一种线虫生防细菌菌株及其在防治烟草根结线虫病中的应用制造技术

技术编号:34912122 阅读:56 留言:0更新日期:2022-09-15 07:01
本发明专利技术公开了一种线虫生防细菌菌株及其在防治烟草根结线虫病中的应用,属于微生物技术领域。生防细菌为钟乳石类诺卡氏菌(Nocardioides stalactiti)YC3001菌株,YC3001菌株已于2021年12月17日保存于中国典型培养物保藏中心;保藏单位地址:湖北省武汉市洪山区八一路武汉大学;保藏号:CCTCC:M 20211636。本发明专利技术的微生物菌体及其代谢产物,能与农药常规吸附载体和助剂混合制成YC3001菌剂。YC3001在制备用于防治烟草根结线虫病的菌剂中的应用。菌剂中的应用。

【技术实现步骤摘要】
一种线虫生防细菌菌株及其在防治烟草根结线虫病中的应用


[0001]本专利技术涉及微生物应用
,具体涉及一种线虫生防细菌菌株及其在防治烟草根结线虫病中的应用。

技术介绍

[0002]根结线虫(Meloidogyne spp.)是多种农作物的重要病原,在全球每年造成的经济损失高达1570亿美元(Abad et al.,2008)。烟草根结线虫病是世界性的烟草病害,据联合国粮农组织(FAO)统计,全球烟草每年因线虫病害造成的直接经济损失达4亿美元,我国除东北烟区外,各大烟区普遍发生,据全国烟草病虫测报中心站统计,仅2015年全国烟草根结线虫病发生面积约310万亩,产值损失近15亿元;贵州毕节、黔西南州等主产核心烟区根结线虫病地常年危害致烟叶减产30%左右,重灾年份部分地块绝收;云南烟区每年发病面积就超2 万hm2,发病地块烟叶常年减产达30%以上;在四川凉山、攀枝花的根结线虫病重灾区,发病率超过70%,年烟叶损失率高达10%~20%,严重影响了烤烟的可持续发展(张宗锦等,2019)。
[0003]烟草根结线虫病是典型的难防难治病害之一,主要表现在:(1)根结线虫病归为根茎类病害,但病原物为动物,营寄生生活,其致病灾变机理、寄主互作机制等较细菌、真菌和病毒类病害更为复杂;(2)病原种类多、分布广,致病性强;(3)常规农业防治措施难以见效,根结线虫没有转化性明显的寄主,可侵染几乎所有栽培植物(114科3000余种植物),农田生态系统中的大部分植物均可被寄生,十分有利于线虫逃避复杂的环境变化和农事活动干扰;(4)抗病品种应用受限,当前主栽品种抗性仅针对根结线虫某一种的某一生理小种,均不具备对烟草根结线虫这一混合种群的抗性;(5)高效低毒化学杀线剂种类稀缺、成本高且抗/耐药性及生态安全性等问题突出,化学防治前景不容乐观 (Ristaino&Thomas,1998)。相对而言,利用线虫天敌微生物和植物源天然产物研发的生物杀线剂,因其对人畜的安全性和环境的友好性一直被研究人员和市场需求寄予很厚望,更具实用性和可操作性。
[0004]针对作物根结线虫病,目前利用Bacillusfirmus、B.amyloliquefaciens、 Pasteuria penetrans、Burkholderia cepacia等生防细菌以及 Purpureocillium lilacinum、Pochonia chlamydosporia等生防真菌开发的生物杀线剂已在国内外登记并用于根结线虫病的防治(Davies&Spiegel,2011)。

技术实现思路

[0005]针对现有技术的问题,本专利技术提供了一种绿色、高效、新型的线虫生防细菌菌株及其在防治烟草根结线虫病中的应用。
[0006]为达到上述目的,本专利技术采用了下列技术方案:本专利技术的一种线虫生防细菌菌株,所述的线虫生防细菌菌株为钟乳石类诺卡氏菌(Nocardioides stalactiti) YC3001菌株,保藏名称为钟乳石类诺卡氏菌(Nocardioides stalactiti)YC3001 菌株,保藏于中国典型培养物保藏中心CCTCC,保藏单位地址是湖北省武汉市洪山区八一路武汉大学,保藏日期:
2021年12月17日;保藏编号:CCTCC:M20211636。
[0007]进一步地,YC3001菌株为革兰氏阳性好氧菌,在R2A培养基上,30℃下培养3天,菌落白色,圆形,中央凸起或平滑,直径为1.5

3.5mm;细胞圆杆状,宽为0.55

0.65μm,长为0.85

2.2μm。
[0008]进一步地,所述的R2A培养基:酵母浸出粉0.5g,蛋白胨0.5g,酪蛋白水解物0.5g,葡萄糖0.5g,可溶性淀粉0.5g,磷酸二氢钾0.3g,无水硫酸镁0.024 g,丙酮酸钠0.3g,琼脂15g,用无菌水定容至1000ml,pH为7.2。
[0009]更进一步地,该菌株在10

40℃的温度范围内生长,最适生长温度30℃;在 pH为6.0

9.0的范围内可以生长。
[0010]进一步地,该菌株的最适生长pH为7.0,在R2A培养基上耐受NaCl的最高浓度为4.5%(W/V)。
[0011]进一步地,所述的线虫生防细菌菌株的ITS基因序列为SEQ ID No.1所示的核苷酸序列。
[0012]本专利技术所述的线虫生防细菌菌株制备的线虫生防细菌菌剂。
[0013]进一步地,其活性成分为如下(a)(b)(c)中的至少一种:
[0014](a)所述的线虫生防细菌的发酵培养物;
[0015](b)所得线虫生防细菌的孢子悬液;
[0016](c)所得线虫生防细菌细胞的超声裂解沉淀。
[0017]本专利技术所述的钟乳石类诺卡氏菌(Nocardioides stalactiti)YC3001菌株在制备用于防治烟草根结线虫病的菌剂中的应用。
[0018]有益效果:本专利技术利用YC3001制备的菌剂,能高效防治烟草根结线虫病,具有使用成本低、防效高、无残留、对人畜安全的特点。
[0019]与现有技术相比,本专利技术具有如下优点:(1)利用YC3001菌株制备的菌剂对作物根结线虫病的防效可达68%以上。
[0020](2)利用YC3001菌株制备的菌剂,能高效防治烟草根结线虫病,具有使用成本低、无残留、对人畜安全的特点。
[0021](3)本专利技术在近期筛选根结线虫生防细菌的研究中,从贵州农田石灰岩表面分离到一株对烟草根结线虫二龄幼虫(J2)具有极强致死活性的细菌,菌株号为YC3001,经鉴定该菌株为钟乳石类诺卡氏菌(Nocardioides stalactiti)。钟乳石类诺卡氏菌(Nocardioides stalactiti)是2021年Zhou等人报道的细菌新物种 (Zhou et al.,2021),至今该细菌的生物学功能未见报道。
具体实施方式
[0022]下面结合实施例对本专利技术作进一步的详述。实施例中的微生物菌剂,按微生物发酵常规方法及微生物菌剂制备常规方法制成。
[0023]实施例1
[0024]本专利技术的一种线虫生防细菌菌株,所述的线虫生防细菌菌株为钟乳石类诺卡氏菌(Nocardioides stalactiti)YC3001菌株,保藏名称为钟乳石类诺卡氏菌 (Nocardioides stalactiti)YC3001菌株,保藏于中国典型培养物保藏中心CCTCC,保藏单位地址是湖北省
武汉市洪山区八一路武汉大学,保藏日期:2021年12月 17日;保藏编号:CCTCC:M 20211636。
[0025]所述的YC3001菌株为革兰氏阳性好氧菌,在R2A培养基上,30℃下培养 3天,菌落白色,圆形,中央凸起或平滑,直径为3.5mm;细胞圆杆状,宽为 0.55μm,长为1μm。
[0026]所述的R2A培养本文档来自技高网
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种线虫生防细菌菌株,其特征在于:所述的线虫生防细菌菌株为钟乳石类诺卡氏菌(Nocardioidesstalactiti)YC3001菌株,保藏名称为钟乳石类诺卡氏菌(Nocardioidesstalactiti)YC3001菌株,保藏于中国典型培养物保藏中心CCTCC,保藏单位地址是湖北省武汉市洪山区八一路武汉大学,保藏日期:2021年12月17日;保藏编号:CCTCC:M20211636。2.根据权利要求1所述的线虫生防细菌菌株,其特征在于:YC3001菌株为革兰氏阳性好氧菌,在R2A培养基上,30℃下培养3天,菌落白色,圆形,中央凸起或平滑,直径为1.5

3.5mm;细胞圆杆状,宽为0.55

0.65μm,长为0.85

2.2μm。3.根据权利要求2所述的线虫生防细菌菌株,其特征在于:所述的R2A培养基:酵母浸出粉0.5g,蛋白胨0.5g,酪蛋白水解物0.5g,葡萄糖0.5g,可溶性淀粉0.5g,磷酸二氢钾0.3g,无水硫酸镁0.024g,丙酮酸钠0.3g,琼脂15g,用...

【专利技术属性】
技术研发人员:曹毅阳显斌曾陨涛陆宁陈兴江孟建玉商胜华
申请(专利权)人:贵州省烟草科学研究院
类型:发明
国别省市:

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