在多肽生产中具有提高的生产力的丝状真菌细胞的突变体制造技术

本发明专利技术涉及亲本丝状真菌细胞的突变体，该突变体包含：编码目的多肽的多核苷酸；编码Rho

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】在多肽生产中具有提高的生产力的丝状真菌细胞的突变体
[0001]序列表的引用
[0002]本申请含有计算机可读形式的序列表，将其通过引用并入本文。

技术介绍


[0003]本专利技术涉及在多肽生产中具有提高的生产力的突变体丝状真菌细胞。
[0004]相关技术说明
[0005]丝状真菌广泛用于生产各种工业应用的酶和其他生物制品。丝状真菌细胞在目的多肽的产生中的生产力取决于几个因素，如碳源、氮源、分泌、pH、温度和溶解氧。特别地，碳源可以确定诱导和/或抑制哪些分泌酶基因，和其的生产率。碳源通过转录因子和其相关的启动子起作用，根据碳源的水平激活或抑制这些启动子。
[0006]据报道，racA基因在丝状真菌的菌丝生长和菌丝分枝中起关键作用，并且racA基因失活有助于增加蛋白质产量，因为分泌潜力增强(Chen等人,2016,Biotech[生物技术]6:214；Fitz等人,2019,Fungal Biol.Biotechnology[真菌生物学与生物技术](2019),6:16；Fielder等人,2018,Microb.Cell.本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种亲本丝状真菌细胞的分离的突变体，该突变体包含：(a)编码目的多肽的多核苷酸；(b)编码Rho
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GTP酶RacA蛋白的racA基因，其中该racA基因在该亲本丝状真菌细胞中经修饰以产生该突变体，使得该突变体在该Rho
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GTP酶RacA蛋白的产生方面部分或完全缺陷；以及(c)编码GTP酶Ras2蛋白的ras2基因，其中该GTP酶Ras2蛋白在该亲本丝状真菌细胞中经修饰以产生GTP酶Ras2变体，该变体在与SEQ ID NO:11的位置16相对应的位置处包含取代；其中经修饰的racA基因和该Ras2变体的组合协同地增加了该突变体在该目的多肽产生中的生产力。2.如权利要求1所述的突变体，其中该Rho
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GTP酶RacA选自由以下组成的组：(i)Rho
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GTP酶RacA蛋白，其包含与SEQ ID NO:2具有至少70％序列同一性的氨基酸序列；(ii)Rho
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GTP酶RacA蛋白，其由包含与SEQ ID NO:1具有至少70％序列同一性的核苷酸序列的多核苷酸编码；以及(iii)Rho
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GTP酶RacA蛋白，其由包含如下核苷酸序列的多核苷酸编码，该核苷酸序列在高严格条件下与SEQ ID NO:1的全长互补序列杂交。3.如权利要求1所述的突变体，其中该GTP酶Ras2选自由以下组成的组：(i)GTP酶Ras2蛋白，其包含与SEQ ID NO:11具有至少70％序列同一性的氨基酸序列；(ii)GTP酶Ras2蛋白，其由包含与SEQ ID NO:10具有至少70％序列同一性的核苷酸序列的多核苷酸编码；以及(iii)GTP酶Ras2蛋白，其由包含如下核苷酸序列的多核苷酸编码，该核苷酸序列在高严格条件下与SEQ ID NO:10的全长互补序列杂交。4.如权利要求1
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3中任一项所述的突变体，其中该GTP酶Ras2变体在位置16处有氨基酸残基被缬氨酸(Val)取代。5.如权利要求4所述的突变体，其中该GTP酶Ras2变体在SEQ ID NO:11的位置16处或对应于SEQ ID NO:11的位置16处包含取代Gly16Val。6.如权利要求1
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5中任一项所述的突变体，其中该GTP酶Ras2变体与SEQ ID NO:11的多肽具有至少70％，例如至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、或至少99％序列同一性但小于100％序列同一性。7.如权利要求1
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6中任一项所述的突变体，其中该目的多肽对于该亲本丝状真菌细胞或其突变体是天然的。8.如权利要求1
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6中任一项所述的突变体，其中该目的多肽对于该亲本丝状真菌细胞或其突变体是异源的。9.如权利要求1
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8中任一项所述的突变体，其中该目的多肽是抗体、抗原、抗微生物肽、酶、生长因子、激素、免疫调节剂、神经递质、受体、报告蛋白、结构蛋白或转录因子。10.如权利要求1
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8中任一项所述的突变体，其中该目的多肽是纤维素酶。11.如权利要求10所述的突变体，其中该纤维素酶是内切葡聚糖酶、纤维...

【专利技术属性】
技术研发人员：G穆齐埃里克森，
申请(专利权)人：诺维信公司，
类型：发明
国别省市：