高产γ-氨基丁酸的耐酸型植物乳杆菌及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种高产γ

【技术实现步骤摘要】
高产
γ
‑
氨基丁酸的耐酸型植物乳杆菌及其应用


[0001]本专利技术涉及微生物发酵工艺
，尤其是涉及一种高产γ
‑
氨基丁酸的耐酸型植物乳杆菌及其在制备腌渍黄瓜中的应用。

技术介绍

[0002]黄瓜因营养丰富，口感清脆，备受广大消费者的喜爱，并成为餐桌上常见的蔬菜之一。黄瓜可鲜食、可熟食，亦可经过浸泡或发酵制备成腌渍黄瓜食用。酸黄瓜在满足人民生活需求、补充淡季蔬菜不足中起着重要作用；品质优良的酸黄瓜也因入口脆爽、酸度适中，常作为饭前开胃小菜。
[0003]目前，市场售卖的酸黄瓜多数是用白醋浸泡而成，属于非发酵腌渍品，导致酸黄瓜酸味强烈，口感不够柔和，口味欠佳；且其中的微生物发酵不显著，氨基酸含量低。为了长期保存，还需要在其中添加抗氧化剂和防腐剂等，对身体造成危害。经过植物乳杆菌发酵制成的腌渍黄瓜，不仅口味纯正，并且经过发酵所产生的乳酸杆菌素可起到防腐的效果，同时保留黄瓜自身所含的大部分营养物质。
[0004]植物乳杆菌对人体具有免疫调节、抑制致病菌、降低胆固醇含量、促进营养物质吸收和抗癌等作用，其代谢产生的γ
‑
氨基丁酸在人体内是一种重要的中枢神经系统抑制性神经递质，在改善睡眠、缓解焦虑、加速新陈代谢等方面起到了良好的保健作用。
[0005]目前，已经筛选得到多株产γ
‑
氨基丁酸的生产菌，华东理工大学谢静莉等人（申请号：201510224855.7）筛选出一株产γ
‑
氨基丁酸的乳酸菌，产量为50mg/L。黑龙江省乳品工业技术开发中心姜毓君等人（申请号：201110439694.5）筛选到一株产γ
‑
氨基丁酸的植物乳杆菌NDC75017，产量为138 mg/L。广西科技大学贤乾隆分离出两株乳酸菌，即植物乳杆菌（QL
‑
14）和干酪乳杆菌（QL
‑
20），加入10g/L谷氨酸钠后可分别产γ
‑
氨基丁酸390 mg/L和584 mg/L，选用干酪乳杆菌（QL
‑
20）作为酸奶发酵剂（添加谷氨酸钠）后产γ
‑
氨基丁酸为224.2mg/L，且口感较好。齐齐哈尔医学院刘韩等人分离出一株嗜热链球菌QYWLYS
‑
1可产γ
‑
氨基丁酸2910 mg/L（添加谷氨酸钠），同时筛选出一株植物乳杆菌QYW
‑
L
‑
11，γ
‑
氨基丁酸产量为1380 mg/L（添加谷氨酸钠）。以上研究中所获得的γ
‑
氨基丁酸能力均不高，并多数在含谷氨酸钠条件下获取，且很少应用于生产中。所以，能够筛选出可以高产γ
‑
氨基丁酸的植物乳杆菌对于食品安全和人类健康方面意义重大。

技术实现思路

[0006]本专利技术的目的是提供一种高产γ
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氨基丁酸的耐酸型植物乳杆菌及其在制备腌渍黄瓜中的应用，腌渍黄瓜酸味适中，口感柔和，并且高产γ
‑
氨基丁酸。在制备腌渍黄瓜时操作简单，方便实现规模化生产。
[0007]为实现上述目的，本专利技术提供了一种高产γ
‑
氨基丁酸的耐酸型植物乳杆菌，乳杆菌的菌株号为NEAUs5
‑
1，分类命名为Lactiplantibacillus plantarum，保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏编号为CGMCC NO.24942。
[0008]一种NEAUs5
‑
1植物乳杆菌在制备腌渍黄瓜中的应用。
[0009]一种NEAUs5
‑
1植物乳杆菌的培养方法，步骤如下：S1、将植物乳杆菌NEAUs5
‑
1进行活化、制备种子液，培养基为pH=3.0的液体MRS培养基；S2、将种子液接入到扩大发酵培养基中进行扩大培养；扩大发酵培养基的组分为蛋白胨10 g/L、酵母粉5 g/L、牛肉膏5 g/L、胡萝卜汁100 ml/L，并以1 M的NaOH调整培养基pH为6.2
‑
6.4。
[0010]步骤S1中，先将植物乳杆菌NEAUs5
‑
1菌种菌液在MRS琼脂培养基上划线，37 ℃活化48 h，挑单菌落接种至不加琼脂的MRS液体中，37 ℃、150 rpm/min摇床培养48 h，即为植物乳杆菌液体种子。
[0011]一种NEAUs5
‑
1植物乳杆菌制备腌渍黄瓜的方法，步骤如下：S1、选料：挑选新鲜质嫩、无病虫害及机械损伤的新生乳黄瓜，进行前处理；S2、清洗：将选好的乳黄瓜清洗干净，沥干水分，置于发酵容器中；S3、发酵：在步骤S2的装有乳黄瓜的发酵容器中注入纯净水，然后按黄瓜质量分数的2%添加植物乳杆菌NEAUs5
‑
1菌液，同时按黄瓜质量分数的2%添加食用盐；最后加入芝麻、苏子籽、芥末籽、胡椒和香叶，密闭发酵获得酸黄瓜。
[0012]优选地，步骤S1中，前处理为去顶花、柄蒂，并将乳黄瓜用清水浸泡2.5 h。
[0013]优选地，步骤S3中，注入纯净水的量为液面没过乳黄瓜。
[0014]优选地，步骤S3中，发酵温度为20 ℃，发酵时间不少于30天，菌浓度为1
‑
1.8
×
10
7 cfu/mL。
[0015]优选地，步骤S3中，在加入食用盐同时，还加入按黄瓜质量分数1
‑
2%的L
‑
谷氨酸钠。
[0016]优选地，步骤S3中，在加入食用盐同时，还加入按黄瓜质量分数1%的红梅味素。
[0017]优选地，步骤S3中，密闭发酵后进行杀菌，杀菌温度为85 ℃，杀菌时间为10 min。
[0018]优选地，制备腌渍黄瓜中使用高效液相色谱分析法测定黄瓜、黄瓜汁中的γ
‑
氨基丁酸含量。
[0019]一株高产γ
‑
氨基丁酸的耐酸型植物乳杆菌(Lactiplantibacillusplantarum)NEAUs5
‑
1，保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏编号为：CGMCC NO.24942，保藏日期为：2022年05月23日，分类命名为植物乳杆菌(Lactiplantibacillus plantarum)。
[0020]植物乳杆菌（Lactiplantibacillus plantarum）NEAUs5
‑
1菌落较小，为乳白色，呈圆形；显微镜下细胞呈短杆状；且革兰氏染色呈阳性；该菌株接触酶、氧化酶、葡萄糖产气、精氨酸产氨、明胶液化、淀粉水解、硝酸还原、V.P.反应均为阴性，果糖、麦芽糖、甘露糖、蔗糖等发酵为阳性；该菌株16S rDNA序列与植物乳杆菌的同源性达到99.79%。以上形态学、生理生化及16S rDNA序列鉴定该菌株为植物乳杆菌。
[0021]因此，本专利技术采用上述一本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种高产γ
‑
氨基丁酸的耐酸型植物乳杆菌，乳杆菌的菌株号为NEAUs5
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1，分类命名为Lactiplantibacillus plantarum，保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏编号为CGMCC NO.24942。2.根据权利要求1所述的一种高产γ
‑
氨基丁酸的耐酸型植物乳杆菌的培养方法，其特征在于，步骤如下：S1、将植物乳杆菌NEAUs5
‑
1进行活化、制备种子液，培养基为pH=3.0的液体MRS培养基；S2、将种子液接入到扩大发酵培养基中进行扩大培养；扩大发酵培养基的组分为蛋白胨10 g/L、酵母粉5 g/L、牛肉膏5 g/L、胡萝卜汁100 ml/L，并以1 M的NaOH调整培养基pH为6.2
‑
6.4。3.根据权利要求1所述的一种高产γ
‑
氨基丁酸的耐酸型植物乳杆菌在制备腌渍黄瓜中的应用。4.根据权利要求3所述的一种高产γ
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氨基丁酸的耐酸型植物乳杆菌在制备腌渍黄瓜中的应用，其特征在于：腌渍黄瓜为富含γ
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氨基丁酸的黄瓜。5.根据权利要求1所述的一种高产γ
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氨基丁酸的耐酸型植物乳杆菌制备腌渍黄瓜的方法，其特征在于...

【专利技术属性】
技术研发人员：张安，顾冉，刘焱，王芮鑫，
申请(专利权)人：东北农业大学，
类型：发明
国别省市：