一种噬菌体的荧光共价标记方法、具有荧光标记的噬菌体及其应用技术

本发明专利技术提供了一种噬菌体的荧光共价标记方法、具有荧光标记的噬菌体及其应用，该标记方法可以通过将噬菌体与具有聚集诱导发光性能的化合物在水中共同孵育，聚集诱导发光性能的化合物与噬菌体上的巯基发生亲核取代/加成反应得到荧光标记的“AIE工程化噬菌体”。该“AIE工程化噬菌体”不仅可用于败血症病原菌的快速识别，以实现败血症的可视化荧光检测，而且还可以对整个治疗过程进行可视化监测，进而为我们提供更多准确实用的信息并优化和提高治疗效果；有效解决现有的噬菌体鸡尾酒疗法存在的抗菌活性低以及难以实现病原菌的快速诊断和治疗的问题。断和治疗的问题。

【技术实现步骤摘要】
一种噬菌体的荧光共价标记方法、具有荧光标记的噬菌体及其应用


[0001]本专利技术属于生物化学
，具体涉及一种噬菌体的荧光共价标记方法、具有荧光标记的噬菌体及其应用。

技术介绍

[0002]败血症是由多种致病菌侵入血液循环，并在血中生长繁殖产生毒素而引起的急性全身性感染疾病；严重时会导致多器官衰竭而危及生命。败血症病原菌种类的鉴定及快速诊断至关重要，临床上常用的是血培养和下一代测序(NGS)。然而，这些方法存在步骤繁琐操作复杂、耗时长和结果假阳性的缺点。此外，抗生素滥用导致的耐药性问题也增加了败血症治疗的难度。因此，迫切需要开发准确、安全、高效的新方法来检测和消除血液中的病原菌。
[0003]“噬菌体鸡尾酒疗法”现作为一种新的生物防控方法，在病原菌选择性消除方面显示了巨大的潜力，然而，低抗菌活性制约了噬菌体在临床治疗中的应用，尤其是急性感染。更重要的是虽然噬菌体能专一性靶向宿主细菌，但是因为缺乏灵敏的信号雷达而难以实现病原菌的快速诊断及治疗过程的实时监测。

技术实现思路

[0004]针对现有技术中存在的上述问题，本本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种噬菌体的荧光共价标记方法，其特征在于，将噬菌体与具有聚集诱导发光性能的化合物在水中共同孵育即可。2.如权利要求1所述的噬菌体的荧光共价标记方法，其特征在于，所述噬菌体上含有巯基，孵育过程中，所述聚集诱导发光性能的化合物与所述噬菌体结构中的巯基发生亲核取代/加成反应。3.如权利要求1或2所述的噬菌体的荧光共价标记方法，其特征在于，所述噬菌体包括大肠杆菌、铜绿假单胞菌、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌、鼠伤寒沙门氏菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、粪肠球菌、普通变形杆菌、奇异变形杆菌、肠球菌和棒状杆球菌、肺炎克雷伯菌、脆弱类杆菌、白色假丝酵母菌和肺炎链球菌。4.如权利要求1所述的噬菌体的荧光共价标记方法，其特征在于，所述具有聚集诱导发光性能的化合物的化学结构通式如下：其中，R1：R`为C1
‑
C12烷基
R2：
X为O、S或Se；Y
‑
为Cl
‑
、Br
‑
、I
‑
、PF6‑
、PF4‑
、CH3COO
‑
或CF3COO
‑
。5.如权利要求4所述的噬菌体的荧光共价标记方法，其特征在于，所述具有诱导发光性能的化合物以E
‑
2,3
‑
双(5
‑
溴噻吩)丙烯腈、E
‑
2,3
‑
双(5
‑
溴呋喃)丙烯腈或E
‑
2,3
‑
双(5
‑
溴硒酚)丙烯腈作为分子结构骨架，通过改变分子结构骨架上R1位的供电子基团和R2位能与噬菌体表面蛋白中的巯基反应共价结合的基团得到具有聚集诱导发光性能化合物。6.如权利要求5所述的噬菌体的荧光共价标记方法，其特征在于，所述具有聚集诱导发光性能的化合物的具体制备方法为：(1)将化合物A、化合物B以及碱按照1:(1～1.5):(1～5)的摩尔比加入至醇溶剂中，室温下搅拌反应，然后过滤、洗涤、干燥固体产物，得到化合物C；(2)将所述的化合物C、化合物D、钯催化剂及无机碱按照1:(1.3～3):(0.02～0.1):(3～30)的摩尔比加入至混合溶剂中，加热回流直至反应完全；然后用萃取剂萃取反应产物得到有机相，将所述有机相依次用水和饱和食盐水洗涤后用干燥剂干...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴明雨，陈实，辜美佳，万瑜，
申请(专利权)人：西南交通大学，
类型：发明
国别省市：