一种环金属钌配合物荧光探针及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种环金属钌配合物荧光探针及其制备方法和应用，所述环金属钌配合物的化学名称为苯硼酸邻菲罗啉

【技术实现步骤摘要】
一种环金属钌配合物荧光探针及其制备方法和应用


[0001]本专利技术属于食品安全检测
，具体涉及一种环金属钌配合物荧光探针及其制备方法和应用。

技术介绍

[0002]食品中含有的油脂在食品储存和运输中会逐步变质氧化，使食品的色泽发生变化，并产生难闻的气味和味道，影响食品的出售。这是由于食品中油脂在接触到空气中氧气产生的“酸败”现象导致。因此解决油脂酸败是食品储存中亟需解决的问题。为了解决油脂类食品的酸败氧化问题，目前食品加工企业在生产过程中加入一些抗氧化剂，来降低油脂及富脂类食品的氧化，延长食品的保质期。
[0003]目前国家允许添加到食品中抗氧化剂的种类较多，主要包含天然和合成两类抗氧化剂，在使用过程中天然抗氧化剂获取困难，并且稳定性差，因此导致大量食品加工企业都使用合成抗氧化剂如没食子酸丙酯（PG）、叔丁基对苯二酚（TBHQ）、叔丁基羟基茴香醚（BHA）和2,6
‑
二叔丁基对甲酚（BHT）这四种酚类抗氧化剂。这些抗氧化剂能够阻止油脂氧化，被广泛用于油脂食品加工企业。但近些年，动物实验证明BHT和BHA被怀疑和肝脏损伤和潜在诱发肝癌的风险，某些国家和地区已经禁止使用TBHQ作为食品抗氧化剂。尤其目前小的食品作坊为延长食品保质期增加食品色泽会过量添加抗氧化剂，这些过量添加的食品抗氧化剂会影响人们的身体健康。因此食品中抗氧化剂含量的精准快速检测尤为重要。
[0004]现行的食品中抗氧化剂检测方法主要是基于GB 5009.32
‑
2016《食品中9种抗氧化剂的测定》，该标准主要是依靠液相色谱的方式进行，分为提取、净化、上机等步骤，操作复杂还需借助高昂的液相色谱仪，导致检测的经济成本高，检测周期长，效率不高。荧光法作为新型的检测技术也被用于生物、环境和食品中检测，由于荧光检测便捷方便，背景信号低，前处理简单，尤其所使用的仪器便宜，检测周期短，可大批量检测食品中的抗氧化剂。因此开发一种能够特异性检测食品中抗氧化剂含量，并区分抗氧化剂类型的荧光探针尤为重要，能够大量节省检测成本。

技术实现思路

[0005]针对现有技术的不足，本专利技术提供一种环金属钌配合物荧光探针及其制备方法和应用，用于对食品中抗氧化剂进行定量检测和区分。
[0006]本专利技术是通过以下技术方案实现的：一种环金属钌配合物荧光探针，所述环金属钌配合物的化学名称为苯硼酸邻菲罗啉
‑
联吡啶钌配合物，简称为[Ru(ppy)2(Phen
‑
B(OH)2)](PF6)2，具有如式Ⅰ所示的结构式：
式Ⅰ。
[0007]一种环金属钌配合物荧光探针的制备方法，包括以下步骤：步骤1）苯硼酸邻菲罗啉主配体的制备：首先称取对醛基苯硼酸，用冰醋酸进行溶解，然后再称取1,10
‑
邻菲罗啉
‑
5,6
‑
二酮，两者的摩尔比为1:1.1~1.5，再加入摩尔比为1:20~30的醋酸铵；在回流条件下回流反应6~8h；反应结束后用氨水进行中和，然后进行过滤，并用水和无水乙醇进行洗涤，烘干即得所述苯硼酸邻菲罗啉主配体，具有如式Ⅱ所示的结构式：式Ⅱ；步骤2）苯硼酸邻菲罗啉
‑
联吡啶钌配合物的制备：首先称取步骤1）制得的苯硼酸邻菲罗啉主配体溶解在乙醇溶液中，然后再称取联吡啶钌前体，两者反应的摩尔比为1.3:1；再加入超纯水，超纯水和乙醇的体积比为1:3，反应温度为70~80℃，反应时间为12~24h；反应结束后冷却到室温，用旋转蒸发仪把溶剂蒸干，直接采用湿法上样，采用体积比为50:2的二氯甲烷和甲醇为流动相，并用200~300目的中性氧化铝进行过柱提纯，即得所述苯硼酸邻菲罗啉
‑
联吡啶钌配合物。
[0008]一种环金属钌配合物荧光探针在检测食品中抗氧化剂中的应用。
[0009]优选地，所述抗氧化剂为PG和/或TBHQ。
[0010]优选地，检测食品中抗氧化剂包括以下步骤：步骤A）称取所述环金属钌配合物荧光探针，用二甲基亚砜溶解配置成10mM的母液，放置在4℃进行保存，接着称取PG抗氧化剂，用二甲基亚砜溶解后，配置成10mM的母液，然后对PG母液进行稀释，配置成溶液，加入2
µ
L的环金属钌配合物荧光探针的母液，用pH=7.0的Tris
‑
HCl缓冲溶液补齐到相同体积，使溶液体积最终为1mL，然后把上述溶液在37℃下孵育30min，孵育结束后直接用荧光比色皿测定上述溶液的荧光值，以荧光值和PG浓度为坐标轴进行作图，得到PG浓度和荧光强度之间的线性方程；步骤B）称取所述环金属钌配合物荧光探针，将其配成10mM的母液；随后称取TBHQ标准品并把其配成10mM的母液，对TBHQ的标准品进行梯度稀释，稀释完成后加入环金属钌配合物荧光探针的母液，并用pH=7.4的Tris
‑
HCl缓冲溶液进行稀释补充到500
µ
L的体积；把上述配置的溶液放入水浴锅中37℃下孵育30min，然后直接测量溶液中环金属钌配合物荧光探针的荧光强度，并进行作图得到荧光强度和TBHQ浓度之间的线性方程；步骤C）通过测定不同pH值下的荧光强度，即可得到相应的抗氧化剂的含量：步骤C
‑
1）在pH=7.0的条件下，用环金属钌配合物荧光探针去测定待测溶液中的PG
含量，通过测出的荧光值，代入到步骤A）得到的线性方程中，即可计算出PG的含量；步骤C
‑
2）在pH=7.4的条件下，用环金属钌配合物荧光探针去测定待测溶液中的TBHQ含量，根据测出的荧光值，代入到步骤B）得到的线性方程中，即可计算出TBHQ的含量。
[0011]一种环金属钌配合物荧光探针在测定PG和TBHQ两种抗氧化剂的回收率中的应用。
[0012]优选地，测定PG和TBHQ两种抗氧化剂的回收率包括以下步骤：步骤a）称取所述环金属钌配合物荧光探针，用二甲基亚砜溶解配置成10 mM的母液，放置在4℃进行保存，接着称取PG抗氧化剂，用二甲基亚砜溶解后，配置成10 mM的母液，然后对PG母液进行稀释，配置成溶液，加入2
ꢀµ
L的环金属钌配合物荧光探针的母液，用pH=7.0的缓冲溶液补齐到相同体积，使溶液体积最终为1 mL，然后把上述溶液在37℃下孵育30 min，孵育结束后直接用荧光比色皿测定上述溶液的荧光值，以荧光值和PG浓度为坐标轴进行作图，得到PG浓度和荧光强度之间的线性方程；步骤b）称取所述环金属钌配合物荧光探针，将其配成10 mM的母液；随后称取TBHQ标准品并把其配成10 mM的母液，对TBHQ的标准品进行梯度稀释，稀释完成后加入环金属钌配合物荧光探针的母液，并用pH=7.4的Tris
‑
HCl缓冲溶液进行稀释补充到500
ꢀµ
L的体积；把上述配置的溶液放入水浴锅中37℃下孵育30 min，然后直接测量溶液中环金属钌配合物荧光探针的荧光强度，并进行作图得到荧光强度和TBHQ浓度之间的线性方程；步骤c）分本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种环金属钌配合物荧光探针，其特征在于，所述环金属钌配合物的化学名称为苯硼酸邻菲罗啉
‑
联吡啶钌配合物，简称为[Ru(ppy)2(Phen
‑
B(OH)2)](PF6)2，具有如式Ⅰ所示的结构式：式Ⅰ。2.权利要求1所述的一种环金属钌配合物荧光探针的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1）苯硼酸邻菲罗啉主配体的制备：首先称取对醛基苯硼酸，用冰醋酸进行溶解，然后再称取1,10
‑
邻菲罗啉
‑
5,6
‑
二酮，两者的摩尔比为1:1.1~1.5，再加入摩尔比为1:20~30的醋酸铵；在回流条件下回流反应6~8 h；反应结束后用氨水进行中和，然后进行过滤，并用水和无水乙醇进行洗涤，烘干即得所述苯硼酸邻菲罗啉主配体，具有如式Ⅱ所示的结构式：式Ⅱ；步骤2）苯硼酸邻菲罗啉
‑
联吡啶钌配合物的制备：首先称取步骤1）制得的苯硼酸邻菲罗啉主配体溶解在乙醇溶液中，然后再称取联吡啶钌前体，两者反应的摩尔比为1.3:1；再加入超纯水，超纯水和乙醇的体积比为1:3，反应温度为70~80℃，反应时间为12~24 h；反应结束后冷却到室温，用旋转蒸发仪把溶剂蒸干，直接采用湿法上样，采用体积比为50:2的二氯甲烷和甲醇为流动相，并用200~300目的中性氧化铝进行过柱提纯，即得所述苯硼酸邻菲罗啉
‑
联吡啶钌配合物。3.权利要求1所述的一种环金属钌配合物荧光探针在检测食品中抗氧化剂中的应用。4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述抗氧化剂为PG和/或TBHQ。5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，包括以下步骤：步骤A）称取所述环金属钌配合物荧光探针，用二甲基亚砜溶解配置成10 mM的母液，放置在4℃进行保存，接着称取PG抗氧化剂，用二甲基亚砜溶解后，配置成10 mM的母液，然后对PG母液进行稀释，配置成溶液，加入2
ꢀµ
L的环金属钌配合物荧光探针的母液，用pH=7.0的Tris
‑
HCl缓冲溶液补齐到相同体积，使溶液体积最终为1 mL，然后把上述溶液在37℃下孵育30 min，孵育结束后直接用荧光比色皿测定上述溶液的荧光值，以荧光值和PG浓度为坐标轴进行作图，得到PG浓度和荧光强度之间的线性方程；步骤B）称取所述环金属钌配合物荧光探针，将其配成10 mM的母液；随后称取TBHQ标准
品并把其配成10 mM的母液，对TBHQ的标准品进行梯度稀释，稀释完成后加入环金属钌配合物荧光探针的母液，并用pH=7.4的Tris
‑
H...

【专利技术属性】
技术研发人员：孙素娟，顾慧丹，杨洋，胡飞杰，张露，邬新兵，杨刚刚，张赛，
申请(专利权)人：安徽工业大学，
类型：发明
国别省市：