一种三角梅多倍体种质的创制方法及其应用技术

本发明专利技术涉及一种三角梅多倍体种质的创制方法及其应用，属于植物多倍体诱导技术领域。本发明专利技术提供了一种三角梅多倍体种质的创制方法，将秋水仙素溶液滴加在三角梅幼苗的叶腋处进行染色体加倍，经倍性鉴定后得到的多倍体植株即为所述的三角梅多倍体种质。本发明专利技术避免了离体组织培养等复杂的技术环节，诱导周期短，只需将秋水仙素溶液处理三角梅幼苗的叶腋处即可，减少了秋水仙素的使用量，通过调整秋水仙素溶液的具体处理方式和条件，实现了三角梅多倍体种质创制，不仅提高了三角梅多倍体种质的诱导效率，而且处理方法简单，容易控制和操作，成本低，便于推广。便于推广。便于推广。

【技术实现步骤摘要】
一种三角梅多倍体种质的创制方法及其应用


[0001]本专利技术涉及植物多倍体诱导
，特别是涉及一种三角梅多倍体种质的创制方法及其应用。

技术介绍

[0002]三角梅(Bougainvillea)，又称勒杜鹃、九重葛、叶子花等，最早发现于南美洲，是紫茉莉科(Nyctaginaceae)三角梅属(Bougainvillea)的一种常见的多年生木本植物，现已经广泛用作观赏园艺植物，种植在世界各地尤其是热带亚热带地区。三角梅品种多样，适应性强，易栽培，花色多，花期长，广泛应用于园林造景、路桥美化、节庆花展、家庭盆栽等，是产业规模最大的热带景观植物之一。
[0003]三角梅属分布有18个种，其中具有较高观赏性，应用到园艺栽培中的有光叶三角梅(B.glabra)、毛叶三角梅(B.spectabilis)和秘鲁三角梅(B.peruviana)，均为二倍体物种，是栽培品种的重要基因来源。然而，三角梅种间杂交品种、二倍体(2n＝2
×
＝34)与四倍体(2n＝2
×
＝34)杂交得到的三倍体杂种F1(2n＝3
×
＝51)，都存在高度不育的现象，制约了育种工作的持续性开展。主要原因有：(1)三角梅属不同种间染色体的同源程度低，产生的杂种F1的染色体在减数分裂时不能配对成正常的二价体，低同源性的染色体呈单价体形式存在；(2)种间杂种存在染色体易位、倒位等结构上的变异，形成多价体和单价体；(3)三倍体杂种减数分裂时同源染色体联会紊乱，不能均等分离。这些均能导致杂种配子的形态结构、细胞学变异和高度不育性。建立染色体加倍的技术体系，能够获得更多可育的杂种后代，为三角梅规模化育种扫清障碍。另外多倍化赋予植株茎秆粗壮、花叶巨大、胁迫抗性强等新的优良性状，产生有育种应用价值的优异新种质。
[0004]目前已知三角梅的多倍化主要由两种途径产生：(1)自然变异，出现率低，多为嵌合体，不易被发现。(2)离体组织培养诱导产生，周期长、技术步骤繁琐、设施条件依赖性高、只能针对特定品种等，而且现有的三角梅多倍体的诱导效率很低，远远不能满足开展规模化育种对大量可育亲本材料的需求，限制了三角梅的育种研究和发展。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的在于提供了一种三角梅多倍体种质的创制方法，以三角梅的幼苗作为诱导材料，能够提高三角梅多倍体种质的诱导效率，同时减少诱导剂的用量，且成本低、简单易行、处理时间短。
[0006]为解决上述技术问题，本专利技术提供了以下技术方案：
[0007]本专利技术提供了一种三角梅多倍体种质的创制方法，包括如下步骤：
[0008]将秋水仙素溶液滴加在三角梅幼苗的叶腋处进行染色体加倍，经倍性鉴定后得到的多倍体植株即为所述的三角梅多倍体种质；所述秋水仙素溶液的浓度为100
‑
500mg/L，所述秋水仙素溶液的处理时间为1
‑
5天。
[0009]优选的，所述秋水仙素溶液中含有1
‑
2％的DMSO。
[0010]优选的，所述叶腋为三角梅幼苗的子叶叶腋或真叶未长出时两个子叶中间的生长点。
[0011]优选的，所述滴加的次数为每天两次。
[0012]优选的，所述倍性鉴定的对象为染色体加倍处理后萌发的枝条。
[0013]优选的，得到的多倍体植株进行所述倍性鉴定的次数≥3次。
[0014]优选的，所述三角梅幼苗为三角梅自然授粉或亲本杂交、授粉、结实后所得的种子萌发所得。
[0015]优选的，所述授粉的花朵为当天开放的花朵。
[0016]优选的，所述种子萌发的基质为疏松透气材料。
[0017]本专利技术还提供了上述的方法在三角梅育种中的应用。
[0018]本专利技术提供了一种三角梅多倍体种质的创制方法，以三角梅的幼苗为作为诱导材料，处理方法简单，容易控制和操作。本专利技术所述方法只需将秋水仙素溶液处理三角梅幼苗的叶腋处即可，减少了秋水仙素的使用量，通过调整秋水仙素溶液的具体处理方式和条件，实现了三角梅多倍体种质创制。经实验证实，本专利技术所述方法能够提高三角梅多倍体种质的诱导效率，最高能达到46.43％；同时所述方法无需组培操作，不需要无菌环境，操作简单，成本低，便于推广。
附图说明
[0019]图1为本专利技术实施例1提供的毛叶三角梅B.spectabilis cv.
‘
Rosa Catalina
’
(2
×
)和光叶三角梅B.glabra cv.
‘
Bixi
’
(2
×
)种间杂交F1后代。
[0020]图2为本专利技术实施例1提供的母本B.spectabilis cv.
‘
Rosa Catalina
’
(2
×
)的细胞核DNA流式细胞分析图。
[0021]图3为本专利技术实施例1提供的父本B.glabra cv.
‘
Bixi
’
(2
×
)的细胞核DNA流式细胞分析图。
[0022]图4为本专利技术实施例1提供的染色体加倍后的
‘
Rosa Catalina
’ב
Bixi
’
子代种子苗四倍体细胞核DNA流式细胞分析图。
[0023]图5为本专利技术实施例1提供的染色体加倍后的
‘
Rosa Catalina
’ב
Bixi
’
子代种子苗二倍体/四倍体混倍体流式细胞分析图。
[0024]图6为本专利技术实施例1提供的
‘
Rosa Catalina
’ב
Bixi
’
子代成功加倍后的四倍体植株。
[0025]图7为本专利技术实施例1提供的
‘
Rosa Catalina
’ב
Bixi
’
子代成功加倍后的2
×
/4
×
混倍体植株。
[0026]图8为本专利技术实施例2提供的
‘
Rosa Catalina
’
(2
×
)为母本、
‘
TetraMiss Manila
’
(4
×
)为父本的杂交子代种子苗，经染色体加倍后的六倍体流式细胞分析图。
[0027]图9为本专利技术实施例2提供的
‘
Rosa Catalina
’
(2
×
)为母本、
‘
TetraMiss Manila
’
(4
×
)为父本的杂交子代种子苗，经染色体加倍后的3
×
/6
×
混倍体流式细胞分析图。
[0028]图10为本专利技术实施例2提供的
‘
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种三角梅多倍体种质的创制方法，其特征在于，包括如下步骤：将秋水仙素溶液滴加在三角梅幼苗的叶腋处进行染色体加倍，经倍性鉴定后得到的多倍体植株即为所述的三角梅多倍体种质；所述秋水仙素溶液的浓度为100
‑
500mg/L，所述秋水仙素溶液的处理时间为1
‑
5天。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述秋水仙素溶液中含有1
‑
2％的DMSO。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述叶腋为三角梅幼苗的子叶叶腋或真叶未长出时两个子叶中间的生长点。4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于...

【专利技术属性】
技术研发人员：牛俊海，冷清云，李亚，徐世松，李海燕，黄少华，
申请(专利权)人：中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所，
类型：发明
国别省市：