一种超氧化物歧化酶嵌入硫化锰纳米药物及其制备方法与应用技术

本发明专利技术公开了一种超氧化物歧化酶嵌入硫化锰纳米药物及其制备方法与应用，药物以超氧化物歧化酶作为有机部分，并以Mn

【技术实现步骤摘要】
一种超氧化物歧化酶嵌入硫化锰纳米药物及其制备方法与应用


[0001]本专利技术属于帕金森疾病药物
，具体地，尤其涉及一种超氧化物歧化酶嵌入硫化锰纳米药物及其制备方法与应用。

技术介绍

[0002]超氧化物歧化酶(SOD)在炎症治疗以及组织工程材料领域广泛应用，酶固定化技术越来越受到人们越来越多的关注。近些年发展的超氧化歧化酶抗炎中仍然存在问题，如：1.体内易降解；2.酶催化剂醇耐受性较差。
[0003]目前发展的主要固定化酶技术包括“诱捕”和“单酶纳米粒子”技术，虽然这些固定化酶相比于游离酶具有更高的稳定性，但是他们的活性往往都会降低很多，这主要有以下原因：
[0004]1)固定化过程中有机溶剂的使用；
[0005]2)固定材料与蛋白质之间发生的化学反应；
[0006]3)酶与固定化材料之间的明显传质。

技术实现思路

[0007]本专利技术的目的在于通过绿色高效的仿生矿化方式合成纳米杂化材料SOD@MnS，该材料显著提高SOD酶环境耐受性，提高SOD酶活性，能够通过清除自由基实现帕金森疾病的治疗。其技术方案如下：
[0008]本专利技术一方面提供了一种超氧化物歧化酶嵌入硫化锰纳米药物，以超氧化物歧化酶作为有机部分，并以Mn
2+
和S2‑
作为无机部分。
[0009]本专利技术另一方面提供了一种超氧化物歧化酶嵌入硫化锰纳米药物的制备方法，包括以下步骤：
[0010]S1：将MnCl2的溶液加入到溶有超氧化物歧化酶的超氧化物歧化酶去离子水分散液中，搅拌均匀；
[0011]S2：加入Na2S溶液孵育，孵育后离心分离；
[0012]S3：将分离后的产物用去离子水清洗，冻干后储存。
[0013]进一步地，所述超氧化物歧化酶与MnCl2质量比为1:0.075
‑
3，所述超氧化物歧化酶与Na2S质量比为1:0.007
‑
2.8。
[0014]进一步地，MnCl2溶液的浓度为30
‑
120mM，Na2S溶液浓度为30
‑
120mM。
[0015]予以说明，在本专利技术的一个实施例中，MnCl2的溶液取0.1
‑
1mL，加入到溶有5
‑
50mg超氧化物歧化酶的10
‑
100mL去离子水中；
[0016]浓度为30
‑
120mM的Na2S溶液取0.15
‑
1.5mL。
[0017]进一步地，所述S1中，搅拌时间为5
‑
30min。
[0018]进一步地，所述S1中，孵育温度为3
‑
5℃，孵育时间为20
‑
30h。
[0019]进一步地，所述S3中，冻干后储存的温度为
‑
15℃
‑‑
20℃。
[0020]在另一方面，本专利技术还提供了该无机
‑
有机杂化纳米药物在制备缓解帕金森疾病药物中的应用。
[0021]与现有的技术相比，本专利技术具有以下显著优点：
[0022]本技术方案利用仿生矿化技术以超氧化物歧化酶(SOD)作为有机部分，Mn
2+
和S2‑
作为无机部分合成的SOD@MnS杂化纳米材料在保留SOD活性方面获得了很大的成功，主要因为这种技术合成环境完全绿色(水溶液)。
[0023]相比与超氧化物歧化酶(SOD):
[0024]通过该种仿生矿化的SOD@MnS材料具有明显的优于游离SOD的酶活性，温度、pH和离子环境稳定性。在生物体内稳定而不易降解，对催化剂醇具有更好的耐受性。
[0025]通过该种仿生矿化的SOD@MnS材料由于其更优的酶活性和稳定性，在治疗氧化损伤引起的帕金森疾病小鼠模型方面具有明显优于游离SOD酶的效果。
[0026]生产过程中，无需固定材料,有助于产物保留更佳的生物活性。
附图说明
[0027]图1是本专利技术小鼠分组实验部分操作图。
[0028]图2是本专利技术的SOD
‑
无机杂化纳米药物活性测定数据结果图。
[0029]图3是本专利技术的水迷宫实验结果图。
[0030]图4是本专利技术中免疫组化分析通过荧光显微镜对组织切片的观察图。
[0031]图5是本专利技术的SOD@MnS的电镜图，表征其形貌。
具体实施方式
[0032]为使本专利技术实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。
[0033]以下结合图1
‑
5说明本专利技术的技术方案，本专利技术提供了一种超氧化物歧化酶嵌入硫化锰纳米药物SOD@MnS，该药物以超氧化物歧化酶作为有机部分,并以Mn
2+
和S2‑
作为无机部分。此药物的合成方法如下：
[0034]将浓度为30
‑
120mM的MnCl2的溶液取0.1
‑
1mL，加入到溶有5
‑
50mg超氧化物歧化酶的10
‑
100mL去离子水中，搅拌5
‑
30min；
[0035]加入0.15
‑
1.5mL Na2S(浓度为30
‑
120mM)在4℃下孵育24h，离心分离；
[0036]将分离后的产物用去离子水清洗三次，冻干后于
‑
20℃下储存；
[0037]在上述纳米药物的制备过程中，蛋白质与Mn
2+
之间的配位作用是无机纳米花催化剂形成的主要驱动力。
[0038]实施例一：
[0039]将浓度为30mM的MnCl2的溶液取1mL，加入到溶有5mg超氧化物歧化酶的100mL去离子水中，搅拌5min；
[0040]加入0.15mL Na2S(浓度为120mM)在3℃下孵育20h，离心分离；
[0041]将分离后的产物用去离子水清洗二次，冻干后于
‑
25℃下储存。
[0042]实施例二：
[0043]将浓度为30mM的MnCl2的溶液取0.1mL，加入到溶有50mg超氧化物歧化酶的100mL去离子水中，搅拌30min；
[0044]加入0.15mL Na2S(浓度为30mM)在4℃下孵育24h，离心分离；
[0045]将分离后的产物用去离子水清洗三次，冻干后于
‑
20℃下储存。
[0046]实施例三：
[0047]将浓度为120mM的MnCl2的溶液取1mL，加入到溶有5mg超氧化物歧化酶的10mL去离子水中，搅拌30min；
[0048]加入1.5mL Na2S本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种超氧化物歧化酶嵌入硫化锰纳米药物，其特征在于：所述药物为无机
‑
有机杂化纳米药物，且以超氧化物歧化酶作为有机部分，并以Mn
2+
和S2‑
作为无机部分。2.一种超氧化物歧化酶嵌入硫化锰纳米药物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：S1：将MnCl2的溶液加入到溶有超氧化物歧化酶的超氧化物歧化酶去离子水分散液中，搅拌均匀；S2：加入Na2S溶液孵育，孵育后离心分离；S3：将分离后的产物用去离子水清洗，冻干后储存。3.根据权利要求2所述的一种超氧化物歧化酶嵌入硫化锰纳米药物的制备方法，其特征在于：所述超氧化物歧化酶与MnCl2质量比为1:0.075
‑
3，所述超氧化物歧化酶与Na2S质量比为1:0.09
‑
4.5。4.根据权利要求2所述的一种超氧化物歧化酶嵌入硫化锰纳米...

【专利技术属性】
技术研发人员：姜伟，李青，刘影，
申请(专利权)人：李青，
类型：发明
国别省市：