一种海带多糖提取物的制备方法技术

本发明专利技术属于多糖提取技术领域，公开了一种海带多糖提取物的制备方法。该方法包括对海带粉碎、碱洗、微波氧化、发酵、酶解以及纯化分离得到分子量为2000～20000Da的海带多糖提取物。通过采用双氧水与微波方式配合使用，不仅可以有效破坏稳定的糖苷键、破坏细胞壁结构以提高细胞壁纤维素的水解效率，而且反应条件温和、反应速率快，同时与生物发酵法协同使用，可以显著提高海带多糖的得率和纯度，具有良好的大规模工业化生产优势。大规模工业化生产优势。

【技术实现步骤摘要】
一种海带多糖提取物的制备方法


[0001]本专利技术属于多糖提取
，具体涉及一种海带多糖提取物的制备方法。

技术介绍

[0002]海带(Laminaria japomica)，别名昆布、江白菜，属于褐藻门、海带目、海带科、海带属，是一种药食同源的多年生的大型藻类，富含多种矿物元素以及生物活性成分。其中，有一种生物活性物质为海带多糖，其作为海带等褐藻所固有的细胞间多糖，存在于褐藻细胞壁基质中，是褐藻所特有的活性物质。多糖是所有生命有机体的重要组分，并在控制细胞分裂、调节细胞生长以及维持生命有机体正常代谢等方面具有重要作用。
[0003]目前，从海带浸提液中提取分离海洋生物活性多糖多采用热水浸提
‑
乙醇沉淀的方法(乙醇终浓度为50％～90％)，一方面，热水浸提的提取时间长、耗能大且多糖提取率低，另一方面，乙醇在常温常压下为易挥发有机溶剂，使用大量乙醇，不仅对生产工作人员的身体以及环境造成伤害，同时使用大量乙醇也给生产企业带来较大的经济负担，并且大量储存和使用乙醇会给安全生产带来较大隐患，增加了海带多糖的生产代价。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的是为了克服现有的乙醇沉淀法制备海带多糖生产成本高、环境污染大的技术问题，而提供一种新的海带多糖提取物的制备方法，该制备方法绿色、温和、高效且海带多糖得率高，是一种可适用于工业化生产的制备方法。
[0005]具体地，本专利技术的目的在于提供一种海带多糖提取物的制备方法，其中，该方法包括以下步骤：
[0006]S1、预处理
[0007]将海带除沙洗净晾干后进行粉碎过筛，得到海带粉；
[0008]S2、碱洗
[0009]将步骤S1中所得海带粉与4～8倍海带粉重量的碱饱和溶液于常温下进行充分搅拌I，接着进行离心I，收集离心后的海带残渣I；将离心后的海带残渣I与5～10倍海带残渣I重量的去离子水于室温下进行充分搅拌II，接着进行离心II，收集离心后的海带残渣II；
[0010]S3、微波氧化
[0011]将步骤S2中所得海带残渣II与5～10倍海带残渣II重量的去离子水、0.2％～2％海带残渣II重量的双氧水充分搅拌得到反应液；对所述反应液施加微波功率，得到海带多糖初提液；
[0012]S4、发酵
[0013]将益生菌接种于液体发酵培养基中进行发酵培养，得到海带多糖发酵粗产物；所述液体发酵培养基中含有3～6wt％步骤S3中所得海带多糖初提液；
[0014]S5、酶解
[0015]将步骤S4中所得海带多糖发酵粗产物进行蛋白酶水解，得到酶解后海带多糖粗产
物；
[0016]S6、纯化
[0017]将步骤S5中所得酶解后海带多糖粗产物进行透析、减压浓缩干燥得到2000～20000Da的海带多糖提取物。
[0018]在一种优选的实施方式中，步骤S2中，碱饱和溶液为碳酸氢钠、碳酸氢钾、氢氧化钠和氢氧化钾中的至少一种。
[0019]在一种优选的实施方式中，步骤S2中，搅拌I的条件包括搅拌时间为20～40min，离心I的条件包括离心转速为5000～20000rpm，离心时间为10～20min。
[0020]在一种优选的实施方式中，步骤S2中，搅拌II的条件包括搅拌时间为20～40min，离心II的条件包括离心转速为5000～20000rpm，离心时间为10～20min。
[0021]在一种优选的实施方式中，步骤S3中，所述微波功率施加方式为连续微波和/或脉冲微波，施加时间为20min～60min。
[0022]在一种优选的实施方式中，步骤S4中，所述发酵培养的条件包括为益生菌的接种量为3％～8％，发酵温度为30～40℃，发酵过程中，转速为100～300rpm，不通气培养10～20h，pH降至4.0～4.5，发酵结束。
[0023]在一种优选的实施方式中，步骤S4中，所述益生菌为黑曲霉、枯草芽孢杆菌、嗜麦芽窄食单胞菌、乳酸菌和酵母菌中的至少一种。
[0024]在一种优选的实施方式中，步骤S5中，所述蛋白酶为木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、酸性蛋白酶、菠萝蛋白酶和风味蛋白酶中的至少一种。
[0025]在一种优选的实施方式中，步骤S5中，所述酶解的条件包括酶解时间为0.5～2h，酶解温度为30～40℃。
[0026]在一种优选的实施方式中，步骤S6中，所述透析的条件包括超滤和渗滤并回收渗透物，再将渗透物进行纳米过滤并回收渗余物，透析次数为5～8次，透析时间为2～3h/次。
[0027]本专利技术的关键在于将微波氧化
‑
发酵偶联法用于提取海带中的海带多糖，双氧水是一种绿色环保的氧化剂，将其配以微波使用不仅可以有效破坏稳定的糖苷键、破坏细胞壁结构以提高细胞壁纤维素的水解效率，而且反应条件温和、反应速率快，同时与生物发酵法协同使用，可以显著提高海带多糖的得率和纯度，具有良好的大规模工业化生产优势。
具体实施方式
[0028]以下将通过实施例对本专利技术进行详细描述。
[0029]需要说明的是，本专利技术所涉及到的原材料均可以在市面上购买，其中，海带购自福建省厦门市集美区嘉庚农贸市场。
[0030]本专利技术提供了一种海带多糖提取物的制备方法，其中，该方法包括以下步骤：
[0031]S1、预处理
[0032]将海带除沙洗净晾干后进行粉碎过筛，得到海带粉；优选地，采用粉碎机对海带进行粉碎，并采用筛选机对所得海带粉进行筛选，为了提高提取效率，筛选出的海带粉粒径大小可以为20～60目，具体地，粒径大小可以为20目、30目、40目、50目、60目以及它们之间的任意值。
[0033]S2、碱洗
[0034]将步骤S1中所得海带粉与4～8倍海带粉重量的碱饱和溶液于常温下进行充分搅拌I，接着进行离心I，收集离心后的海带残渣I；将离心后的海带残渣I与5～10倍海带残渣I重量的去离子水于室温下进行充分搅拌II，接着进行离心II，收集离心后的海带残渣II；
[0035]需要说明的是，在本专利技术中，为了便于描述，将碱洗处理过程中的两次搅拌称为“搅拌I”和“搅拌II”、两次离心称为“离心I”和“离心II”以及两次所得产物称为“海带残渣I”和“海带残渣II”的目的仅是为了区别不同对象，而不能理解为指示或暗示其的相对重要性。
[0036]步骤S2中，碱饱和溶液为碳酸氢钠、碳酸氢钾、氢氧化钠和氢氧化钾中的至少一种。优选为碳酸氢钠和/或碳酸轻钾。步骤S2中，搅拌I的条件包括搅拌时间可以为20～40min，例如20min、30min、40min。离心I的条件包括离心转速可以为5000～20000rpm，例如5000rpm、10000rpm、15000rpm、20000rpm。离心时间为10～20min，例如10min、15min、20min。步骤S2中，搅拌II的条件包括搅拌时间为20～40min，例如20min、30min、40min。离心II的条件包括离心转速为5000～2本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种海带多糖提取物的制备方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：S1、预处理将海带除沙洗净晾干后进行粉碎过筛，得到海带粉；S2、碱洗将步骤S1中所得海带粉与4～8倍海带粉重量的碱饱和溶液于常温下进行充分搅拌I，接着进行离心I，收集离心后的海带残渣I；将离心后的海带残渣I与5～10倍海带残渣I重量的去离子水于室温下进行充分搅拌II，接着进行离心II，收集离心后的海带残渣II；S3、微波氧化将步骤S2中所得海带残渣II与5～10倍海带残渣II重量的去离子水、0.2％～2％海带残渣II重量的双氧水充分搅拌得到反应液；对所述反应液施加微波功率，得到海带多糖初提液；S4、发酵将益生菌接种于液体发酵培养基中进行发酵培养，得到海带多糖发酵粗产物；所述液体发酵培养基中含有3～6wt％步骤S3中所得海带多糖初提液；S5、酶解将步骤S4中所得海带多糖发酵粗产物进行蛋白酶水解，得到酶解后海带多糖粗产物；S6、纯化将步骤S5中所得酶解后海带多糖粗产物进行透析、减压浓缩干燥得到2000～20000Da的海带多糖提取物。2.根据权利要求1所述海带多糖提取物的制备方法，其特征在于，步骤S2中，碱饱和溶液为碳酸氢钠、碳酸氢钾、氢氧化钠和氢氧化钾中的至少一种。3.根据权利要求1所述海带多糖提取物的制备方法，其特征在于，步骤S2中，搅拌I的条件包括搅拌时间为20～40min，离心I的条件包括离心转速为5000～20000rpm，离心时间为10～20min。4.根据权利要...

【专利技术属性】
技术研发人员：伍郑洋，谢欣宇，肖德馨，黄婉雯，陈婉婷，郭梓莹，夏乙莎，温心怡，
申请(专利权)人：集美大学，
类型：发明
国别省市：