一种利用AM真菌提高月季组培苗炼苗成活率的方法技术

本发明专利技术公开一种利用AM真菌提高月季组培苗炼苗成活率的方法。通过采集自然状态下生长健壮的月季根际土壤—分离AM菌根真菌—筛选出促植物根须生长较为显著的菌种—分离纯化后稀释接种到组培月季无菌基质上，得到月季丛枝菌根真菌菌剂基质介质，然后将其和长枝木霉菌、细黄链霉菌的微生物菌剂混合，并加入营养成分，搅拌混合后得栽培基质，将组培小苗移植到栽培基质中，提高了组培月季小苗炼苗的成活率，并且使得小苗对环境的抗逆性(耐旱性)、抗病性得到了显著的提升，对月季组培苗炼苗研究起到积极的意义。起到积极的意义。

【技术实现步骤摘要】
一种利用AM真菌提高月季组培苗炼苗成活率的方法


[0001]本专利技术属于植物繁育
，特别是一种利用菌根真菌提高月季组培苗炼苗成活率的方法。

技术介绍

[0002]月季别名长春花、月月红，为蔷薇科蔷薇属植物。中国是月季的原产地，经过世界育种家的长期选育，逐渐育成具有4万余品种月季。因花艳丽多彩、花形优美，有花中皇后的美誉。月季具有丛植、蔓性、微型等各种类型，既可作花境的花边、片植或丛植，也可以作地被、花架和盆花摆放，应用十分广泛。
[0003]月季品种更迭较快，但目前我国的月季繁育技术还是比较落后，主要以扦插和嫁接为主。扦插多以土壤为培养基，但是其存在扦插成活率低，起苗操作困难、易伤根系，扦插密度低造成管理成本高等诸多问题。嫁接受原材料限制较大，难以大量快速繁殖。在实际生产上，扦插和嫁接的成活率受到月季类型、品种、环境、技术等因素制约，对于新优月季品种的快速推广上，这些方法限制了月季新品种的繁育速度，不能快速满足市场的需求。
[0004]月季组织培养是简单、便捷、快速的繁育技术，可降低月季生产成本、提高生产速度与产品质量。其中在CN201611105030.4一种月季快速繁殖方法中，通过外植体的制备、外植体的消毒、诱导培养、增殖培养、生根培养过程中培养基的配方和激素配比以及培养过程中温湿度、光照的设置，移栽步骤及基质配比优化，提高月季的繁殖率，可以有效提高月季的繁殖速度实现月季的工厂化育苗，但操作复杂，且还需要加入大量激素等，不利于环境友好。CN201410650914.2一种微型月季组培的繁殖方法，通过精选茎段外植体和优化培养基的配方，结合光照等技术，得到一种增值系数和成活率高的微型月季组培方法，其中未额外关注炼苗环节的成活率。虽然目前利用组培技术扩繁月季新品种能有效提高繁殖系数和速度。但实际生产过程中，炼苗环节的成活率往往较不稳定。在“丛枝菌根真菌对切花月季和切花菊生长及温度胁迫耐受性的影响，孔佩佩”文章中研究了丛枝菌根真菌能够改善寄主植物矿质营养，促进生长发育，缓解干旱、盐碱和温度胁迫等多种逆境对植株造成的伤害，同时也能提高多种抗病虫害能力，筛选出透光球囊霉、幼套球囊霉这两种AMF是对切花月季生长的促进效果最好的菌种，根内球囊霉是对切花菊效果最佳的菌种。而在专利技术人的研究菌根真菌在月季组培苗炼实验中，含有的透光球囊霉、幼套球囊霉的栽培基质，对提高月季组培苗炼苗成活率，数据有提升空间。
[0005]因此，如何使AM真菌与月季根系形成互惠共生体，促进根系生长和营养元素吸收，缩短缓苗期和提高炼苗成活率，还需要进一步研究解决。

技术实现思路

[0006]针对
技术介绍
中的问题，本专利技术提供了一种利用AM真菌提高月季组培苗炼苗成活率的方法。解决了月季炼苗过程中成活率低的难题，为植株的存活、快速复壮和生长提供良好基础。
[0007]为了解决上述技术问题，本专利技术采用的技术方案为：
[0008]采用的技术路线为：采集自然状态下生长健壮的月季根际土壤，分离AM菌根真菌，筛选出促植物根须生长较为显著的菌种，分离纯化后稀释接种到组培月季无菌基质上，得到混合基质体系。
[0009](1)采集长势良好月季的根部土壤样品，从土壤中对AM真菌菌种的分离与纯化，进行扩繁培养，制备的月季丛枝菌根真菌菌剂。
[0010]具体为：采用湿筛法分离月季根际土壤中的丛枝菌根真菌的成熟孢子，得到丛枝菌根真菌孢子，将丛枝菌根真菌孢子接种到植物幼苗的根系上扩繁，盆苗在培养基质上生长3
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4个月，连根拔起，去掉植物地上部分，将根切碎成小段与根际培养基质混匀，得到丛枝菌根真菌菌剂。每10g丛枝菌根真菌菌剂中的孢子数大于300粒。
[0011]进一步为：根际培养基质是由河沙：草炭：珍珠岩：蛭石：稻壳质量比＝10～15：10～15：1～3：1～3：1～2混合得到。其中含有根际培养基质质量分数1
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2％的保水剂(如STOCKOSORB施可保保水剂)，将吸水后的保水剂混合在基质中。种植幼苗的种子在根际培养基质中每平方米用量25
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30粒。将根切碎成小段与根际培养基质混匀，其中根段质量占根际培养基质质量的4～12％。
[0012]进一步，月季根际AM菌为透光球囊霉、幼套球囊霉、摩西球囊霉中的一种或几种混合。优选透光球囊霉和幼套球囊霉混合使用。
[0013]所述植物幼苗为高粱或玉米。
[0014](2)先将月季丛枝菌根真菌菌剂和微生物菌剂按质量比100～120:0.5～1混合，混合均匀后得到栽培基质。
[0015]其中，经过大量实验筛选得到微生物菌剂由长枝木霉菌、细黄链霉菌按质量比8～10:1混合得到，与月季丛枝菌根真菌菌剂复配使用，显著提高月季炼苗过程中成活率，使得小苗对环境的抗逆性(耐旱性)、抗病性得到了显著的提升。可能是月季丛枝菌根真菌菌剂、长枝木霉菌和细黄链霉菌之间相互刺激产生新的分泌物，促进植物的生长以及提高植物抗病性。更加促进栽培基质中AM真菌和月季根系形成互惠共生体，促进根系生长和营养元素吸收，缩短缓苗期和提高炼苗成活率。
[0016]还可根据需要在栽培基质中加入营养物质成分。如硫酸镁、磷酸二氢钾、硫酸铵、磷酸二氢铵、硝酸钙、硝酸钾、酒石酸铁、硼砂、硫酸锰、硫酸锌、硫酸铜、钼酸钠、腐殖酸钠、碳酸钾、柠檬酸中两种以上物质混合得到，营养物质加入量为月季丛枝菌根真菌菌剂基质介质质量的0.1～3％。
[0017](3)月季组培：将剪取月季茎尖用自来水冲洗10min，用70wt.％酒精消毒30s，再用0.1wt.％生汞(滴入数滴吐温
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80)5min，无菌水冲洗3
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4次。将幼芽至培养基(1)上，培养7天左右，基部产生愈伤组织，顶芽开始生长
→
等芽苗长出5
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7片叶，将其切成带1
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2个叶片的茎段，转入培养基(2)进行继代培养。四周继代培养一次。
→
将继代增殖无根苗切成1.5cm茎段移植生根培养基(3)。
→
待根长1cm时，即可将其移栽到步骤(2)的栽培基质进行炼苗；
[0018]其中，芽分化培养基(1)：MS+BA0.75 mg/L+IAA0.25mg/L+NAA0.2mg/L+ZT0.1 mg/L+蔗糖5wt.％；
[0019]继代培养基(2)：MS+BA0.75 mg/L+IAA0.75 mg/L+NAA0.2 mg/L+ZT0.1 mg/L+蔗糖3wt.％。
[0020]生根培养基(3)：1/2MS+IAA1.0 mg/L+IAA0.75 mg/L+NAA0.1 mg/L+ZT0.1 mg/L。
[0021]上述培养基pH5.8，培养温度均为25℃，光照12h，光照度2000Lx。成分均是市售产品。
[0022](4)将组培小苗移植到到步骤(2)栽培基质中进行栽培，在温度为20～38℃，相对湿度为60％～99％条件进行培养。
[0023]与现有技术相本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种利用AM真菌提高月季组培苗炼苗成活率的方法，其特征在于：(1)采集长势良好月季的根部土壤，从土壤中对AM真菌菌种的分离与纯化，得到AM真菌孢子接种到植物幼苗的根系上扩繁培养，培养后连根拔起，去掉植物地上部分，将植物根切碎成小段与根际培养基质混匀，得到月季丛枝菌根真菌菌剂基质介质；(2)由长枝木霉菌、细黄链霉菌按质量比8～10:1混合得到微生物菌剂，将月季丛枝菌根真菌菌剂基质介质和微生物菌剂按质量比100～120:0.5～1混合，加入营养物质，混合均匀后得到栽培基质；(3)月季组培：将剪取月季茎尖作为芽苗，先进行预处理，处理进行初代培养、继代培养、生根培养，将生根后的月季小苗移栽到步骤(2)的栽培基质进行炼苗。2.根据权利要求1所述利用AM真菌提高月季组培苗炼苗成活率的方法，其特征在于：所述根际培养基质是由河沙：草炭：珍珠岩：蛭石：稻壳质量比＝10～15：10～15：1～3：1～3：1～2混合得到，并加入根际培养基质质量分数1
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2％的保水剂，将吸水后呈凝胶状保水剂混合在基质中。3.根据权利要求1所述利用AM真菌提高月季组培苗炼苗成活率的方法，其特征在于：所述AM真菌为透光球囊霉、幼套球囊霉、摩西球囊霉中的一种或几种混合；每10g月季丛枝菌根真菌菌剂基质介质中的AM真菌孢子数大于300粒。4.根据权利要求3所述利用AM真菌提高月季组培苗炼苗成活率的方法，其特征在于：所述AM真菌为透光球囊霉和幼套球囊霉混合使用。5.根据权利要求1所述利用AM真菌提高月季组培苗炼苗成活率的方法，其特征在于：营养物质为：硫酸镁、磷酸二氢钾、硫酸铵、硝酸钙、硝酸钾、硼砂、硫酸锰、硫酸...

【专利技术属性】
技术研发人员：赵卫华，
申请(专利权)人：赵卫华，
类型：发明
国别省市：