枯草芽孢杆菌JZXJ-7菌株在降解生物胺中的应用制造技术

本发明专利技术属于微生物技术领域，具体公开了枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)JZXJ

【技术实现步骤摘要】
枯草芽孢杆菌JZXJ
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7菌株在降解生物胺中的应用


[0001]本专利技术属于微生物
，具体公开了枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)JZXJ
‑
7菌株在降解生物胺中的应用。

技术介绍

[0002]生物胺是一类具有生物活性、含氨基的低分子质量化合物。大多数食品中都含有生物胺，尤其是发酵食品，这些生物胺主要由微生物氨基酸脱羧酶作用于氨基酸脱羧而生成。适量生物胺可促进人体的正常生理活动，而过量摄入会产生不良反应，可能会引发头痛、呼吸窘迫、心悸、头晕、恶心、等各种过敏性反应。出于对食品安全的考虑，人们应尽可能降低食品中生物胺的含量。
[0003]针对食品中生物胺，目前主要有物理或化学法控制手段。而化学添加酶制剂等主要提取自动物肝脏，成本高不适合工业应用，有些添加剂成本高且可能影响食品风味；物理射线照射对微生物有灭活作用，不能应用于生物胺大量产生的发酵期，冷冻和高温则会破坏食品风味和质构。生物法具有成本低，安全高效的特点，最大程度上减少对风味的影响。已有研究报道，微生物发酵食品中乳酸菌、泛酸枝芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌等具有降解生物胺的能力，但所报道的菌株对生物胺中的降解率都偏低，尤其当大多数酱类发酵食品需要盐水腌渍，在盐分胁迫下微生物的代谢酶活性容易受阻，生物增长缓慢，对生物胺的降解率下降。因此，筛选出兼具对生物胺有高效降解率且具有耐盐能力的菌株，对于生产健康安全的发酵食品具有重要意义。

技术实现思路

[0004]为了弥补现有技术存在的不足，本专利技术的第一个目的是提供了枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)JZXJ
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7菌株在降解生物胺中的应用，所述枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)JZXJ
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7菌株于2022年5月9日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为GDMCC No：62458，保藏地址：广州市先烈中路100号大院59号楼5楼。
[0005]本专利技术的第二个目的是提供了一种降解生物胺的方法，所述方法是将上述枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)JZXJ
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7菌株接种至含生物胺的液体、半固体或固体中。
[0006]作为本专利技术优选的一种技术方案，所述的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)JZXJ
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7菌株接种量为1.5％
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3％。
[0007]优选地，所述枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)JZXJ
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7菌株的培养条件为31
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37℃、100
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120rpm/min培养24
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48h。
[0008]优选地，所述液体、半固体或固体中含有4％
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8％氯化钠。
[0009]更优选地，所述降解的生物胺包括尸胺、腐胺、酪胺、组胺。
[0010]本专利技术的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)JZXJ
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7菌株源自乌虾酱，学名糠虾酱(opossum shrimp paste)，采自辽宁省锦州笔架山食品厂，加入乌虾体重16％食盐搅拌均匀，将带草盖的发酵罐置于室外自然发酵，温度范围控制为10
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30℃，目前已发酵3年。
[0011]本专利技术还提供了上述方法在食品领域降低生物胺含量方面的应用。优选地，在食品发酵生产过程中接种所述枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)JZXJ
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7菌株。
[0012]与现有技术相比，本专利技术具有以下优点及有益效果：
[0013]本专利技术中枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)JZXJ
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7菌株具有高效的降胺效应，同时具有较强的耐盐能力。在4％
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8％盐胁迫下在含有生物胺条件下生长良好，对尸胺、腐胺、酪胺和组胺的降解率显著增加，在4％盐浓度下降解率分别高达86.1％、93.6％、85.2％、85.4％，胺氧化酶基因yobN相对表达量被显著激活。该菌可作为发酵水产品的有效防治剂，对降低产品发酵过程中有害生物胺积累具有显著意义。
附图说明
[0014]图1为JZXJ
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7菌株形态学特征和革兰氏染色镜检图。
[0015]图2为JZXJ
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7菌株基于16S rRNA基因序列的系统发育树。
[0016]图3为DNS
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Cl衍生的生物胺标准液相色谱图(1.腐胺；2.尸胺；3.组胺；4.1,7
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二氨基庚烷；5.酪胺；6.亚精胺；7.精胺)。
[0017]图4为株分离菌的生物胺降解效果图。
[0018]图5为不同盐浓度胁迫对JZXJ
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7菌株在含有50mg/L生物胺条件下的生长影响。
[0019]图6为不同盐浓度胁迫下的JZXJ
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7菌株的生物胺降解率。
[0020]图7为不同盐浓度胁迫下的JZXJ
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7菌株yobN的相对表达量。
具体实施方式
[0021]以下结合具体实施例和附图来进一步说明本专利技术，但实施例并不对本专利技术做任何形式的限定。除非特别说明，本专利技术采用的试剂、方法和设备为本
常规试剂、方法和设备。除非特别说明，本专利技术所用试剂和材料均为市购。
[0022]本专利技术实施例所用材料与试剂：PrepMan Ultra Kits核酸萃取剂，购于美国ThermoFisher公司；基因组DNA提取试剂盒：上海生工生物有限公司；腐胺(≥98.4％)、尸胺(≥98.1％)、组胺(≥98.3％)、酪胺(≥99.5％)、精胺(≥97.2％)、亚精胺(≥99.2％)、丹磺酰氯(DNS
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Cl)、脯氨酸和乙酸铵，均为色谱纯美国Sigma公司；乙腈、甲醇、丙酮、碳酸氢钠、氢氧化钠，均为分析纯沈阳化学试剂厂。
[0023]实施例1枯草芽孢杆菌JZXJ
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7菌株分离与鉴定
[0024]1、菌株分离
[0025]乌虾酱，学名糠虾酱(opossum shrimp paste)，采自辽宁省锦州笔架山食品厂，加入乌虾体重16％食盐搅拌均匀，将带草盖的发酵罐置于室外自然发酵，温度范围控制为10
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30℃，目前已发酵3年。对发酵3年的乌虾酱中分离出的7株细菌进行接种，在37℃、120rpm/min，的LB肉汤培养基(pH为7.0)传代培养24h。随后挑取单菌落在LB肉汤琼脂培养基中培养24h后，再以种子液1％接种量接种于LB培养基中，培养24h，随后在4000rpm/min，4℃离心收集菌体，用pH＝7.0的PBS缓冲液洗涤2次后，将菌体重悬于2mLPBS溶液中备用。
[0026]2、菌株形态学观察：将菌株ZJXJ
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7的单菌落划线接种于LB固体培养基进行纯化，37℃培本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)JZXJ
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7菌株在降解生物胺中的应用，其特征在于，所述枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)JZXJ
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7菌株于2022年5月9日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为GDMCC No：62458。2.一种降解生物胺的方法，其特征在于，所述方法是将权利要求1所述的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)JZXJ
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7菌株接种至含生物胺的液体、半固体或固体中。3.根据权利要求2所述的一种降解生物胺的方法，其特征在于，所述的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)JZXJ
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7菌株接种量为1.5％
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3％。4.根据权利要求2所述的一种降解生物胺的方...

【专利技术属性】
技术研发人员：邓义佳，崔方超，励建荣，王润东，李学鹏，仪淑敏，檀茜倩，
申请(专利权)人：渤海大学，
类型：发明
国别省市：