清金益气颗粒中化学成分含量的测定方法技术

本申请涉及药物分析技术领域，提供了一种清金益气颗粒中化学成分含量的测定方法，其采用超高效液相色谱

【技术实现步骤摘要】
清金益气颗粒中化学成分含量的测定方法


[0001]本申请涉及药物分析
，特别是涉及一种清金益气颗粒中化学成分含量的测定方法。

技术介绍

[0002]清金益气颗粒是针对新冠肺炎恢复期患者余热未清、气阴两虚征象显著的特点而研制，其由人参片、麦冬、五味子、茯苓、清半夏、玄参、麸炒苍术、陈皮、甘草片、柴胡、升麻、薏苡仁、黄芩片、马鞭草、芦根和淡竹叶16味中药组成，具有益气养阴、健脾和中、清热祛湿之效，能够促进患者机体损伤恢复和免疫系统调节，从而促进患者更好的康复；也适用于预防、治疗或缓解感染性疾病后遗症、并发症，或促进由感染性疾病引起的受损的组织、器官或系统的功能恢复。
[0003]中药复方成分复杂，单一成分的检测难以表现中药复方整体药效，不能全面控制其质量。中药多成分药代动力学研究是连接中药化学成分研究和药效成分研究的关键桥梁。清金益气颗粒在临床上可有效促进新冠肺炎康复期患者的恢复，但其药效物质基础未明，无法量化分析，体内过程未知。因此，提供一种清金益气颗粒中化学成分含量的测定方法及体内药代动力学分析方法具有十分重要的意义。
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种清金益气颗粒中化学成分含量的测定方法，其特征在于，采用超高效液相色谱
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质谱联用，测定清金益气颗粒中化学成分的含量；所述化学成分包括：奎宁酸、L
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苹果酸、没食子酸、哈巴苷、原儿茶酸、新绿原酸、苍术苷A、儿茶素、绿原酸、对羟基苯甲醛、隐绿原酸、马鞭草苷、香兰素、芍药苷、对香豆酸、阿魏酸、牡荆素、芥子酸、甘草苷、芹糖甘草苷、异阿魏酸、金丝桃苷、升麻素、野黄芩苷、类叶升麻苷、柚皮苷、槲皮苷、橙皮苷、芹菜素
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葡萄糖醛酸苷、芹糖异甘草苷、芒柄花苷、异甘草苷、黄芩苷、人参皂苷Re、槲皮素、哈巴俄苷、汉黄芩苷、柚皮素、黄芩素、人参皂苷Rf、异甘草素、芒柄花黄素、人参皂苷Rg2、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rh1、人参皂苷Rb2、甘草酸、人参皂苷Rd、汉黄芩素和柴胡皂苷A；所述方法包括：(1)建立各化学成分的标准曲线：以甲醇为溶剂，配制6
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14个含有不同已知浓度的各化学成分和相同已知浓度的内标物的混合对照品溶液；其中，奎宁酸的浓度为18.6
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6000ng/mL，L
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苹果酸的浓度为27.0
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60000ng/mL，没食子酸的浓度为4.07
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600ng/mL，哈巴苷的浓度为2.68
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30000ng/mL，原儿茶酸的浓度为0.77
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600ng/mL，新绿原酸的浓度为3.23
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600ng/mL，苍术苷A的浓度为24.2
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12000ng/mL，儿茶素的浓度为1.39
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600ng/mL，绿原酸的浓度为2.1
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6000ng/mL，对羟基苯甲醛的浓度为3.35
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600ng/mL，隐绿原酸的浓度为1.58
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600ng/mL，马鞭草苷的浓度为11.2
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30000ng/mL，香兰素的浓度为4.94
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600ng/mL，芍药苷的浓度为0.22
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24ng/mL，对香豆酸的浓度为0.39
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6000ng/mL，阿魏酸的浓度为4.5
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6000ng/mL，牡荆素的浓度为3.05
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600ng/mL，芥子酸的浓度为0.65
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600ng/mL，甘草苷的浓度为1.67
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12000ng/mL，芹糖甘草苷的浓度为0.56
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30000ng/mL，异阿魏酸的浓度为33.6
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6000ng/mL，金丝桃苷的浓度为2.4
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120ng/mL，升麻素的浓度为0.29
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60ng/mL野黄芩苷的浓度为15.4
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6000ng/mL，类叶升麻苷的浓度为3.69
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12000ng/mL，柚皮苷的浓度为19.0
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60000ng/mL，槲皮苷的浓度为0.96
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120ng/mL，橙皮苷的浓度为6.35
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60000ng/mL，芹菜素
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葡萄糖醛酸苷的浓度为1.59
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6000ng/mL，芹糖异甘草苷的浓度为5.32
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6000ng/mL，芒柄花苷的浓度为4.13
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6000ng/mL，异甘草苷的浓度为4.22
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3000ng/mL，黄芩苷的浓度为10.8
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60000ng/mL，人参皂苷Re的浓度为2.71
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12000ng/mL，槲皮素的浓度为0.99
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120ng/mL，哈巴俄苷的浓度为2.92
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1200ng/mL，汉黄芩苷的浓度为85.6
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60000ng/mL，柚皮素的浓度为6.4
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600ng/mL，黄芩素的浓度为6.62
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12000ng/mL，人参皂苷Rf的浓度为43.9
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6000ng/mL，异甘草素的浓度为0.13
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60ng/mL，芒柄花黄素的浓度为0.25
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24ng/mL，人参皂苷Rg2的浓度为4.57
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600ng/mL，人参皂苷Rb1的浓度为44.4
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12000ng/mL，人参皂苷Rh1的浓度为26.3
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1200ng/mL，人参皂苷Rb2的浓度为20.0
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1200ng/mL，甘草酸的浓度为12.6
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60000ng/mL，人参皂苷Rd的浓度为1.33
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600ng/mL，汉黄芩素的浓度为0.15
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6000ng/mL和柴胡皂苷A的浓度为15.1
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12000ng/mL；所述内标物的浓度C2为800
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1200ng/mL；在相同的色谱条件和质谱条件下，将体积为V1的各含内标物的混合对照品溶液分别注入超高效液相色谱仪中，通过质谱检测，根据各化学成分和内标物的特征离子峰确定各化学成分和内标物的色谱峰，并获得各化学成分和内标物的色谱峰面积；以各化学成分与内标物的色谱峰面积比为纵坐标，以各化学成分与内标物的浓度比为横坐标，分别建立各化学成分的标准曲线；(2)确定待测样品中各化学成分的含量：
取质量为M的待测样品，以体积为V2的65
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75vol％甲醇水溶液为溶剂进行提取，过滤后取上清液，在所述上清液中加入内标物，采用65
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75vol％甲醇水溶液稀释N倍，得到含内标物的待测样品溶液，其中，M/V2为(0.01
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0.03)：1g/mL，N为3
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5，所述含内标物的待测样品溶液中内标物的浓度为C2；在与步骤(1)中相同的色谱条件和质谱条件下，取体积为V1的所述含内标物的待测样品溶液注入超高效液相色谱仪中，通过质谱检测，根据各化学成分和内标物的特征离子峰确定各化学成分和内标物的色谱峰，并获得各化学成分和内标物的色谱峰面积；根据已建立的各化学成分的标准曲线，由待测样品中各化学成分与内标物的色谱峰面积比，分别获得各化学成分与内标物的浓度比C1/C2，进而得到各化学成分的浓度C1；按照公式C＝C1×
N
×
V2/M分别计算出待测样品中各化学成分的含量C。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述内标物选自异茴芹内酯、黄芪皂苷II或淫羊藿苷；其中，苍术苷A、升麻素分别以异茴芹内酯为内标物，人参皂苷Re、人参皂苷Rf、人参皂苷Rg2、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rh1、人参皂苷Rb2、人参皂苷Rd、柴胡皂苷A分别以黄芪皂苷II为内标物，黄芩苷、汉黄芩苷、野黄芩苷、汉黄芩素、黄芩素、芹菜素
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葡萄糖醛酸苷、马鞭草苷、异阿魏酸、阿魏酸、橙皮苷、甘草酸、芹糖异甘草苷、芹糖甘草苷、甘草苷、异甘草苷、槲皮苷、槲皮素、绿原酸、隐绿原酸、没食子酸、儿茶素、哈巴俄苷、哈巴苷、金丝桃苷、芍药苷、L
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苹果酸、奎宁酸、芥子酸、芒柄花黄素、对香豆酸、原儿茶酸、牡荆素、香兰素、柚皮素、对羟基苯甲醛、芒柄花苷、类叶升麻苷、异甘草素、新绿原酸、柚皮苷分别以淫羊藿苷为内标物。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述提取为超声提取，提取功率为150
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200W，提取频率为30
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50kHz，提取时间为20
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40min。4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述色谱条件包括：色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱；流动相：A相为体积分数为0.08
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0.12％的甲酸水溶液，B相为乙腈；采用体积分数56
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95％A相，5
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44％B相，梯度洗脱；流速：0.25
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0.35mL/min；柱温：35
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45℃；进样体积V1：1
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3μL。5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述梯度洗脱具体为：0
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2min，5
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7％B相；2
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5min，7
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17％B相；5
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6min，17
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18％B相；6
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8min，18
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21％B相；8
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9min，21
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21％B相；9
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10min，21
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23％B相；10
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11min，23
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25％B相；11
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14min，25
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30％B相；14
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15min，30
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32％B相；15
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16min，32
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41％B相；16
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17min，41
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44％B相；17
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20min，44
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5％B相；20
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23min，5
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5％B相。6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述质谱为三重四级杆质谱，所述质谱条件包括：离子源为电喷雾离子源，检测模式为多反应离子监测，正、负离子全扫描模式；其中，负离子模式离子源参数包括：气帘气：32
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38psi；碰撞气：8
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12psi；离子喷雾电压：4200
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4800V；温度：540
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560℃；雾化气：28
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32psi；辅助气：14
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16psi；正离子模式离子源参数包括：气帘气：28
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32psi；碰撞气：8
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12psi；...

【专利技术属性】
技术研发人员：常艳旭，张伯礼，张俊华，王跃飞，李晋，张晗，杨晓花，陈淑静，
申请(专利权)人：天津中医药大学，
类型：发明
国别省市：