hsa-miR-320a在抑制肿瘤细胞迁移药物中的应用制造技术

本发明专利技术属于小分子RNA应用技术领域，公开了hsa

【技术实现步骤摘要】
hsa
‑
miR
‑
320a在抑制肿瘤细胞迁移药物中的应用


[0001]本专利技术属于小分子RNA应用
，具体涉及hsa
‑
miR
‑
320a在抑制肿瘤细胞迁移药物中的应用。

技术介绍

[0002]肿瘤转移是大多数癌症患者的重要致死原因，一旦发生转移，肿瘤患者生存率与生存质量明显下降。肿瘤细胞迁移/侵袭能力是转移的关键，其发生机制受到多种因素的影响。miRNA是机体内一类重要的非编码微小RNA，在机体的各个组织中大量存在，广泛参与机体的各种生物活动，调节着细胞的调亡、增殖及分化等生理功能。越来越多的研究提示，miRNA是调控肿瘤细胞周期过程的重要分子，在肿瘤疾病的调节中发挥重要作用。目前已知多种miRNA与细胞迁移有着紧密的联系。miR
‑
10b和miR
‑
23a都参与了转化生长因子
‑
β1诱导的BC细胞和患者组织中的EMT和肿瘤转移。MiR
‑
200c下调HIF
‑
1alpha并抑制肺癌细胞的迁移。许多miRNA通过不同途径参与细胞迁移的调节，目前还没有关于miR
‑
320a对细胞迁移的研究。

技术实现思路

[0003]为了克服现有技术的不足，本专利技术提供hsa
‑
miR
‑
320a在抑制肿瘤细胞迁移药物中的应用，由hsa
‑
miR
‑
320a可通过其靶基因DAB2抑制细胞迁移的特性，利用miR
‑
320a的差异表达设计涉及针对Hela肿瘤细胞的治疗研究，对于治疗宫颈癌药物的研究具有重要意义。
[0004]本专利技术的上述目的是通过以下技术方案实现的：hsa
‑
miR
‑
320a在抑制肿瘤细胞迁移药物中的应用，hsa
‑
miR
‑
320a核苷酸序列如下：
[0005]5’‑
AAAAGCUGGGUUGAGAGGGCGA
‑3’
[0006]其中5
’‑
AAAGCUG
‑3’
为小分子RNA hsa
‑
miR
‑
320a的种子区序列；
[0007]肿瘤细胞的靶基因为DAB2。
[0008]进一步的，hsa
‑
miR
‑
320a在针对细胞迁移抗肿瘤药物中的应用包括hsa
‑
miR
‑
320a的模拟物通过转染肿瘤细胞使hsa
‑
miR
‑
320a的表达升高同时细胞迁移受到抑制的应用，其中，细胞迁移受到抑制是因为hsa
‑
miR
‑
320a的表达升高抑制靶基因DAB2的表达从而抑制细胞迁移。
[0009]进一步的，所述靶基因DAB2是利用网上数据库TargetScan和双荧光检测确定的。
[0010]进一步的，所述靶基因DAB2的序列来源为GenBank。
[0011]进一步的，所述靶基因DAB2表达检测使用qRT
‑
PCR技术和RT
‑
PCR技术。
[0012]进一步的，所述肿瘤细胞为宫颈癌细胞。
[0013]进一步的，所述宫颈癌细胞为Hela。
[0014]进一步的，所述hsa
‑
miR
‑
320a在针对细胞迁移抗肿瘤药物中的应用包括将hsa
‑
miR
‑
320a与载体结合后与抗肿瘤药物和/或药物可接受的辅料复配制成药物组合物。
[0015]本专利技术与现有技术相比的有益效果是：本专利技术对肿瘤细胞转染RNA hsa
‑
miR
‑
320a
的模拟物和抑制物，过表达miR
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320a的模拟物组细胞迁移被抑制，转染RNAhsa
‑
miR
‑
320a抑制物组抑制RNA hsa
‑
miR
‑
320a同时细胞迁移恢复，提示RNAhsa
‑
miR
‑
320a可抑制肿瘤细胞的迁移。本专利技术更深入地利用生物信息学方法和双荧光检测确定了hsa
‑
miR
‑
320a的靶基因为DAB2。同时，靶基因DAB2在mRNA水平与hsa
‑
miR
‑
320a的表达呈负相关。结果表明hsa
‑
miR
‑
320a通过其靶基因DAB2参与了Hela肿瘤细胞迁移的调控，靶基因和hsa
‑
miR
‑
320a可作为肿瘤细胞中的调控分子，从而为临床治疗提供理论和实验依据，有助于提升针对细胞迁移抗肿瘤药物的疗效，对于治疗肿瘤的研究具有重要意义。
附图说明
[0016]下面结合附图与具体实施方式对本专利技术作进一步说明
[0017]图1是hsa
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miR
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320a对Hela肿瘤细胞迁移的影响示意图。
[0018]图2是hsa
‑
miR
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320a与其推测的靶基因DAB2的双荧光报告检测示意图。
[0019]图3是hsa
‑
miR
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320a降低了Hela肿瘤细胞DAB2 mRNA的表达示意图。
[0020]图4是转染DAB2的过表达载体阻止hsa
‑
miR
‑
320a的模拟物导致的细胞迁移抑制示意图。
具体实施方式
[0021]下面通过具体实施例详述本专利技术，但不限制本专利技术的保护范围。如无特殊说明，本专利技术所采用的实验方法均为常规方法，所用实验器材、材料、试剂等均可从商业途径获得，实施例中所使用的肿瘤细胞为Hela肿瘤细胞，而实施例中调控机制作为基础调控机制，在细胞进化过程中不会进化出差异巨大的不同的调控机制，因此理论上本专利技术可以推广到其他肿瘤细胞。
[0022]实施例1
[0023]hsa
‑
miR
‑
320a对Hela肿瘤细胞迁移的影响
[0024]hsa
‑
miR
‑
320a阴性对照物、hsa
‑
miR
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320a模拟物、hsa
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miR
‑
320a抑制物转染到Hela肿瘤细胞中，将Hela肿瘤细胞铺在24孔板中并培养至70％汇合度后转染，培养48h后细胞汇合度达到100％，使用200μL枪头在24孔板里划一道直线，PBS清洗一遍。每孔加入500μL DME本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.hsa
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miR
‑
320a在抑制肿瘤细胞迁移药物中的应用，其特征在于，hsa
‑
miR
‑
320a核苷酸序列如下：5
’‑
AAAAGCUGGGUUGAGAGGGCGA
‑3’
其中5
’‑
AAAGCUG
‑3’
为小分子RNAhsa
‑
miR
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320a的种子区序列；肿瘤细胞的靶基因为DAB2。2.根据权利要求1所述的hsa
‑
miR
‑
320a在针对细胞迁移抗肿瘤药物中的应用，其特征在于，包括hsa
‑
miR
‑
320a的模拟物通过转染肿瘤细胞使hsa
‑
miR
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320a的表达升高从而抑制靶基因表达进而抑制细胞迁移的应用。3.根据权利要求2所述的h...

【专利技术属性】
技术研发人员：郎明非，康秀芝，孙晶，
申请(专利权)人：大连大学，
类型：发明
国别省市：