一种大规模合成、干燥金属复合纳米粒子的方法及其CRP抗体偶联物制备与应用技术

本发明专利技术提供了一种大规模合成、干燥金属复合纳米粒子的方法，并进一步制备其CRP抗体偶联物，及将该偶联物应用于CRP检测试纸条的制备及检测方法。采用自氧化还原组装法，可一锅合成体积大于1L的GPIO NPs。通过静电吸附作用在GPIO NPs表面包裹一层PAA，可对纳米粒子进行冷冻干燥及再分散，解决粒子难以干燥储存的难题。该方法能够简单、快速合成大批量金属复合纳米粒子，并解决纳米粒子难以干燥储存的难题，以便于纳米粒子的储存和运输，为实际生产应用提供新技术。此外，利用dAb

【技术实现步骤摘要】
一种大规模合成、干燥金属复合纳米粒子的方法及其CRP抗体偶联物制备与应用


[0001]本专利技术属于材料
，具体涉及一种大规模合成、干燥金属复合纳米粒子的方法及其CRP抗体偶联物制备与应用。

技术介绍

[0002]贵金属(如，金、钯、铂)和氧化铁纳米粒子因具有独特的光学和光热性质及较高的催化活性，常被应用于化学、医学、环境、食品等领域中。研究表明，多种金属复合的纳米粒子具有比单金属纳米粒子更优异的光学性质和更高的催化活性。然而，由于复合纳米粒子合成过程的复杂性，使其难以满足大规模生产的需求；此外，通常纳米粒子经干燥后难以重新分散，因此纳米粒子合成后即分散于溶液中进行储存，这在一定程度上增加了其运输难度和成本。因此，寻求一种大规模合成、干燥金属复合纳米粒子的方法，将便于纳米粒子的储存和运输，并有利于纳米粒子的实际生产应用。
[0003]免疫层析法是一种基于抗原
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抗体特异性结合的纸基免疫层析技术，具有操作简单、检测快、成本低、便于携带的优势，适用于现场即时检测。胶体金是最常用标记探针，具有合成快速、使用简单的优势，但受限于本身性质，导致其检测灵敏度相对较低。研究表明，贵金属复合纳米粒子探针具有比标准胶体金更高的检测灵敏度。

技术实现思路

[0004]有鉴于此，本专利技术要解决的技术问题在于提供一种大规模合成、干燥金属复合纳米粒子的方法及其CRP抗体偶联物制备与应用，本专利技术提供的方法能够简单、快速合成大批量金属复合纳米粒子，并解决纳米粒子难以干燥储存的难题，以便于纳米粒子的储存和运输，为实际生产应用提供新技术。此外，利用dAb
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GPIO NPs作为检测探针构建CRP免疫层析试纸条，为CRP水平监测提供一种简单、快速、低成本、高效的检测方法，检测范围可达到超敏CRP检测的需求。
[0005]本专利技术提供了一种大规模合成、干燥金属复合纳米粒子的方法，包括以下步骤：
[0006]A)将Na2PdCl4溶液、HAuCl4溶液和去离子水混合后加入氨水溶液混合搅拌，得到反应液；
[0007]B)向所述反应液中加入FeCl2溶液混合搅拌，通过自氧化还原组装法合成金、钯、氧化铁复合纳米粒子(GPIO NPs)溶液；
[0008]C)将所述金、钯、氧化铁复合纳米粒子(GPIO NPs)溶液与PAA溶液混合，进行反应，得到反应产物；
[0009]将得到的反应产物离心后干燥，得到干燥的GPIO
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PAA NPs。
[0010]优选的，步骤A)中，所述HAuCl4溶液的浓度为0.01～0.1mol/L；
[0011]所述Na2PdCl4溶液的浓度为0.01～0.1mol/L；
[0012]所述氨水溶液的质量浓度为0.01％～0.5％；
[0013]所述加入氨水溶液混合搅拌的时间为1～10min。
[0014]优选的，步骤B)中，所述FeCl2溶液的浓度为0.05～1mol/L；
[0015]所述加入FeCl2溶液混合搅拌的时间为10～60min。
[0016]优选的，步骤C)中，以Fe计，所述金、钯、氧化铁复合纳米粒子(GPIO NPs)溶液的浓度为1～100ppm；
[0017]所述PAA溶液的质量浓度为1％～20％；
[0018]所述反应的时间为1～5h；
[0019]所述干燥的方法为冷冻干燥。
[0020]本专利技术还提供了一种上述方法制备得到的干燥的GPIO
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PAA NPs。
[0021]本专利技术还提供了一种dAb
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GPIO NPs偶联物，由dAb与上述GPIO
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PAA NPs制备得到。
[0022]本专利技术还提供了一种上述dAb
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GPIO NPs偶联物的制备方法，包括以下步骤：
[0023]将干燥的GPIO
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PAA NPs分散于2
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(N
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吗啉)乙磺酸缓冲溶液中，加入1
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乙基
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(3
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二甲氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐和羟基硫代琥珀酰亚胺钠盐，搅拌反应，得到反应液；
[0024]向所述反应液中加入CRP单克隆抗体dAb进行反应后，再加入BSA封闭，得到dAb
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GPIO NPs偶联物。
[0025]本专利技术还提供了一种上述dAb
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GPIO NPs偶联物在CRP检测中的应用。
[0026]本专利技术还提供了一种用于CRP抗原检测的免疫层析试纸条，包括底板、样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜和吸水垫，所述硝酸纤维素膜上设置有检测线和质控线，其中所述检测线包被有用于捕获CRP的CRP单克隆抗体(cAb)，所述质控线包被有羊抗鼠IgG，所述结合垫包括上述dAb
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GPIO NPs偶联物。
[0027]本专利技术还提供了一种采用上述用于CRP抗原检测的免疫层析试纸条检测CRP抗原的方法，包括以下步骤：
[0028]将待测样品滴加于试纸条表面后，如果待测样品中含有CRP抗原，在检测线处产生有颜色变化的线条，线条颜色深度与抗原浓度呈正相关，并可通过扫描灰度获取比色信号进行定量分析。
[0029]与现有技术相比，本专利技术提供了一种大规模合成、干燥金属复合纳米粒子的方法，包括以下步骤：A)将Na2PdCl4溶液、HAuCl4溶液和去离子水混合后加入氨水溶液混合搅拌，得到反应液；B)向所述反应液中加入FeCl2溶液混合搅拌，通过自氧化还原组装法合成金、钯、氧化铁复合纳米粒子(GPIO NPs)溶液；C)将所述金、钯、氧化铁复合纳米粒子(GPIO NPs)溶液与PAA溶液混合，进行反应，得到反应产物；将得到的反应产物离心后干燥，得到干燥的GPIO
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PAA NPs。本专利技术提供一种大规模合成、干燥金属复合纳米粒子的方法，并进一步制备其CRP抗体偶联物，及将该偶联物应用于CRP检测试纸条的制备及检测方法。采用自氧化还原组装法，可一锅合成体积大于1L的GPIO NPs。通过静电吸附作用在GPIO NPs表面包裹一层PAA，可对纳米粒子进行冷冻干燥及再分散，解决粒子难以干燥储存的难题。该方法能够简单、快速合成大批量金属复合纳米粒子，并解决纳米粒子难以干燥储存的难题，以便于纳米粒子的储存和运输，为实际生产应用提供新技术。此外，利用dAb
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GPIO NPs作为检测探针构建CRP免疫层析试纸条，为CRP水平监测提供一种简单、快速、低成本、高效的检测方法，检测范围可达到超敏CRP检测的需求。
[0030]结果表明，PBS中标准曲线范围为0.62～50μg/mL；血浆中标准曲线范围为0.46～
20.4μg/mL，全血中标准曲线范围为0.62～20μg/mL。
附图说明
[0031]图1是本专利技术合成GPIO NPs及GPIO
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种大规模合成、干燥金属复合纳米粒子的方法，其特征在于，包括以下步骤：A)将Na2PdCl4溶液、HAuCl4溶液和去离子水混合后加入氨水溶液混合搅拌，得到反应液；B)向所述反应液中加入FeCl2溶液混合搅拌，通过自氧化还原组装法合成金、钯、氧化铁复合纳米粒子(GPIO NPs)溶液；C)将所述金、钯、氧化铁复合纳米粒子(GPIO NPs)溶液与PAA溶液混合，进行反应，得到反应产物；将得到的反应产物离心后干燥，得到干燥的GPIO
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PAA NPs。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤A)中，所述HAuCl4溶液的浓度为0.01～0.1mol/L；所述Na2PdCl4溶液的浓度为0.01～0.1mol/L；所述氨水溶液的质量浓度为0.01％～0.5％；所述加入氨水溶液混合搅拌的时间为1～10min。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤B)中，所述FeCl2溶液的浓度为0.05～1mol/L；所述加入FeCl2溶液混合搅拌的时间为10～60min。4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤C)中，以Fe计，所述金、钯、氧化铁复合纳米粒子(GPIO NPs)溶液的浓度为1～100ppm；所述PAA溶液的质量浓度为1％～20％；所述反应的时间为1～5h；所述干燥的方法为冷冻干燥。5.一种如权利要求1～4任意一项所述的方法制备得到的干燥的GPIO
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PAA NPs。6.一种dAb
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GPIO NPs偶联物，其特征在于，由dAb与权利要求5所述的GPIO

【专利技术属性】
技术研发人员：王振新，朱群艳，姚超群，张婳，
申请(专利权)人：中国科学院长春应用化学研究所，
类型：发明
国别省市：