瓶中，超声混合均匀后，经60℃水浴反应1h，再加入乙二醇二甲基丙烯酸酯(EDMA)与2mg偶氮二异丁腈(AIBN)，将混合液超声脱气后灌入合适长度的预处理好的石英毛细管内，然后两端用硅胶塞封口，经60℃水浴反应12h，有效长度为18cm；聚合完成以后用甲醇和水依次冲洗掉未反应物、残留溶剂或其他可能低聚物，得到所述白桦酸聚合物整体柱，即poly(GMA
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EDA
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BA
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co
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EDMA)整体柱。
[0009]poly(GMA
‑
EDA
‑
BA
‑
co
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EDMA)的制备，反应式如下所示：
[0010][0011]优选地，所述3,23
‑
O
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二乙酰基
‑
28
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白桦酸胺乙基酰胺的制备方法，包括以下步骤：
[0012]将23
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羟基白桦酸溶于吡啶中，加入乙酸酐，搅拌反应，再加入乙酸乙酯，然后调pH至4
‑
5，收集有机层，经洗脱后得到3,23
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二乙酰基
‑
17
‑
乙酸白桦酸；
[0013]将所述3,23
‑
二乙酰基
‑
17
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乙酸白桦酸与乙二胺、二氯甲烷进行混合反应，经洗脱后得到所述3,23
‑
O
‑
二乙酰基
‑
28
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白桦酸胺乙基酰胺。
[0014]优选地，所述洗脱是采用有机试剂进行硅胶柱层析。所述有机试剂包括但不限于石油醚和乙酸乙酯的混合液，二氯甲烷和石油醚的混合液。
[0015]优选地，所述3,23
‑
二乙酰基
‑
17
‑
乙酸白桦酸的制备方法，包括以下步骤：
[0016]将23
‑
羟基白桦酸(0.30g,0.63mmol)溶于12mL干燥吡啶中，加入乙酸酐(1mL)，室温搅拌8小时，反应；向反应液中加入25mL乙酸乙酯，用10％稀盐酸调pH至4～5，分离有机层，用50mL饱和食盐水洗涤3次，再用无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，然后以石油醚:乙酸乙酯＝10:1(V/V)作为洗脱剂进行硅胶(200
‑
300目)柱层析，得到白色泡沫状固体(0.32g，收率为91.4％)，即为3,23
‑
二乙酰基
‑
17
‑
乙酸白桦酸(Derived
‑
BA)。MS(EI):m/z 579.5[M+Na]+
；HR
‑
ESI
‑
MS:m/z 579.3652[M+Na]+
(calcd:579.3656)；1H
‑
NMR(CDCl3,400MHz)δ:0.80,0.88,0.93,0.97(each 3H,s,Me
‑
24,
‑
25,
‑
26,
‑
27),1.69(3H,s,Me
‑
30),1.79(1H,m,H
‑
18),1.95(1H,m,H
‑
19),2.01(3H,s,3
‑
OAc),2.06(3H,s,23
‑
OAc),3.0本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种白桦酸聚合物整体柱的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：以3,23
‑
O
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二乙酰基
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28
‑
白桦酸胺乙基酰胺和甲基丙烯酸缩水甘油酯为单体，在生孔剂、交联剂和引发剂的条件下，通过热作用，在石英毛细管内发生原位聚合反应，得到所述白桦酸聚合物整体柱。2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述3,23
‑
O
‑
二乙酰基
‑
28
‑
白桦酸胺乙基酰胺的制备方法，包括以下步骤：将23
‑
羟基白桦酸溶于吡啶中，加入乙酸酐，搅拌反应，再加入乙酸乙酯，然后调pH至4
‑
5，收集有机层，经洗脱后得到3,23
‑
二乙酰基
‑
17
‑
乙酸白桦酸；将所述3,23
‑
二乙酰基
‑
17
‑
乙酸白桦酸与乙二胺、二氯甲烷进行混合反应，经洗脱后得到所述3,23
‑
O
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二乙酰基
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28
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白桦酸胺乙基酰胺。3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述洗脱是采用有机试剂进行硅胶柱层析。4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述生孔剂为正丙醇和1,4
‑
丁二醇，所述交联剂为乙二醇二甲基丙烯酸酯，所述引发剂为偶氮二异丁腈。5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述正丙醇和所述1,4
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丁二醇的质量比为50
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55:(45
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50)。6.根据权利...

【专利技术属性】
技术研发人员：郭嘉亮，曾煦欣，汪锦才，刘正，杨鸿雁，段俊，单紫轩，赖亮，
申请(专利权)人：佛山科学技术学院，
类型：发明
国别省市：