人乳杆菌LHM11及菌剂和应用制造技术

本发明专利技术是涉及微生物领域，具体涉及人乳杆菌LHM11及菌剂和应用。本发明专利技术的人乳杆菌(Lactobacillus hominis)M11能改善动物机体代谢，增加有益的代谢产物，从而增加睾丸有益代谢产物如视磺酸（调控精子发生的起始），从而提高雄性动物的精子质量和繁殖力；能在动物体内定植，并对人工胆盐、人工胃酸、人工肠液耐受能力强。能力强。能力强。

【技术实现步骤摘要】
人乳杆菌LHM11及菌剂和应用


[0001]本专利技术是涉及微生物领域，具体涉及人乳杆菌LHM11及菌剂和应用。

技术介绍

[0002]目前，雄性动物的雄性不孕不育率大幅度提高，主要是因为雄性生殖系统更容易受环境因素的影响。然而现在还没有良好的方法改善精液品质从而治疗雄性不孕不育。近年来研究发现肠道菌群与人及其他动物的健康息息相关，然而肠道菌群与雄性生殖轴的关系还没有确认，虽然已经有研究发现肠道菌群混合物可以改变雄性动物的精液品质，有益的肠道有益菌群可以改善动物的精液品质，但是还没有报道具体是哪种有益菌可以起到改善动物精液品质，提高雄性动物繁殖力，也没有任何文献公开哪种具体的肠道菌可以提高雄性繁殖力。

技术实现思路

[0003]本专利技术的目的是提供一种人乳杆菌(Lactobacillus hominis) M11。
[0004]本专利技术的另一目的是提供包含上述人乳杆菌(Lactobacillus hominis) M11的菌剂。
[0005]本专利技术的另一目的是提供上述人乳杆菌(Lactobacillus hominis) M11的应用。
[0006]本专利技术的人乳杆菌M11，该菌株于2022年 7月18日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC，保藏地址:北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮编100101)，分类命名为人乳杆菌Lactobacillus hominis，保藏编号为CGMCC No.25327。
[0007]本专利技术提供含有人乳杆菌(Lactobacillus hominis) M11的菌剂，所述菌剂可以是液体菌剂或固体菌剂，采用常规技术手段、加入微生物制剂领域允许的辅料制备得到。
[0008]本专利技术提供了人乳杆菌(Lactobacillus hominis) M11用于制备以下用途的制剂的用途，（1）改善肠道健康；（2）改善血液及睾丸代谢组；（3）增加雄性动物精子浓度；（4）增加雄性动物精子活力；（5）提高雄性动物交配成功率及交配的雌性动物怀孕率；和/或（6）提高雄性动物交配的雌性动物产活仔数。
[0009]本专利技术的目的是提供一种人乳杆菌(Lactobacillus hominis) M11，该菌能改善动物机体代谢，增加有益的代谢产物，从而增加睾丸有益代谢产物如视磺酸（调控精子发生的起始），从而提高雄性动物的精子质量和繁殖力；而且人乳杆菌(Lactobacillus hominis) M11能在动物体内定植，并对人工胆盐、人工胃酸、人工肠液耐受能力强。
附图说明
[0010]图1为本专利技术的人乳杆菌(Lactobacillus hominis) M11的生长曲线(MRS培养基)；图2显示本专利技术实施例2中试验小鼠在试验周期35天体重变化情况；图3显示本专利技术实施例2中试验小鼠的精子浓度；图4显示本专利技术实施例2中试验小鼠的精子活力；图5显示本专利技术实施例2中试验小鼠的精子顶体完整性；图6显示本专利技术实施例2中试验小鼠的精子的畸形率；图7显示本专利技术实施例2中试验小鼠的怀孕率；图8显示本专利技术实施例2中试验小鼠的产活仔数；图9显示本专利技术实施例3中试验公猪的采精量；图10显示本专利技术实施例3中试验公猪精子的浓度；图11显示本专利技术实施例3中试验公猪精子的活力；图12显示本专利技术实施例3中试验公猪精子的顶体完整性；图13显示本专利技术实施例3中试验公猪精子的畸形率；图14显示本专利技术实施例4中试验公牛精子的浓度；图15显示本专利技术实施例4中试验公牛精子的活力；图16显示本专利技术实施例4中试验公牛精子的顶体完整性；图17显示本专利技术实施例4中试验公牛精子的畸形率。
[0011]本专利技术的人乳杆菌M11，分类命名为人乳杆菌Lactobacillus hominis，该菌株于2022年 7月18日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC，保藏地址:北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮编100101)，保藏编号为CGMCC No.25327。
具体实施方式
[0012]本专利技术验证了人乳杆菌(Lactobacillus hominis) M11（以下实施例缩写为LHM11）对雄性动物繁殖力的有益作用，以白消安（Busulfan）建立小鼠弱精、少精症模型，发现该菌株能够提高精子浓度、活力、顶体完整性，降低精子畸形率，提高雄鼠与正常雌鼠交配的成功率，交配后母鼠的怀孕率、产活仔数。夏季高温高湿会导致公猪、公羊精液品质下降，从而导致母猪、母羊怀孕率和产活仔数减少，LHM11可以提高夏季高温高湿状态下公猪和公羊的精子浓度和活力、顶体完整性，降低精子畸形率。
[0013]实施例1人乳杆菌(Lactobacillus hominis) M11的分离1、菌株分离：人乳杆菌Lactobacillus hominis分离自肠道内容物。取肠道内容物，用无菌生理盐水进行10倍梯度稀释，吸取合适稀释度的稀释液0.1mL在MRS琼脂上均匀涂布，37
°
C培养48h后， 将生长出的菌落通过平板划线接种到新的MRS固体培养基进行纯化培养48h。
[0014]2、菌株富集：将纯化培养后的菌株，在无菌操作台上用接种环逐一接种到无菌MRS肉汤培养基中，置于摇床中，37
°
C培养48h后进行16S rRNA鉴定，并将剩余部分与含有25%甘油的生理盐水混合，保存至
‑
80
°
C冰箱。
[0015]3、16S rRNA鉴定：将富集后的菌液，使用细菌通用引物进行菌落PCR扩增后,进行16S rDNA测序鉴定，在NCBI上将各个菌株的16S rDNA序列与数据库中所有已测定细菌的16S rDNA序列进行比对，其中发现有5株与人乳杆菌属的Lactobacillus hominis JCM 18988的16S rDNA 序列的同源相似性最高，相似度大于或等于99.8%，确定这5株菌种类别为人乳杆菌 (Lactobacillus hominis)。
[0016]实施例2人乳杆菌(Lactobacillus hominis) M11的特性检测1、人乳球菌LHM11的微生物学特性如下:（1）菌落形态：圆形单菌落，直径大约1~2mm，乳白色，不透明，菌落表面光滑有微微的凸起，边缘是规则的。
[0017]（2）染色后细菌形态呈现短杆状，无鞭毛，不能运动。
[0018]（3）生长特性：在MRS液体培养基中，置于37
°
C摇床培养，5小时后开始进入对数生长期，14h进入平台期，最大活菌数为3.09
×
108CFU/mL （图1）。
[0019]2、耐胆盐检测将已活化并且菌液浓度在1
×
108CFU/mL的菌液，分别取1ml接种到9ml含猪胆盐浓度为0.3g/100mL的无菌生理盐水中，1h后采用平板涂布法测定活菌数。
[0020]结果显示（表1），在0.3g/100mL的胆盐浓度下本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.人乳杆菌(Lactobacillus hominis) M11，其特征在于，所述人乳杆菌(Lactobacillus hominis) M11的保藏编号为CGMCC No.25327。2.包含权利要求1所述的人乳杆菌(Lactobacillus hominis) M11的菌剂。3.根据权利要求2所述的菌剂，其特征在于，所述菌剂为液体菌剂或固体菌剂。4.权...

【专利技术属性】
技术研发人员：赵勇，钟儒清，陈亮，张宏福，姜岳，张鹏飞，周业勋，郝亚男，卢东欣，房涵涵，
申请(专利权)人：中国农业科学院北京畜牧兽医研究所，
类型：发明
国别省市：