一种微流控PCR定量检测方法技术

本发明专利技术涉及PCR检测技术领域，且公开了一种微流控PCR定量检测方法，包括主板，所述主板的底侧壁处贯穿连接有弹夹机构，所述弹夹机构的内部包括有连接条、弹压板和连接轴，所述弹压板的侧壁处贯穿连接于连接条的侧壁之间，所述连接轴的侧壁贯穿连接于弹压板的侧壁之间，所述弹夹机构的侧壁前端顶部贯穿连接有插接机构。通过设置亲水坑和PCR芯片连接，腔体内可设置定量的溶液可供检测，在检测的过程中可保持数据的稳定，两片卡片侧壁之间的空气气压加强，将此处的卡片的两片之间挤压拉开，那么即可将活动板侧壁之间产生的热气给去除，弹力架的侧壁拉伸时会扯动排孔处，可加速内部的气体挤压，减少气体堆积影响检测结果。减少气体堆积影响检测结果。减少气体堆积影响检测结果。

【技术实现步骤摘要】
一种微流控PCR定量检测方法


[0001]本专利技术涉及PCR检测
，具体为一种微流控PCR定量检测方法。

技术介绍

[0002]对于大分子标记物的筛选和诊断过程中，取样的过程中都容易出现不能等量的区分检测，在筛选的过程中，PCR检测设备和被检测体之间接触需要经过冲洗和温浴，此时检测体和被检测体直接无法准确的接触来得到较为准确的结果且检测设备容易受到环境以及设备自身的温度影响，从而最终影响到检测的结果。

技术实现思路

[0003]为解决上述微流控PCR检测过程中容易受到设备以及步骤中产生的温度干扰导致结果误差的问题，实现以上微流控PCR在检测过程中减少温度干扰影响检测结果的目的，本专利技术通过以下技术方案予以实现：一种微流控PCR定量检测方法，包括以下步骤：
[0004]S1、将待检测的样品取适当的份量，进行待检测处理；
[0005]S2、配置PCR水相，其中包括1％
‑
3％上游引物、1％
‑
3％下游引物、0.3％
‑
0.5％PCR模板、15％
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25％PCRmix依次均匀混合，将由导热材质制备成的基体制成腔体状态，形成一头尖端，另一头圆头光滑状；
[0006]S3、将形成腔体状态基体侧面，设置有亲水坑，在亲水坑处连接有出样孔，将PCR芯片的基体材料和亲水坑处连接在一起，在腔体内滴入S2中配置的PCR水相混合物；
[0007]S4、往PCR水相混合物中滴入70％
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85％的甘油，15％
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25％的甘油酯混合，获得混合后的溶液；
[0008]S5、将S4中混合后的溶液一同注入到S3中的腔体中，由于此时腔体侧壁处的亲水坑和PCR芯片连接在一起，在PCR芯片的侧壁启动时，其热量和腔体之间混合转换，热量传递至腔体内；
[0009]S6、腔体内的热量通过内部的混合溶液转换吸收，将亲水坑部位进行干燥处理，对接PCR定量检测设备采集信号；
[0010]S7、PCR反应后，通过吸水坑处吸取腔体内混合溶液微滴，有荧光信号为阳性，无荧光信号为阴性。
[0011]一种微流控PCR定量检测辅助设备，包括主板，所述主板的底侧壁处贯穿连接有弹夹机构，所述弹夹机构的内部包括有连接条、弹压板和连接轴，所述弹压板的侧壁处贯穿连接于连接条的侧壁之间，所述连接轴的侧壁贯穿连接于弹压板的侧壁之间，所述弹夹机构的侧壁前端顶部贯穿连接有插接机构，所述插接机构的底端贯穿连接有弹压机构，所述弹压机构的内部包括复位弹簧和支撑杆，所述复位弹簧的侧壁处贯穿并环绕连接于支撑杆的外侧壁处，所述支撑杆的底侧壁处贯穿连接有转筒机构，所述转筒机构的底部贯穿并活动连接有拼接机构，所述拼接机构的内部包括卡片和活动板，所述卡片的底侧壁处贯穿连接于活动板的内侧壁处。
[0012]进一步的，所述连接轴的侧壁处贯穿连接于弹压板的侧壁轴心处，连接条的侧壁摆动时，可以弹压板的侧壁为支撑。
[0013]进一步的，所述插接机构的内部包括活动柱、齿柱和套圈，所述齿柱的侧壁顶端贯穿连接于活动柱的侧壁顶端，所述套圈的内圈贯穿连接于活动柱的外侧壁处，所述齿柱的外侧端卡接于套圈的内圈侧壁处，所述支撑杆的外侧壁顶端贯穿连接于齿柱的内侧壁处，当活动柱的侧壁处向下滑动时，向下按压齿柱的侧壁处，齿柱的侧壁可向下按压支撑杆，齿柱的侧壁可卡在活动柱的侧壁处进行支撑。
[0014]进一步的，所述转筒机构的内部包括有罐体和活动筒，所述活动筒的内侧壁处贯穿连接于罐体的外侧壁处，所述活动筒的底侧壁处贯穿连接于卡片的内侧壁处，当支撑杆的侧壁下滑时，可挤压罐体，从而可向活动筒的内部挤压气体。
[0015]进一步的，所述主板的侧壁中间贯穿连接有活动页，所述活动页的侧壁顶端贯穿连接有对接杆，主板的两侧在受到活动板的内侧壁处挤压时可向中间部位靠拢，从而可挤压活动页的侧壁，活动页受到对接杆的限制，即可向主板的内部挤压。
[0016]进一步的，所述主板的侧壁中间贯穿连接有弹力架，所述弹力架的侧壁处设置有排孔，在主板的侧壁之间挤压时，可挤压弹力架的侧壁，弹力架向内挤压排孔。
[0017]进一步的，所述转筒机构的底侧外侧壁处滑动连接于卡片的侧壁间隙之间。
[0018]本专利技术提供了一种微流控PCR定量检测方法。具备以下有益效果：
[0019]1、该微流控PCR定量检测方法，通过将混合溶液注入腔体内，通过设置亲水坑和PCR芯片连接，亲水坑处可进行内部溶液的温度置换，以便腔体内可设置定量的溶液可供检测，在检测的过程中可保持数据的稳定。
[0020]2、该微流控PCR定量检测方法，通过支撑杆自身挤压时，可将内部的气体向活动板的侧壁夹缝中挤动，由于卡片的侧壁之间是设置有通孔的，气体可以从内部的卡片之间的通孔中流动，当卡片其中一侧的热量过高时，两片卡片侧壁之间的空气气压加强，将此处的卡片的两片之间挤压拉开，那么即可将活动板侧壁之间产生的热气给去除。
[0021]3、该微流控PCR定量检测方法，通过当连接条的侧壁分开时，会扯动主板的侧壁，当两侧的主板的侧壁高低度出现偏差时，可扯动弹力架的侧壁，弹力架的侧壁拉伸时会扯动排孔处，可加速内部的气体挤压，减少气体堆积影响检测结果。
附图说明
[0022]图1为本专利技术整体结构连接示意图；
[0023]图2为本专利技术弹夹机构内部相关结构连接右侧示意图；
[0024]图3为本专利技术插接机构、弹压机构和转筒机构之间的结构连接示意图。
[0025]图中：1、主板；2、弹夹机构；211、连接条；212、弹压板；213、连接轴；3、插接机构；311、活动柱；312、齿柱；313、套圈；4、弹压机构；411、复位弹簧；412、支撑杆；5、转筒机构；511、罐体；512、活动筒；6、拼接机构；611、卡片；612、活动板；7、活动页；8、对接杆；9、排孔；10、弹力架。
具体实施方式
[0026]下面将结合本专利技术实施例中的附图，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完
整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。
[0027]该微流控PCR定量检测方法的实施例如下：
[0028]一种微流控PCR定量检测方法，包括以下步骤：
[0029]S1、将待检测的样品取适当的份量，进行待检测处理；
[0030]S2、配置PCR水相，其中包括1％
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3％上游引物、1％
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3％下游引物、0.3％
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0.5％PCR模板、15％
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25％PCRmix依次均匀混合，将由导热材质制备成的基体制成腔体状态，形成一头尖端，另一头圆头光滑状；
[0031]S3、将形成腔体状态基体侧面，设置有亲水坑，在亲水坑处连接有出样孔，将P本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种微流控PCR定量检测方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、将待检测的样品取适当的份量，进行待检测处理；S2、配置PCR水相，其中包括1％
‑
3％上游引物、1％
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3％下游引物、0.3％
‑
0.5％PCR模板、15％
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25％PCRmix依次均匀混合，将由导热材质制备成的基体制成腔体状态，形成一头尖端，另一头圆头光滑状；S3、将形成腔体状态基体侧面，设置有亲水坑，在亲水坑处连接有出样孔，将PCR芯片的基体材料和亲水坑处连接在一起，在腔体内滴入S2中配置的PCR水相混合物；S4、往PCR水相混合物中滴入70％
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85％的甘油，15％
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25％的甘油酯混合，获得混合后的溶液；S5、将S4中混合后的溶液一同注入到S3中的腔体中，由于此时腔体侧壁处的亲水坑和PCR芯片连接在一起，在PCR芯片的侧壁启动时，其热量和腔体之间混合转换，热量传递至腔体内；S6、腔体内的热量通过内部的混合溶液转换吸收，将亲水坑部位进行干燥处理，对接PCR定量检测设备采集信号；S7、PCR反应后，通过吸水坑处吸取腔体内混合溶液微滴，有荧光信号为阳性，无荧光信号为阴性。2.一种微流控PCR定量检测辅助设备，应用于权利要求1中所述的一种微流控PCR定量检测方法，包括主板(1)，其特征在于：所述主板(1)的底侧壁处贯穿连接有弹夹机构(2)，所述弹夹机构(2)的内部包括有连接条(211)、弹压板(212)和连接轴(213)，所述弹压板(212)的侧壁处贯穿连接于连接条(211)的侧壁之间，所述连接轴(213)的侧壁贯穿连接于弹压板(212)的侧壁之间，所述弹夹机构(2)的侧壁前端顶部贯穿连接有插接机构(3)，所述插接机构(3)的底端贯穿连接有弹压机构(4)，所述弹压机构(4)的内部包括复位...

【专利技术属性】
技术研发人员：张军，武建，
申请(专利权)人：江苏亦文生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：