一株抑病促生型蜡样芽孢杆菌YT2-1C及其应用制造技术

一株抑病促生型蜡样芽孢杆菌YT2

【技术实现步骤摘要】
一株抑病促生型蜡样芽孢杆菌YT2
‑
1C及其应用


[0001]本专利技术涉及微生物
，具体涉及一株抑病促生型蜡样芽孢杆菌YT2
‑
1C及其应用。

技术介绍

[0002]生物防治在一定程度上可补充甚至替代化学防治，达到化学物质减量的作用，是目前极具研究价值的绿色防治方法。有益的植物、微生物相互作用是决定植物健康和土壤肥力的重要因素，生防菌的有益作用在各种重要的农作物生产中已得到证实。芽孢杆菌是一类芽孢的革兰氏阳性细菌，大部分的芽孢杆菌主要有产吲哚乙酸、溶解磷酸盐、固氮、产铁载体等作用，目前使用的一些高效芽孢杆菌菌株通常具有以上描述的多个特性。吲哚乙酸(IAA)是一种植物生长素，对植物抽枝或芽、苗等的顶部芽端形成有促进作用。铁载体是一类年低分子量的、对Fe
3+
具有高亲和力的螯合物，是一种可以结合铁色素(ferric ion)并且供给给微生物细胞的低分子量物质，蛋白酶可以促进蛋白水解，分解成氨基酸供给植物根系。
[0003]为了筛选对蔬菜有促生能力的广谱促生菌株，本研究拟筛选高效、优良的植物根际促生菌，以期为微生物肥料的研制提供优质菌种资源，为微生物肥料替代分化学肥料技术在蔬菜中的推广和应用提供科学依据。

技术实现思路

[0004]本专利技术目的在于提供一种抑病促生型蜡样芽孢杆菌YT2
‑
1C，能高效合成吲哚乙酸(IAA)的同时，具有优异的产铁载体和蛋白酶的能力，同时高效抑制蚕豆葡萄孢。
[0005]本专利技术另一目的是提供上述蜡样芽孢杆菌YT2
‑
1C的应用。
[0006]本专利技术目的通过如下技术方案实现：
[0007]一株抑病促生型蜡样芽孢杆菌YT2
‑
1C，保藏于中国典型培养物保藏中心，分类名为蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)，保藏地址为中国湖北省武汉市武昌区八一路299号，保藏日期为2022年5月9日，保藏号为CCTCC M 2022564。
[0008]蜡样芽孢杆菌YT2
‑
1C菌落大，质地软，稍有光泽的灰白色菌落，其生理化测定结果为：革兰氏阳性菌；其能发挥高产吲哚乙酸、铁载体、蛋白酶的同时，高效抑制蚕豆葡萄孢。
[0009]进一步，上述蜡样芽孢杆菌YT2
‑
1C在制备具有合成吲哚乙酸、铁载体、蛋白酶和抑制蚕豆葡萄孢一种或多种作用的菌剂中的应用。
[0010]进一步，上述蜡样芽孢杆菌YT2
‑
1C具体在促进植物生长中的应用。
[0011]优选的，上述蜡样芽孢杆菌YT2
‑
1C在蔬菜育苗基质中应用。
[0012]进一步，上述在蔬菜育苗基质中的应用具体是将蜡样芽孢杆菌YT2
‑
1C接种至普通蔬菜育苗基质中混合均匀，形成功能型育苗基质，蜡样芽孢杆菌YT2
‑
1C的接种量与基质干重的比值为5mL/100g，蜡样芽孢杆菌YT2
‑
1C的浓度为108CFU/mL。
[0013]本专利技术具有如下技术效果：
[0014]本专利技术中蜡样芽孢杆菌YT2
‑
1C具有利用色氨酸高效合成吲哚乙酸(IAA)的能力，IAA产量能达到193mg/L；具有优异的产铁载体能力，其活性载体单位为62.11％，可以合成蛋白酶46.1U/mL，同时对蚕豆葡萄孢具有高效的抑制作用。通过上述多种作用，可以协同对蔬菜植物产生优异的促生效果，应用于育苗基质中，可以显著提高出苗量，对蔬菜植物有优异的促生作用。
附图说明
[0015]图1：菌株YT2
‑
1C在LB平板上的菌落形态。
[0016]图2：菌株YT2
‑
1C在CAS平板上培养图(左图为正面图，右图为反面图)。
[0017]图3：YT2
‑
1C对蚕豆葡萄孢的抑菌效果图(左为对照图，右为抑菌图)。
[0018]图4：菌株YT2
‑
1C应用到黄瓜育苗基质中的试验效果对比。
[0019]图5：菌株YT2
‑
1C应用到黄瓜育苗基质中田间试验的效果对比。
[0020]图6：菌株YT2
‑
1C应用到黄瓜番茄基质中的试验效果对比。
[0021]图7：菌株YT2
‑
1C应用到黄瓜辣椒基质中的试验效果对比
具体实施方式
[0022]下面通过实施例对本专利技术进行具体的描述，有必要在此指出的是，以下实施例只用于对本专利技术进行进一步说明，不能理解为对本专利技术保护范围的限制，该领域的技术人员可以根据上述本
技术实现思路
对本专利技术作出一些非本质的改进和调整。
[0023]实施例1
[0024]菌株的分离、筛选和鉴定
[0025]LB培养基：蛋白胨10g，酵母粉5g，NaCl 10g，蒸馏水定容至1L，1
×
105Pa灭菌20min。
[0026]1.分离：土壤样品采至重庆九龙坡区白市驿稻田，取土壤样品5g，置入装有45mL无菌水的三角瓶中，摇床180rpm振荡30min，放置到80℃的水浴锅中煮20min，以杀死其它细菌。制成土壤悬液，采用10倍稀释法配制浓度梯度为10
‑2、10
‑3、10
‑4的土壤悬液样品。
[0027]2.筛选：
[0028](1)菌株的产IAA能力：将分离纯化后的菌悬液按培养基体积的1％接种于上述金氏培养基(King)中，在30℃、180r/min恒温摇床上振荡培养7d，12000r/min离心10min，取0.1mL上清液滴至检测板上，加等量S2比色液，另取S2比色液0.1mL，分别加入50、30、10mg/L标准植物生长激素IAA0.1mL作梯度对照，室温静置15min后观察颜色变化，确定菌株是否具有分泌IAA的能力。
[0029](2)产铁载体功能检测：
[0030]配置CAS检测液：将0.079g CAS溶于50mL去离子水中，再加人10mL 1mmo1/L FeCl3溶液(用盐酸配制)，得溶液A。将0.069g十六烷基三甲基溴化铵(HDTMA)溶于40mL的去离子水中，得溶液B。将A溶液沿烧杯壁缓缓加人B溶液中，搅拌混匀即得100mL CAS蓝色检测液。
[0031]菌株铁载体定性检测：将菌株YT2
‑
1C接种到MKB液体培养基中(酪蛋白氨基酸5g、甘油15mL、K2HPO42.5g、MgSO4·
7H2O 2.5g,双蒸水1L，pH＝7.2)，在30℃、180r/min下培养48h。取5mL菌液放人离心管，在10000r/min下离心10min，取上清液1mL与等量CAS检测液充
分混匀，静置反应1h，然后用去离子水稀释两倍。观测经过培养的CAS检测平板，分泌铁载体的细菌菌落周围会出现明显的橙色至黄色铁载体晕圈，如图2所示。可见，菌株YT2本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一株抑病促生型蜡样芽孢杆菌YT2
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1C，其特征在于：蜡样芽孢杆菌YT2
‑
1C保藏于中国典型培养物保藏中心，分类名为蜡样芽孢杆菌（Bacillus cereus），保藏日期为2022年5月9日，保藏号为CCTCC M 2022564。2.如权利要求1所述的抑病促生型蜡样芽孢杆菌YT2
‑
1C在制备具有合成吲哚乙酸、铁载体、蛋白酶和抑制蚕豆葡萄孢一种或多种作用的菌剂中的应用。3.如权利要求1所述的抑病促生型蜡样芽孢杆菌YT2
‑
1 C的应用，其特征在于：具体在促...

【专利技术属性】
技术研发人员：张慧，廖敦秀，马连杰，卢文才，唐荣莉，余端，杭晓宁，胡留杰，李燕，王谊，梁涛，张健，王琳，
申请(专利权)人：重庆市农业科学院，
类型：发明
国别省市：