定量评价坛紫菜耐高温能力的方法技术

本发明专利技术提供了一种定量评价坛紫菜耐高温能力的方法，涉及海藻育种技术领域。本发明专利技术提供的定量评价坛紫菜耐高温能力的方法，包括对不同品系坛紫菜进行高温胁迫处理，然后进行恢复培养，分别获得高温胁迫处理前、高温胁迫处理后和恢复培养后的最大光化学效率Fv/Fm，然后获得相应品系坛紫菜正常生长温度条件和高温胁迫条件下的日增重速度差Δμ，建立Fv/Fm和Δμ之间的关系，实现对紫菜耐高温能力的评价，该方法简单方便，能够在48h内定量一个坛紫菜品系的耐高温能力，克服了以往实验条件不同导致的无法进行定量比对、评价时间长、方法复杂等问题，大大提高了坛紫菜耐高温品系的筛选效率。效率。效率。

【技术实现步骤摘要】
定量评价坛紫菜耐高温能力的方法


[0001]本专利技术涉及海藻育种
，尤其是涉及一种定量评价坛紫菜耐高温能力的方法。

技术介绍

[0002]坛紫菜是我国最重要的经济海藻之一，广泛栽培于浙江、福建和广东等地，近年来江苏也开始大量栽培坛紫菜。在坛紫菜栽培过程中常常面临严重的高温胁迫，特别是下海栽培初期的高温回暖天气往往导致大规模脱苗和烂苗，给坛紫菜产业带来巨大的经济损失。因此，评价坛紫菜的耐高温能力，进而选育耐高温品种对坛紫菜产业的可持续发展具有重要意义，相关研究一直是领域热点。
[0003]坛紫菜叶状体正常生长的温度上限为28℃。因此，每年9月下旬到10月上旬海区水温降到28℃后开始大规模采苗和下海养殖。这个时期常常受台风或高温回暖天气的影响，可导致海水温度升高1～2℃，并持续几天。而高温天气持续4天以上就会引起大规模病烂。传统的耐高温评价实验一般以2～5cm长的坛紫菜叶状体或叶状体中部为研究材料，用26～30℃的高温处理7～15天。然后分析高温对某品系坛紫菜叶状体的生长、形态和光合作用速率等生理指标的影响，进而对该品系的耐高温能力进行评价。这种评价方法的实验步骤繁琐、周期较长，难以用于大规模筛选工作。传统方法最大的问题在于，不同实验处理条件得出的结果无法进行比较，无法评判两个耐高温品系那个更好。此外，耐高温能力不仅体现在高温耐受能力上，还体现在快速恢复能力上。
[0004]有鉴于此，特提出本专利技术。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的在于提供一种定量评价坛紫菜耐高温能力的方法，以解决上述问题中的至少一种。
[0006]第一方面，本专利技术提供了一种定量评价坛紫菜耐高温能力的方法，包括以下步骤：
[0007]a.对不同品系坛紫菜进行高温胁迫处理，然后进行恢复培养，分别获得高温胁迫处理前的最大光化学效率Fv/Fm(0)、高温胁迫处理后的最大光化学效率Fv/Fm(HT)和恢复培养后的最大光化学效率Fv/Fm(R)；
[0008]b.获得与a步骤相应品系坛紫菜正常生长温度条件和高温胁迫条件下的日增重速度差Δμ；
[0009]c.将Fv/Fm(0)、Fv/Fm(HT)、Fv/Fm(R)和Δμ代入如下公式：
[0010]拟合得出常数a、b和c的值；
[0011]d.将c步骤得出的常数a、b和c的值代入如下公式：
[0012][0013]e.将待测坛紫菜按照a步骤获得Fv/Fm(0)、Fv/Fm(HT)和Fv/Fm(R)，并代入d步骤中的公式，根据HTD值评价坛紫菜的耐高温能力。
[0014]作为进一步技术方案，a步骤中，所述高温胁迫处理的温度为32
‑
35℃，优选为34℃；
[0015]优选地，所述高温胁迫处理的时间为2
‑
6h，优选为4h；
[0016]优选地，所述恢复培养的温度为20
‑
25℃，优选为21℃；
[0017]优选地，所述恢复培养的时间为24
‑
48h，优选为24h。
[0018]作为进一步技术方案，采用叶绿素荧光技术获得Fv/Fm(0)、Fv/Fm(HT)和Fv/Fm(R)。
[0019]作为进一步技术方案，a步骤中，所述坛紫菜的品系包括高温耐受品系和高温敏感品系；
[0020]优选地，所述坛紫菜的品系在3种以上。
[0021]作为进一步技术方案，a步骤和b步骤中以相同长度的坛紫菜为研究材料；
[0022]优选地，所述坛紫菜的长度为2
‑
10cm。
[0023]作为进一步技术方案，b步骤中，所述Δμ的获得方法包括如下步骤：
[0024]将坛紫菜分别在正常生长温度条件和高温胁迫条件下培养7
‑
15天，获得两个条件下的日增重速度差Δμ。
[0025]作为进一步技术方案，所述正常生长温度为20
‑
25℃，优选为21℃；
[0026]所述高温胁迫条件下培养的温度为26
‑
30℃，优选为30℃。
[0027]作为进一步技术方案，所述拟合的拟合优度R2>0.5。
[0028]作为进一步技术方案，HTD计算公式中常数为：常数a＝
‑
0.3616，常数b＝
‑
0.1278，常数c＝0.004112。
[0029]作为进一步技术方案，根据HTD值分布情况，设定若HTD<0.06，则待测坛紫菜为高温耐受品系；
[0030]若HTD>0.12，则待测坛紫菜为高温敏感品系。
[0031]与现有技术相比，本专利技术具有如下有益效果：
[0032]本专利技术提供的定量评价坛紫菜耐高温能力的方法简单方便，能够在48h内定量一个坛紫菜品系的耐高温能力，克服了以往实验条件不同导致的无法进行定量比对、评价时间长、方法复杂等问题，大大提高了坛紫菜耐高温品系的筛选效率。
附图说明
[0033]为了更清楚地说明本专利技术具体实施方式或现有技术中的技术方案，下面将对具体实施方式或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图是本专利技术的一些实施方式，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
[0034]图1为高温胁迫下四个品系的Fv/Fm(T)/Fv/Fm(21℃)比值变化；
[0035]图2为Z
‑
26
‑
BG品系经34℃和35℃处理并恢复过程中Fv/Fm的变化；
[0036]图3为4个坛紫菜品系在34℃下处理4h及35℃下处理2h后恢复培养24h和48h过程中的Fv/Fm的变化；
[0037]图4为14个坛紫菜品系在34℃处理4h后并恢复培养24h及48h的Fv/Fm的变化；
[0038]图5为39个坛紫菜品系的HTD值与7天30℃处理导致的日增重速度差Δμ之间的关系；
[0039]图6为5个坛紫菜品系在21℃和30℃下培养7d后的形态图；
[0040]图7为5个坛紫菜品系在21℃和30℃下培养7d的日增重速率。
具体实施方式
[0041]下面将结合实施方式和实施例对本专利技术的实施方案进行详细描述，但是本领域技术人员将会理解，下列实施方式和实施例仅用于说明本专利技术，而不应视为限制本专利技术的范围。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。
[0042]第一方面，本专利技术提供了一种定量评价坛紫菜耐高温能力的方法，包括以下步骤：
[0043]a.对不同品系坛紫菜进行高温胁迫处理，然后进行恢复培养，分别获得高温胁迫处理前的最大光化学效率Fv/Fm(0)、高本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种定量评价坛紫菜耐高温能力的方法，其特征在于，包括以下步骤：a.对不同品系坛紫菜进行高温胁迫处理，然后进行恢复培养，分别获得高温胁迫处理前的最大光化学效率Fv/Fm(0)、高温胁迫处理后的最大光化学效率Fv/Fm(HT)和恢复培养后的最大光化学效率Fv/Fm(R)；b.获得与a步骤相应品系坛紫菜正常生长温度条件和高温胁迫条件下的日增重速度差Δμ；c.将Fv/Fm(0)、Fv/Fm(HT)、Fv/Fm(R)和Δμ代入如下公式：拟合得出常数a、b和c的值；d.将c步骤得出的常数a、b和c的值代入如下公式：e.将待测坛紫菜按照a步骤获得Fv/Fm(0)、Fv/Fm(HT)和Fv/Fm(R)，并代入d步骤中的公式，根据HTD值评价坛紫菜的耐高温能力。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，a步骤中，所述高温胁迫处理的温度为32
‑
35℃，优选为34℃；优选地，所述高温胁迫处理的时间为2
‑
6h，优选为4h；优选地，所述恢复培养的温度为20
‑
25℃，优选为21℃；优选地，所述恢复培养的时间为24
‑
48h，优选为24h。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，采用叶绿素荧光技术获得Fv/Fm(0)、Fv/Fm(HT)和Fv/Fm(R)。4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，a...

【专利技术属性】
技术研发人员：许凯，徐琳杰，谢潮添，王文磊，徐燕，纪德华，陈昌生，
申请(专利权)人：集美大学，
类型：发明
国别省市：