一种用于免疫分析的化学发光试剂APS-5的合成方法技术

本发明专利技术涉及一种用于免疫分析的化学发光试剂APS

【技术实现步骤摘要】
一种用于免疫分析的化学发光试剂APS
‑
5的合成方法


[0001]本专利技术涉及化工领域，具体涉及一种用于免疫分析的化学发光试剂APS
‑
5的合成方法，本专利技术还涉及其中间体10
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甲基
‑
9,10
‑
二氢化吖啶
‑9‑
硫代羧酸4
‑
氯苯酯的合成方法，以及所述方法中的中间体。

技术介绍

[0002]碱性磷酸酶在碱性条件下水解各种磷酸酯键释放出无机磷，在磷酸基转移中起重要作用，已目前免疫诊断试剂产品最常用的标记酶之一。APS
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5(9
‑
(4
‑
氯苯巯基)(10
‑
甲基
‑
9,10
‑
二氢化吖啶亚甲基)磷酸二钠盐)属于碱性磷酸酶的二氢吖啶类化学发光底物，具有超高检测灵敏度，检测结果稳定，重复性好的优点。
[0003]目前APS
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5的重要中间体10
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甲基
‑
9,10
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二氢化吖啶
‑9‑
硫代羧酸4
‑
氯苯酯的制备方法，是以价格较为便宜的吖啶酮作为主要原料，合成路线主要有两条，路线1，如CN1312252A以吖啶
‑9‑
羧酸为原料，经硫酯化、还原、甲基化反应得到，路线2，如CN104230804A以价格较为便宜的吖啶酮为原料，经N
‑
甲基化、亲核加成、脱水、烯烃还原成醇、羟基氧化成酮进行制备。该中间体经过CN1312252A提供的方法制备得到APS
‑
5。
[0004]路线(1):
[0005][0006]路线(2):
[0007][0008]但上述方法存在原料价格较高、制备困难、中间体成本高、合成工艺复杂等缺点，导致APS
‑
5价格较高，限制了其大规模的发展使用。
[0009]因此，亟待寻找能够有效合成APS
‑
5的方法。

技术实现思路

[0010]本专利技术针对现有技术存在的问题，提供了一种化学发光物APS
‑
5(9
‑
(4
‑
氯苯巯基)(10
‑
甲基
‑
9,10
‑
二氢化吖啶亚甲基)磷酸二钠盐)的中间体10
‑
甲基
‑
9,10
‑
二氢化吖啶
‑9‑
硫代羧酸4
‑
氯苯酯及APS
‑
5的合成方法，本专利技术方法以廉价的吖啶酮作为主要原料，经过甲基化、氰基化、水解、还原等步骤合成。
[0011]本专利技术的一个方面在于提供一种化学发光物APS
‑
5的中间体10
‑
甲基
‑
9,10
‑
二氢化吖啶
‑9‑
硫代羧酸4
‑
氯苯酯(式F)的合成方法，包括：
[0012][0013]步骤1:
[0014]式A的9(10H)
‑
吖啶酮经甲基化反应生成式B的10
‑
甲基
‑9‑
吖啶酮；
[0015]步骤2:
[0016]式B与氰化试剂反应生成式C；
[0017]步骤3:
[0018]式C水解后生成式D；
[0019]步骤4:
[0020]式D与4
‑
氯苯硫酚反应生成式E；
[0021]步骤5:
[0022]式E转化为式F的10
‑
甲基
‑
9,10
‑
二氢化吖啶
‑9‑
硫代羧酸4
‑
氯苯酯。
[0023]本专利技术中，步骤1所述甲基化的甲基化试剂为碘甲烷。所述甲基化反应优选在碱催化下进行。所述碱选自氢化钠、甲醇钠、乙醇钠中的至少一种。甲基化反应的有机溶剂选自DMF、DMSO中的至少一种。
[0024]优选的，步骤1包括：将式A的(10H)
‑
吖啶酮溶于有机溶剂中，
‑
5至5℃下加入碱，50～70℃下搅拌10min至2h，然后滴加碘甲烷，于该温度下继续反应4～16h，得到式B的10
‑
甲基
‑9‑
吖啶酮。
[0025]优选的，步骤1还包括后处理过程，即在反应结束后，将反应液冷却至室温，加水淬灭反应，过滤析出的固体，滤液任选地用选自二氯甲烷、氯仿、乙酸乙酯的有机溶剂提取，合并提取液，饱和食盐水洗，干燥、减压浓缩，所得残余物与滤饼合并，重结晶，得到式B。
[0026]优选的，式A与碘甲烷的摩尔比为1：1.5～3，优选：1：2.2～2.6；式A与碱的摩尔比为1：1.5～3，优选：1：2.2～2.6。
[0027]本专利技术中，步骤2中所述氰化试剂选自三甲基氰硅烷(TMSCN)。优选的，所述反应在碱催化下进行。所述碱选自氢化钠、甲醇钠、乙醇钠中的至少一种。反应的有机溶剂选自四氢呋喃、乙醚中的至少一种。
[0028]优选的，步骤2包括：将式B加入到有机溶剂中溶解，加入碱，缓慢加入氰化试剂，搅
拌反应0.5～4.0h，得到式C。
[0029]优选的，步骤2还包括后处理过程，即在反应结束后，加入水进行淬灭，用选自二氯甲烷、氯仿、乙酸乙酯的有机溶剂提取，合并提取液，干燥、减压浓缩，残余物重结晶，得到式C。
[0030]优选的，式B与氰化试剂的摩尔比为1：1.5～2.8，优选：1：1.9～2.4；式B与碱的摩尔比为1：0.2～0.7，优选：1：0.3～0.6。
[0031]本专利技术中，步骤3中所述水解在酸催化下进行。优选的，所述酸为硫酸、盐酸、硝酸、磷酸、醋酸中的至少一种。更优选的，所述酸选自醋酸与浓硫酸的1～2：2～1的混合物，最优选的，所述水解在醋酸：浓硫酸：水＝1:1:1(体积比)的体系中进行。
[0032]优选的，步骤3包括：将式C加入到酸中，升温到100～140℃搅拌反应，得到式D。
[0033]优选的，步骤3还包括后处理过程，即在反应结束后，用选自二氯甲烷、氯仿、乙酸乙酯的有机溶剂提取，合并提取液，干燥、减压浓缩，残余物重结晶，得到式D。
[0034]本专利技术中，步骤4的反应在有机碱存在下进行。优选的，所述有机碱选自三乙胺、吡啶中的至少一种。所述反应的有机溶剂选自卤代烃、醚、酮、酯、醇、乙腈中的至少一种。优选的，所述有机溶剂选自二氯甲烷、氯仿、乙醚、四氢呋喃、丙酮、乙酸乙酯、甲醇、乙醇、乙腈中的至少一种。
[0035]优选的，步骤4包括：将式D和4
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氯苯硫酚溶于有机溶剂中，加入有机碱，惰性气体保护下室温搅拌1～24h，得到式E。优选的，搅拌时间为6～15h。...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.10
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甲基
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9,10
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二氢化吖啶
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硫代羧酸4
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氯苯酯的合成方法，包括：步骤1:式A的9(10H)
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吖啶酮经甲基化反应生成式B的10
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甲基
‑9‑
吖啶酮；步骤2:式B与氰化试剂反应生成式C；步骤3:式C水解后生成式D；步骤4:式D与4
‑
氯苯硫酚反应生成式E；步骤5:式E转化为式F的10
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甲基
‑
9,10
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二氢化吖啶
‑9‑
硫代羧酸4
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氯苯酯。2.根据权利要求1所述的合成方法，其特征在于，步骤2中所述氰化试剂选自三甲基氰硅烷(TMSCN)；所述反应在碱催化下进行，所述碱选自氢化钠、甲醇钠、乙醇钠中的至少一种。3.根据权利要求2所述的合成方法，其特征在于，步骤2包括：将式B加入到有机溶剂中溶解，加入碱，缓慢加入氰化试剂，搅拌反应0.5～4.0h，得到式C。4.根据权利要求1所述的合成方法，其特征在于，步骤3中所述水解在酸催化下进行。5.根据权利要求1所述的合成方法，其特征在于，步骤4的反应在有机碱存在下进行。6.根据权利要求5所述的合成方法，其特征在于，步骤4包括：将式D和4

【专利技术属性】
技术研发人员：郭佳，
申请(专利权)人：北京礼为科技有限公司，
类型：发明
国别省市：