CD37基因人源化非人动物的构建方法及应用技术

本发明专利技术提供了一种人源化CD37蛋白、一种人源化CD37基因、一种CD37基因的靶向载体、一种CD37基因人源化的非人动物及其构建方法和其在生物医药领域的应用，利用同源重组的方式将编码人CD37蛋白的核苷酸序列导入非人动物基因组中，该动物体内能正常表达人或人源化CD37蛋白，可以作为人CD37信号机理研究、肿瘤及自身免疫性疾病药物筛选的动物模型，对免疫靶点的新药研发具有重要的应用价值。的新药研发具有重要的应用价值。的新药研发具有重要的应用价值。

【技术实现步骤摘要】
CD37基因人源化非人动物的构建方法及应用


[0001]本专利技术属于动物基因工程和基因遗传修饰领域，具体地说，涉及一种CD37基因改造非人动物模型的构建方法及其在生物医药领域的应用。

技术介绍

[0002]CD37，也称为GP52
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40、四跨膜蛋白
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26(tetraspanin
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26))，属于四次跨膜(TM4SF)蛋白家族成员之一，几乎只在免疫系统的细胞中表达，尤其是B细胞(前B到周围成熟B细胞阶段，浆细胞上不表达)，在T细胞、巨噬细胞/单核细胞、粒细胞和树突状细胞中较低水平的表达，参与细胞膜组织和协同信号传导。在小鼠体内，CD37基因纯合突变会导致IgG1免疫球蛋白水平降低，对T细胞依赖抗原的抗体反应受损。CD37敲除的老年小鼠由于在IL6/STAT3(白介素6/信号传导子及转录激活子3)通路失去CD37介导的负反馈而发展成B细胞淋巴瘤。研究发现，CD37在大多数B细胞恶性肿瘤上广泛表达，包括慢性淋巴细胞白血病(chronic lymphocytic leukemia,CLL)和非本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种人源化CD37蛋白，其特征在于，所述的人源化CD37蛋白包含人CD37蛋白的部分。2.根据权利要求1所述的人源化CD37蛋白，其特征在于，所述的人源化CD37蛋白包含人CD37蛋白的胞外区、跨膜区和/或胞质区的全部或部分，优选的，所述的人CD37蛋白的部分包含人CD37蛋白的胞外区的全部或部分，进一步优选的，包含人CD37蛋白胞外区至少20个氨基酸，更优选包含SEQ ID NO：2第39
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59、112
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241位所示氨基酸序列；或者，包含与SEQ ID NO：2第39
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59、112
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241位所示氨基酸序列同一性至少为90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或至少99％；或者，包含与SEQ ID NO：2第39
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59、112
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241位所示氨基酸序列差异不超过10、9、8、7、6、5、4、3、2或不超过1个氨基酸；或者，包含与SEQ ID NO：2第39
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59、112
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241位所示的，包括取代、缺失和/或插入一个或多个氨基酸残基的氨基酸序列。3.根据权利要求1或2所述的人源化CD37蛋白，其特征在于，所述的人源化CD37蛋白还包含人CD37蛋白跨膜区的全部或部分，优选的，所述的人源化CD37蛋白包含至少10个氨基酸的人CD37蛋白跨膜区，进一步优选的，包含与SEQ ID NO:2的第27
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38、60
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74、86
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111、242
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266位具有至少70％、75％、80％、85％、90％、95％或至少99％同一性的氨基酸序列或者包含SEQ ID NO:2的第27
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38、60
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74、86
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111、242
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266位所示氨基酸序列；和/或，所述的人源化CD37蛋白还包含人CD37蛋白胞质区的全部或部分，优选的，所述的人源化CD37蛋白包含至少5个氨基酸的人CD37蛋白胞质区，进一步优选的，包含与SEQ ID NO:2的第75
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85、267
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281位具有至少70％、75％、80％、85％、90％、95％或至少99％同一性的氨基酸序列或者包含SEQ ID NO:2的第75
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85、267
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281位所示氨基酸序列。4.根据权利要求1
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3任一所述的人源化CD37蛋白，其特征在于，所述的人CD37蛋白包含SEQ ID NO：2第27
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281位所示氨基酸序列；或者，包含与SEQ ID NO：2第27
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281位所示氨基酸序列同一性至少为90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或至少99％；或者，包含与SEQ ID NO：2第27
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281位所示氨基酸序列差异不超过10、9、8、7、6、5、4、3、2或不超过1个氨基酸；或者，包含与SEQ ID NO：2第27
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281位所示的，包括取代、缺失和/或插入一个或多个氨基酸残基的氨基酸序列。5.根据权利要求1
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4任一所述的人源化CD37蛋白，其特征在于，所述的人源化CD37蛋白还包含非人动物CD37蛋白的部分，优选的，所述的非人动物CD37蛋白的部分包含非人动物CD37蛋白的跨膜区的部分和胞质区的部分。6.根据权利要求1
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5任一所述的人源化CD37蛋白，其特征在于，所述的人源化CD37蛋白的氨基酸序列包含下列组中的任一种：A)SEQ ID NO：9所示氨基酸序列；B)与SEQ ID NO：9所示氨基酸序列同一性至少为85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或至少99％；C)与SEQ ID NO：9所示氨基酸序列差异不超过10、9、8、7、6、5、4、3、2或不超过1个氨基酸；或D)与SEQ ID NO：9所示的，包括取代、缺失和/或插入一个或多个氨基酸残基的氨基酸序列。7.一种编码权利要求1
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6任一项所述人源化CD37蛋白的核酸。8.一种人源化CD37基因，其特征在于，所述的人源化CD37基因包含人CD37基因的部分。9.根据权利要求8所述的人源化CD37基因，其特征在于，所述的人CD37基因的部分包含
人CD37基因的1号外显子至8号外显子的全部或部分，优选包含2号外显子至8号外显子的全部或部分，进一步优选包含2号外显子的部分、3号至7号外显子的全部和8号外显子的部分，其中2号外显子的部分至少包含20bp的核苷酸序列，8号外显子的部分至少包含50bp的核苷酸序列。10.根据权利要求8或9所述的人源化CD37基因，其特征在于，所述的人CD37基因的部分包含SEQ ID NO：5所示的核苷酸序列；或者，包含与SEQ ID NO：5所示的核苷酸序列的同一性至少为90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或至少99％；或者，包含与SEQ ID NO：5所示的核苷酸序列差异不超过10、9、8、7、6、5、4、3、2或不超过1个核苷酸；或者，包含具有SEQ ID NO：5所示的核苷酸序列所示的，包括取代、缺失和/或插入一个或多个核苷酸的核苷酸序列。11.根据权利要求8
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10任一所述的人源化CD37基因，其特征在于，所述的人源化CD37基因包含非人动物CD37基因的1号外显子和/或8号外显子的全部或部分，更进一步优选还包含部分2号外显子的核苷酸序列。12.根据权利要求8
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11任一所述的人源化CD37基因，其特征在于，所述的人源化CD37基因的核苷酸序列包含下列组中的任一种：A)转录的mRNA为SEQ ID NO：8所示核苷酸序列；B)转录的mRNA与SEQ ID NO：8所示核苷酸序列的同一性至少为85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或至少99％；C)转录的mRNA与SEQ ID NO：8所示核苷酸序列差异不超过10、9、8、7、6、5、4、3、2或不超过1个核苷酸；D)转录的mRNA具有SEQ ID NO：8所示核苷酸序列的，包括取代、缺失和/或插入一个或多个核苷酸的核苷酸序列；或，E)SEQ ID NO：6和/或7所示的核苷酸序列。13.一种靶向载体，其特征在于，所述的靶向载体包含供体核苷酸序列，优选的，所述的供体核苷酸序列包含下列组中的一种：A)编码人或人源化CD37蛋白的核苷酸序列的全部或部分；B)编码人CD37蛋白的胞外区、跨膜区和/或胞质区的全部或部分核苷酸序列，优选编码人CD37蛋白的胞外区至少20个氨基酸的核苷酸序列，进一步优选的，还包含编码人CD37蛋白的跨膜区至少10个氨基酸的核苷酸序列，更优选的，还包含编码人CD37蛋白的胞质区至少5个氨基酸的核苷酸序列，更进一步优选的，编码SEQ ID NO：2第27

【专利技术属性】
技术研发人员：李志霞，尚诚彰，聂琰晖，
申请(专利权)人：百奥赛图北京医药科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：