一种鼠抗林麝IgG单克隆抗体在林麝肺炎克雷伯氏菌抗体检测中的应用制造技术

本发明专利技术提供了一种鼠抗林麝IgG单克隆抗体在林麝肺炎克雷伯氏菌抗体检测中的应用，其能够解决现目前感染肺炎克雷伯氏菌的林麝病症不易外显从而导致难以检测的技术问题，本发明专利技术提供的林麝肺炎克雷伯氏菌抗体胶体金免疫层析试纸能够准确且高效的检测林麝体内是否存在肺炎克雷伯氏菌抗体，从而为林麝疾病的防治提供便利。提供便利。提供便利。

【技术实现步骤摘要】
一种鼠抗林麝IgG单克隆抗体在林麝肺炎克雷伯氏菌抗体检测中的应用


[0001]本专利技术属于试验设备
，具体公开了一种鼠抗林麝IgG单克隆抗体在林麝肺炎克雷伯氏菌抗体检测中的应用。

技术介绍

[0002]林麝(Moschus berezoviskii，FMD)，别名香獐、林獐、麝鹿等， 属偶蹄目、麝科、麝属，是我国重要的资源动物。然而，林麝疾病依 然是阻碍林麝养殖业规模化、产业化发展的关键因素。这主要是由于 对麝的一些疾病发生机制不甚了解，病原体和抗体的检测技术不够成 熟，防治手段过于有限，林麝病症不易外显等原因，导致繁殖成活率 偏低、群体死亡率高，其中致死率较高的有肺炎克雷伯氏菌。
[0003]肺炎克雷伯氏菌于动物而言是一种条件致病菌，可引起林麝出现急慢性肺炎、肝脓肿、胃肠炎等多种疾病，发病及死亡率极高，且不分季节，常年可感染。仔麝病程一般1
‑
5天，以死亡告终。

技术实现思路

[0004]本专利技术的第一目的在于提供一种鼠抗林麝IgG单克隆抗体在林麝肺炎克雷伯氏菌抗体检测中的应用，其能够解决现目前感染肺炎克雷伯氏菌的林麝病症不易外显从而导致难以检测的技术问题。
[0005]本专利技术的第二目的在于提供一种林麝肺炎克雷伯氏菌抗体的胶体金免疫层析试纸，该试纸能够准确且高效的检测林麝体内是否存在肺炎克雷伯氏菌抗体，从而为林麝疾病的防治提供便利。
[0006]本专利技术提供了一种鼠抗林麝IgG单克隆抗体在林麝肺炎克雷伯氏菌抗体检测中的应用，鼠抗林麝IgG单克隆抗体在制备检测林麝肺炎克雷伯氏菌抗体的仪器中的应用。
[0007]本专利技术还提供了一种林麝肺炎克雷伯氏菌抗体的胶体金免疫层析试纸，包括上述的鼠抗林麝IgG单克隆抗体。
[0008]与现有技术相比，本专利技术至少具有如下的优点与积极效果：
[0009]本专利技术提供了一种林麝肺炎克雷伯氏菌抗体的胶体金免疫层析试纸，其能够准确且高效的检测林麝体内是否存在肺炎克雷伯氏菌抗体，具有较好的敏感性以及重复性，解决现目前感染肺炎克雷伯氏菌的林麝病症不易外显从而导致难以检测的技术问题，从而为林麝疾病的防治提供便利。
附图说明
[0010]为了更清楚地说明本专利技术实施例的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，应当理解，以下附图仅示出了本专利技术的某些实施例，因此不应被看作是对范围的限定，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这
些附图获得其他相关的附图。
[0011]图1为本专利技术实施例中提供的林麝肺炎克雷伯氏菌抗体的胶体金免疫层析试纸的结构示意图；
[0012]图2为本专利技术实施例中提供的林麝肺炎克雷伯氏菌抗体的胶体金免疫层析试纸的敏感性检测结果示意图。
[0013]图标：100
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NC膜；101
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T线；102
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C线；2
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金标垫；3
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PVC板；4
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吸水纸；5
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样品垫。
具体实施方式
[0014]为使本专利技术实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。
[0015]需要说明的是，在不冲突的情况下，本申请中的实施例及实施例中的特征可以相互组合。下面将参考具体实施例来详细说明本专利技术。
[0016]本专利技术的实施例提供了一种鼠抗林麝IgG单克隆抗体在林麝肺炎克雷伯氏菌抗体检测中的应用，具体为上述鼠抗林麝IgG单克隆抗体在制备检测林麝肺炎克雷伯氏菌抗体的仪器中的应用。
[0017]本专利技术还提供了一种林麝肺炎克雷伯氏菌抗体的胶体金免疫层析试纸，包括上述鼠抗林麝IgG单克隆抗体。
[0018]上述试纸包括样品垫、金标垫、NC膜、吸水纸和PVC板，PVC板位于最底层，NC膜位于PVC板上并与PVC板连接，吸水纸位于NC膜的一侧并压住NC膜，金标垫位于NC膜的另一侧并压住NC膜，样品垫位于金标垫的一侧并压住金标垫，金标垫、吸水纸和样品垫均位于PVC板上并与 PVC板连接，NC膜的T线为鼠抗林麝IgG单克隆抗体，NC膜的C线为兔抗林麝肺炎克雷伯氏菌多克隆抗体。
[0019]上述金标垫的制备包括如下步骤：取金标垫粗品于PBST溶液内浸泡后 25
‑
35min后取出并烘干，得到预处理金标垫，将预处理金标垫放入金标蛋白溶液内浸泡25
‑
35min后取出并烘干，即得到金标垫；样品垫的制备包括如下步骤：取样品垫粗品于pH值为7.0
‑
7.5且浓度为0.01mol/L PBS溶液溶液内浸泡25
‑
35min后烘干，即得到样品垫；NC膜的制备包括如下步骤：取NC膜粗品于PBST溶液内浸泡25
‑
35min后取出并烘干，即得到NC膜。
[0020]上述金标蛋白溶液的制备包括如下步骤：取1mL的胶体金溶液与50 μL浓度为2.5
‑
3.5mg/mL的细菌蛋白混匀后得到混合液，向混合液中加入 10wt％的BSA溶液至BSA的终浓度为1wt％后于3
‑
5℃避光放置50
‑
70min 再于800
‑
1200rpm离心8
‑
12min取上清部分，得到初次上清液，将初次上清液于3
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5℃、10000
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14000rpm离心25
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35min取上清部分，得到二次上清液；用1wt％的BSA和1wt％的PEG 20000混合溶液重悬二次上清液至二次上清液体积的20％，即得到金标蛋白溶液。
[0021]上述PBS溶液、PBST溶液、10wt％的BSA溶液与1wt％的BSA和1 wt％的PEG 20000混合溶液在加入前还经过过滤，过滤用的滤膜孔径为0.22 μm。
[0022]上述胶体金溶液的制备包括如下步骤：向1wt％的氯金酸溶液中加入 2
‑
2.5mL的1wt％的柠檬酸三钠溶液并加热至颜色为酒红色后继续加热 5
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10min，停止加热，得到前处
理溶液，待前处理溶液冷却之后加入超纯水定容至100mL，得到粗品溶液，将粗品溶液质检合格后即得到胶体金溶液。
[0023]上述质检包括初次质检步骤，初次质检包括如下步骤：观察粗品溶液是否出现酒红色外的其他颜色或沉淀，若粗品溶液未出现酒红色外的其他颜色或沉淀，则粗品溶液合格。
[0024]上述质检还包括二次质检步骤：二次质检包括如下步骤，取初次质检后的粗品溶液于波长为400
‑
700nm测定吸光值的最高吸收峰是否为525
±
5 nm，若初次检测后的粗品溶液的吸光值的最高吸收本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种鼠抗林麝IgG单克隆抗体在林麝肺炎克雷伯氏菌抗体检测中的应用，其特征在于，所述鼠抗林麝IgG单克隆抗体在制备检测林麝肺炎克雷伯氏菌抗体的仪器中的应用。2.一种林麝肺炎克雷伯氏菌抗体胶体金免疫层析试纸，其特征在于，包括如权利要求1所述的鼠抗林麝IgG单克隆抗体。3.根据权利要求2所述的林麝肺炎克雷伯氏菌抗体的胶体金免疫层析试纸，其特征在于，包括样品垫、金标垫、NC膜、吸水纸和PVC板，所述PVC板位于最底层，所述NC膜位于所述PVC板上并与所述PVC板连接，所述吸水纸位于所述NC膜的一侧并压住所述NC膜，所述金标垫位于所述NC膜的另一侧并压住所述NC膜，所述样品垫位于所述金标垫的一侧并压住所述金标垫，所述金标垫、吸水纸和样品垫均位于所述PVC板上并与所述PVC板连接，所述NC膜的T线为鼠抗林麝IgG单克隆抗体，所述NC膜的C线为兔抗林麝肺炎克雷伯氏菌多克隆抗体。4.根据权利要求3所述的林麝肺炎克雷伯氏菌抗体的胶体金免疫层析试纸，其特征在于，所述金标垫的制备包括如下步骤：取金标垫粗品于PBST溶液内浸泡后25
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35min后取出并烘干，得到预处理金标垫，将所述预处理金标垫放入金标蛋白溶液内浸泡25
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35min后取出并烘干，即得到所述金标垫；所述样品垫的制备包括如下步骤：取样品垫粗品于pH值为7.0
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7.5且浓度为0.01mol/L PBS溶液内浸泡25
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35min后烘干，即得到所述样品垫；所述NC膜的制备包括如下步骤：取所述NC膜粗品于所述PBST溶液内浸泡25
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35min后取出并烘干，即得到所述NC膜。5.根据权利要求4所述的林麝肺炎克雷伯氏菌抗体的胶体金免疫层析试纸，其特征在于，所述金标蛋白溶液的制备包括如下步骤：取1mL的胶体金溶液与50μL浓度为2.5
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3.5mg/mL的细菌蛋白混匀后得到混合液，向所述混合液中加入10wt％的BSA溶液至所述BSA的终浓度为1wt％后于3
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5℃避光放置50
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60min再于800
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1200rpm离心8
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12min取上清部分，得到初次上清液...

【专利技术属性】
技术研发人员：罗燕，任梓薇，程建国，付文龙，周磊，吴杰，刘洁，
申请(专利权)人：四川农业大学，
类型：发明
国别省市：