一种针对细胞周期的抗肿瘤药物及其在针对细胞周期抗肿瘤药物中的应用制造技术

本发明专利技术属于小分子RNA应用技术领域，公开了一种针对细胞周期的抗肿瘤药物及其在针对细胞周期抗肿瘤药物中的应用。药物成分包括hsa

【技术实现步骤摘要】
一种针对细胞周期的抗肿瘤药物及其在针对细胞周期抗肿瘤药物中的应用


[0001]本专利技术属于小分子RNA应用
，具体涉及一种针对细胞周期的抗肿瘤药物及其在针对细胞周期抗肿瘤药物中的应用。

技术介绍

[0002]包括细胞周期在内的许多细胞行为需要消耗氧气。肿瘤细胞因细胞周期紊乱而失控性增殖，机体无法及时建立结构、功能正常的新生血管为这些肿瘤细胞提供氧气，使其处于急性或慢性缺氧状态(大约2％)。“常氧”被普遍用来描述组织培养瓶中的“正常”氧气水平，即大约20
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21％的氧气。尽管在肿瘤的研究中常氧状态被广泛使用，但这远不是一个准确的外周组织氧合的水平。肿瘤细胞为适应缺氧环境，细胞代谢从有氧呼吸变为糖酵解(通过改变糖酵解相关蛋白的表达来进行代谢重编程)，同时糖酵解生成大量乳酸，使得肿瘤微环境呈酸性。缺氧和酸性环境导致肿瘤细胞对化疗药物产生耐药。除此之外，缺氧让肿瘤信号通路更加错综复杂，影响肿瘤细胞的增殖、转移等(这些机制中的大多数都有助于肿瘤的进展)。目前大部分针对肿瘤的实验研究还是在21％的常氧条件下进行的，但肿瘤细胞瘤有着缺氧微环境以及独特的代谢方式，如果更改氧浓度，肿瘤细胞可能会产生不同的理化性质，许多研究表明，在不同氧气状态下，肿瘤细胞在参与的通路调节、代谢、耐药性和抗辐射性等方面均表现出了明显的差异，而许多肿瘤靶向药物在临床前研究中表现出优异的治疗效果，却在后续的临床研究中效果不佳。
[0003]miRNA是机体内一类重要的非编码微小RNA，在机体的各个组织中大量存在，广泛参与机体的各种生物活动，调节着细胞的调亡、增殖及分化等生理功能。越来越多的研究提示，miRNA是调控肿瘤细胞周期过程的重要分子，在肿瘤疾病的调节中发挥重要作用。目前已知多种miRNA与细胞周期有着紧密的联系。miRNA可以通过直接靶向或通过靶向上游信号影响E2F、Cdks、cyclins、CKI等细胞周期调节因子的表达。miRNA介导的细胞周期调节也与肿瘤的发生发展相关。miRNA不仅可以通过促进细胞周期过程，从而发挥促进细胞增殖的作用，同时也可以阻滞细胞周期从而产生抗增殖的作用。不断有研究显示，miRNA发挥促进或者抑制肿瘤发生发展的作用。一些miRNA分子在细胞内过度表达(miR
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222、miR
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221、miR
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27a等)，通过促进细胞周期进程从G1时期到S时期转变，促进肿瘤细胞的增殖。另一些miRNA分子在细胞内的表达升高(miR
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107、miR
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320c、miR
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203a
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3p等)，则可能导致细胞周期进程在G0/G1时期停滞，起到抑制肿瘤增殖的效果。许多miRNA通过不同途径参与细胞周期的调节，目前还没有关于miR
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320a对细胞周期的研究。

技术实现思路

[0004]为了克服现有技术的不足，本专利技术提供一种针对细胞周期的抗肿瘤药物及其在针对细胞周期抗肿瘤药物中的应用，利用缺氧条件下hsa
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miR
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320a通过其靶基因DAB2和RBM24降低缺氧导致的G2期阻滞的特性，通过miR
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320a的差异表达设计涉及针对Hela肿瘤
细胞的治疗研究，对于治疗宫颈癌药物的研究具有重要意义。
[0005]本专利技术的上述目的是通过以下技术方案实现的：一种针对细胞周期的抗肿瘤药物，其中包括hsa
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miR
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320a抑制物，所述hsa
‑
miR
‑
320a为一种小分子RNA，其核苷酸序列如下：
[0006]5’‑
AAAAGCUGGGUUGAGAGGGCGA
‑3’
[0007]其中5
’‑
AAAGCUG
‑3’
为hsa
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miR
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320a的种子区序列。
[0008]本专利技术还保护基于上述针对细胞周期的抗肿瘤药物在针对细胞周期抗肿瘤药物中的应用，其中包括缺氧条件下hsa
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miR
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320a抑制物促进靶基因DAB2和RBM24表达从而促进Hela肿瘤细胞G2期阻滞进而针对G2期肿瘤细胞的抗肿瘤药物中的应用。
[0009]进一步的，所述靶基因DAB2和RBM24是利用网上数据库TargetScan和双荧光检测确定的。
[0010]进一步的，所述靶基因DAB2和RBM24的序列来源为GenBank。
[0011]进一步的，所述靶基因DAB2和RBM24表达检测使用qRT
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PCR技术和RT
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PCR技术。
[0012]本专利技术与现有技术相比的有益效果是：构建了DAB2和RBM24的siRNA，肿瘤细胞缺氧模型转染hsa
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miR
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320a的抑制物和DAB2和RBM24的siRNA后，对靶基因进行RT
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PCR结果表明靶基因DAB2和RBM24表达下调，同时G2期的阻滞水平下降；本专利技术肿瘤细胞缺氧模型中hsa
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miR
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320a的表达通过其靶基因DAB2和RBM24阻止缺氧导致的G2期阻滞，是hsa
‑
miR
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320a减少缺氧导致的细胞周期阻滞并保护细胞免于死亡的治疗效果。有助于提升针对细胞周期抗肿瘤药物的疗效，为hsa
‑
miR
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320a提供了新的应用领域，有助于加强针对细胞周期抗肿瘤药物的疗效，在肿瘤治疗领域发挥重要作用。
附图说明
[0013]下面结合附图与具体实施方式对本专利技术作进一步说明
[0014]图1是检测Hela肿瘤细胞缺氧模型中hsa
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miR
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320a的表达升高示意图。
[0015]图2是Hela肿瘤细胞缺氧模型中细胞周期的改变示意图。
[0016]图3是转染hsa
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miR
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320a模拟物与抑制物后Hela肿瘤细胞细胞数改变示意图。
[0017]图4是hsa
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miR
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320a与其推测的靶基因DAB2和RBM24的双荧光报告检测示意图。
[0018]图5是hsa
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miR
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320a降低了Hela肿瘤细胞缺氧模型中DAB2和RBM24mRNA的表达示意图。
[0019]图6是转染hsa
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miR
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320a的抑制物及DAB2和RBM24的siRNA阻止缺氧导致的Hela肿瘤细胞G2期升高示意图。
具体实施方式
[0020]下面通过具体实施例详述本专利技术，但不限制本专利技术的保护范围。如无特殊说明，本本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种针对细胞周期的抗肿瘤药物，其特征在于，包括hsa
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miR
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320a抑制物。2.基于权利要求1所述的hsa
‑
miR
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320a抑制物在针对细胞周期抗肿瘤药物中的应用，其特征在于，包括缺氧条件下hsa
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miR
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320a抑制物促进靶基因DAB2和RBM24表达从而促进Hela肿瘤细胞G2期阻滞进而针对G2期肿瘤细胞的抗肿瘤药物中的应用。3.根据权利要求2所述的hsa
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miR
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320a抑制物在针对细胞周期抗肿...

【专利技术属性】
技术研发人员：郎明非，康秀芝，孙晶，李佳欣，刘佳琳，
申请(专利权)人：大连大学，
类型：发明
国别省市：