一种肾后性急性肾损伤动物模型的构建方法技术

本发明专利技术提供了一种肾后性急性肾损伤动物模型的构建方法，属于实验动物模型技术领域。本发明专利技术提供的肾后性急性肾损伤动物模型的构建方法，包括如下步骤：将动物麻醉，插入导尿管，对导尿管开口处进行封闭处理，当实验动物符合急性肾损伤评判标准时，移除导尿管。本发明专利技术方法在不损伤实验动物正常生理结构的情况下使尿路完全阻塞/梗阻，解除阻塞/梗阻后应具有良好的预后且与临床下尿路阻塞发病和治疗后的情况一致，具有简便、建模时间短、可靠、稳定的优势。定的优势。定的优势。

【技术实现步骤摘要】
一种肾后性急性肾损伤动物模型的构建方法


[0001]本专利技术属于实验动物模型
，尤其涉及一种肾后性急性肾损伤动物模型的构建方法。

技术介绍

[0002]急性肾损伤(Acute Kidney Injury，AKI)在人和动物群体中都具有高发病率和死亡率，患病动物死亡率约占总体的50％，并且与肾损伤的严重程度紧密相关，其治疗结果高度依赖于病因和可用的治疗方法。传统的急性肾损伤检测金标准是血清肌酐(serum creatinine，SCr)，但许多研究指出肌酐检测在时间上具有滞后性，只有当肾脏损伤大部分时才会显著表达，这时肾功能已经损伤超过50％甚至功能衰竭。肌酐检测方法在宠物临床中往往不能及时发现急性肾损伤，延误了治疗的最佳时期，从而造成不可逆转的肾损伤甚至导致死亡，可见血清肌酐不是肾损伤的标志物，而是肾功能的标志物。
[0003]人肾后性急性肾损伤在临床上相对少见，肾后性急性肾损伤未能得到肾病领域技术人员的广泛关注，相关的动物模型构建方法也较单一。而此病在动物中发病较多，尤其是猫，猫急性肾损伤在临床上是常见病症，尤其是尿闭引起的肾后性AKI。肾脏是保持机体体液和酸、碱及电解质平衡的重要器官，通过排尿将机体内废物排出，以免废物滞留引起机体伤害。但临床调查研究发现，由于猫生理和环境饮食等多种原因常引起尿闭，致使尿液潴留体内，体液倒流入肾，造成急性肾损伤，这给宠物及其主人带来了很大的困扰。但是目前本领域针对猫急性肾损伤的文献资料有限，尤其是猫肾后性急性肾损伤的研究更少。急性肾损伤是一种复杂内科病，为了阐明急性肾损伤的发病机制，现有技术根据不同病因建立了不同方案的动物模型，而肾后性急性肾损伤动物模型建立方案目前只有输尿管梗阻，但此方案造模时需要对动物进行开腹手术，且多数为单侧肾脏造模，极易导致肾脏出现纤维化样病变引发慢性肾病，这与临床病例急性肾损伤的发病机制相差较大。所以提供一种在不损伤实验动物正常生理结构的情况下使尿路完全阻塞/梗阻，确保解除阻塞/梗阻后应具有良好的预后且与临床下尿路阻塞发病和治疗后的情况一致的肾后性急性肾损伤模型构建方法，是本领域亟需解决的技术难题。

技术实现思路

[0004]有鉴于此，本专利技术的目的在于提供一种在不损伤实验动物正常生理结构的情况下使尿路完全阻塞/梗阻，解除阻塞/梗阻后应具有良好的预后且与临床下尿路阻塞发病和治疗后的情况一致的肾后性急性肾损伤模型构建方法，具有简便、建模时间短、可靠、稳定的优势。
[0005]为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供了以下技术方案：
[0006]本专利技术提供了一种肾后性急性肾损伤动物模型的构建方法，包括如下步骤：将动物麻醉，插入导尿管，对导尿管开口处进行封闭处理，当实验动物符合急性肾损伤评判标准时，移除导尿管。
[0007]优选的，所述动物为雄性动物。
[0008]优选的，所述动物包括猫、犬、鼠。
[0009]优选的，动物麻醉前需禁食6
‑
12h。
[0010]优选的，所述急性肾损伤评判标准采用IRIS急性肾损伤分级标准。
[0011]优选的，当实验动物的急性肾损伤分级达到IRIS急性肾损伤3级时，移除导尿管。
[0012]优选的，所述IRIS急性肾损伤3级时血肌酐浓度为2.6
‑
5.0mg/dL。
[0013]本专利技术还提供了一种上述方法构建所得的肾后性急性肾损伤动物模型在筛选急性肾损伤防治药物中的应用。
[0014]本专利技术的有益效果：
[0015]本专利技术采用物理阻塞的方法建立肾后性急性肾损伤动物模型，实验方案立足于临床，本专利技术建立的急性肾损伤动物模型与临床下尿路阻塞/梗阻的患病动物发生急性肾损伤的机制的契合度更高，有效避免了药物和手术等因素对实验结果造成的干扰，为肾后性急性肾损伤的病理生理机制研究提供快捷简便的实验方案和稳定的动物实验基础。采用本专利技术方法24h便可成功构建获得肾后性急性肾损伤动物模型，在不损伤实验动物正常生理结构的情况下使尿路完全阻塞/梗阻，解除阻塞/梗阻后应具有良好的预后且与临床下尿路阻塞发病和治疗后的情况一致，为肾后性急性肾损伤的早期诊断和治疗提供了一种简单、安全、成功率高、稳定的肾后性急性肾损伤动物模型。
附图说明
[0016]图1为肾组织病理学观察结果，其中A(HE5
×
)、B(HE10
×
)、C(HE20
×
)为造模前肾脏病理组织学结果；D(HE5
×
)、E(HE10
×
)、F(HE20
×
)为SCr浓度Ⅲ级AKI时肾脏病理组织学结果。
具体实施方式
[0017]本专利技术提供了一种肾后性急性肾损伤动物模型的构建方法，包括如下步骤：将动物麻醉，插入导尿管，对导尿管开口处进行封闭处理，当实验动物符合急性肾损伤评判标准时，移除导尿管。
[0018]在本专利技术中，所述动物优选为雄性动物，所述动物的种类优选为包括猫、犬、鼠。本专利技术对于所述动物的具体来源没有特殊限定。本专利技术将动物麻醉前优选的需禁食6
‑
12h，本专利技术对于麻醉的具体方法没有特殊限定，在本专利技术具体实施例中，采用布托啡诺和丙泊酚进行麻醉，麻醉处理后，优选的用加热垫维持体温。
[0019]本专利技术对于导尿管的具体来源没有特殊限定，采用本领域常规市售导尿管均可。本专利技术对于导尿管开口处封闭处理的具体封闭方式没有特殊限定，对导尿管开口处进行封闭处理，能够造成急性下泌尿道梗阻，同时也便于采集尿液。在本专利技术中，所述急性肾损伤评判标准优选的采用IRIS急性肾损伤分级标准，所述IRIS急性肾损伤分级标准具体如表1所示。
[0020]表1IRIS急性肾损伤分级标准
[0021][0022][0023]*输液治疗有反应是指6h内尿液生成量超过1mL/kg/h，和/或48h后血肌酐下降至基线值；各分级根据是否出现少尿或无尿症状进一步分为两个亚级，若出现少尿或无尿症状则提示需要肾脏替代疗法。
[0024]在本专利技术中，当实验动物的急性肾损伤分级优选的达到IRIS急性肾损伤3级时，移除导尿管，解除尿路阻塞，尽量避免出现严重的临床症状或不可逆的肾脏损伤。由表1可以看出，所述IRIS急性肾损伤3级时血肌酐浓度为2.6
‑
5.0mg/dL。
[0025]本专利技术还提供了一种上述方法构建所得的肾后性急性肾损伤动物模型在筛选急性肾损伤防治药物中的应用。
[0026]下面结合实施例对本专利技术提供的技术方案进行详细的说明，但是不能把它们理解为对本专利技术保护范围的限定。
[0027]实施例1
[0028]选择未去势的健康公猫12只，年龄为2～4岁，体重3.4
±
0.3kg，进行常规的免疫及驱虫，分组饲养，2～3只猫一笼，饲养4周。待其适应环境后开始实验，整个实验过程中饲养
管理条件保持一致，实验猫在实验期间可自由采食、饮水，避免应激。实验前进行临床检查，保证良好的本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种肾后性急性肾损伤动物模型的构建方法，其特征在于，包括如下步骤：将动物麻醉，插入导尿管，对导尿管开口处进行封闭处理，当实验动物符合急性肾损伤评判标准时，移除导尿管。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述动物为雄性动物。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述动物包括猫、犬、鼠。4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，动物麻醉前需禁食6
‑
12h。5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所...

【专利技术属性】
技术研发人员：郑家三，李玉丹，武瑞，王峥，罗春海，孙悦，杨春雪，
申请(专利权)人：黑龙江八一农垦大学，
类型：发明
国别省市：