一种抗磷脂抗体检测试剂盒及其在系统性红斑狼疮肾炎检测中的应用技术方案

本发明专利技术属于免疫性疾病的快速检测领域，具体涉及一种抗磷脂抗体检测试剂盒及其在系统性红斑狼疮肾炎检测中的应用。本发明专利技术通过将anti

【技术实现步骤摘要】
一种抗磷脂抗体检测试剂盒及其在系统性红斑狼疮肾炎检测中的应用


[0001]本专利技术属于免疫性疾病的快速检测领域，具体涉及一种抗磷脂抗体检测试剂盒及其在系统性红斑狼疮肾炎检测中的应用。

技术介绍

[0002]系统性红斑狼疮(SLE)是影响多个系统和脏器的自身免疫性疾病，SLE患者在疾病发展过程中其外周血存在多种自身抗体(包括抗磷脂抗体)的升高。临床上检测SLE患者中的抗磷脂抗体(aPL)包括针对β2
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糖蛋白I(β2GPI)、心磷脂和凝血酶原的自身抗体，这些自身抗体参与血栓形成、妊娠并发症和神经系统损伤。目前基于狼疮肾炎和原发性抗磷脂综合征病人队列研究发现，抗磷脂抗体水平与肾脏的微血管病变，微血栓形成和局灶性病变密切相关，提示抗磷脂抗体参与了肾脏靶器官的损伤进程，然而抗磷脂抗体是否参与SLE进程和促进肾脏靶器官损伤的机制尚不清楚。
[0003]由肾脏免疫复合物沉积和淋巴细胞浸润引起的狼疮性肾炎(LN)是SLE患者最严重的临床症状，直接导致将近50％的SLE患者的死亡。目前狼疮肾炎的诊断金标准是对肾穿组织的活检分析，通过对肾小球进行组化染色，免疫复合物染色和电镜观察，评估肾小球的损伤程度，属于有创性诊断手段。而在狼疮病人临床指标中，常规检测的抗双链DNA自身抗体(anti
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dsDNA IgG)水平虽然有助于诊断系统性红斑狼疮的发病，但仍不足以诊断和评估狼疮肾炎的进程。
[0004]因此，迫切需要与临床指标相关性更好的检测指标辅助进行狼疮肾炎的早期诊断，以预测患者的肾损伤。然而目前除了基于肾脏功能的分析(如血肌酐，血尿素氮，蛋白尿，eGFR等指标)以及对肾穿组织的活检分析外，尚缺乏直接诊断狼疮肾炎的相关指标。
[0005]现有临床研究表明常规抗磷脂抗体引起的肾脏疾病是一种以小血管病变为主的肾血管病变，通过影响肾脏静脉血管、毛细血管和动脉血管进而表现为伴随着动脉高压的肾脏病变，分为急性和慢性两种形式。其中，常规抗磷脂抗体引起的肾脏组织学改变主要以血栓性微血管病(TMA)为主，即急性发病中的纤维蛋白微血栓和慢性发病中的持续性连续的血栓性损伤和动脉硬化瘢痕形成，内膜细胞过度增生、血管壁增厚、纤维动脉闭塞、小动脉血管闭塞性病变(动脉和小动脉再通血栓)等，均与抗磷脂综合征患者血浆抗体水平密切相关。
[0006]然而本专利技术研究团队于近期的研究中发现，SLE、抗磷脂综合征和干燥综合征等患者中，均可检测到一种新型自身抗体，即抗磷脂酰丝氨酸(phosphatidylserine，PS)IgG自身抗体(anti
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PS IgG)，狼疮患者的血浆中磷脂酰丝氨酸(phosphatidylserine，PS)水平显著高于健康人群，并与疾病活动度密切相关，而PS是真核细胞膜的重要组成部分，是真核细胞中主要的阴离子磷脂，占细胞内脂质总量的10％，PS的功能主要由其在细胞膜中的浓度和定位所调控，当细胞受到损伤或激活信号刺激后，在特定磷脂酶的作用下，PS从细胞膜的胞浆内侧翻转到细胞膜的外表面，暴露在细胞的外环境中。在SLE病人和动物模型中均观察
到巨噬细胞对凋亡细胞清除，即吞噬功能的缺陷，由于细胞外表面的PS磷脂作为凋亡细胞的关键标志，也为吞噬细胞提供了吞噬信号，因此，anti
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PS IgG可能通过阻断PS介导的吞噬途径选择性地抑制凋亡细胞清除。
[0007]本专利技术研究团队进一步研究发现，新型anti
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PS IgG并非如常规抗磷脂抗体通过血管损伤和血栓形成进而诱导肾脏病变，而是直接沉积于狼疮患者的肾小球基底膜，影响肾小球滤过功能，诱导肾小球基底膜增厚型肾脏病变，即anti
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PS IgG直接参与了自身抗体在肾小球的沉积以及狼疮肾炎的发病，狼疮肾炎患者血浆中anti
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PS IgG与无伴发肾炎狼疮患者相比显著增高，本专利技术首次发现了尚未应用于临床检测的anti
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PS IgG水平与狼疮肾炎发病的相关性，因此，本专利技术基于新型抗磷脂抗体即抗磷脂酰丝氨酸IgG自身抗体(anti
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PS IgG)在狼疮肾炎中的新致病机制，构建一种抗磷脂抗体检测试剂盒及其在系统性红斑狼疮肾炎检测中的应用，为精准诊断自身免疫导致的狼疮肾损伤提供了新指标，为现有狼疮肾炎生化诊断和组织活检提供了补充诊疗手段，也为将来对狼疮肾炎的进一步研究提供新思路。

技术实现思路

[0008]针对现有技术存在的问题以及本专利技术首次提出的新型anti
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PS IgG在狼疮肾炎中的新致病机制，本专利技术旨在提供一种抗磷脂抗体检测试剂盒及其在系统性红斑狼疮肾炎检测中的应用，本专利技术试剂盒通过对待测血清或血浆样本中anti
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PS IgG抗体水平进行检测，实现对早期自身免疫导致的系统性红斑狼疮肾损伤的快速、准确、无创检测。
[0009]基于上述目的，本专利技术采用的技术方案如下：
[0010]第一方面，本专利技术提供抗磷脂酰丝氨酸IgG自身抗体的检测试剂在制备系统性红斑狼疮肾炎检测仪器中的应用。
[0011]现有临床研究提示常规抗磷脂抗体引起的肾脏疾病是一种以小血管病变为主的肾血管病变，通过影响肾脏静脉血管、毛细血管和动脉血管进而表现为伴随着动脉高压的肾脏病变，即常规抗磷脂抗体引起的肾脏疾病是间接性的，本专利技术团队最新研究发现，在狼疮肾炎患者血浆中存在一种异常高表达的新型抗磷脂抗体anti
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PS IgG，并且anti
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PS IgG并非如常规抗磷脂抗体通过血管损伤和血栓形成进而诱导肾脏病变，而是直接沉积于狼疮患者的肾小球基底膜，影响肾小球滤过功能，诱导肾小球基底膜增厚型肾脏病变，即anti
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PS IgG直接参与了自身抗体在肾小球的沉积以及狼疮肾炎的发病，因此，本专利技术以anti
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PS IgG作为系统性红斑狼疮肾炎的标志物，通过对狼疮患者体内anti
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PS IgG水平进行检测，对系统性红斑狼疮肾炎具有更优的相关性和指示准确性。
[0012]优选地，抗磷脂酰丝氨酸IgG自身抗体的检测试剂通过Western Blot、免疫组织化学或酶联免疫吸附检测样本中抗磷脂酰丝氨酸IgG自身抗体的表达水平。
[0013]优选地，抗磷脂酰丝氨酸IgG自身抗体的检测试剂包括磷脂酰丝氨酸。
[0014]本专利技术基于磷脂酰丝氨酸与抗磷脂酰丝氨酸IgG自身抗体的特异性结合，通过Western Blot、免疫组织化学或酶联免疫吸附等方法对待测样本中的抗磷脂酰丝氨酸IgG自身抗体的表达水平进行检测。
[0015]优选地，检测样本为血清或血浆。
[0016]由于本专利技术的检测样本为血清或血浆，仅通过抽取待测人体的血液即可进行系统
性红斑狼疮肾炎的快速检测，相对于现有组织活检、DNA检测等更加无创、快捷。
[0017]第二方面，本专利技术提供一种抗磷脂抗体检测试剂盒，该试剂盒本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.抗磷脂酰丝氨酸IgG自身抗体的检测试剂在制备系统性红斑狼疮肾炎检测仪器中的应用。2.根据权利要求1所述应用，其特征在于，所述抗磷脂酰丝氨酸IgG自身抗体的检测试剂通过Western Blot、免疫组织化学或酶联免疫吸附检测样本中抗磷脂酰丝氨酸IgG自身抗体的表达水平。3.根据权利要求1所述应用，其特征在于，所述抗磷脂酰丝氨酸IgG自身抗体的检测试剂包括磷脂酰丝氨酸。4.根据权利要求2所述应用，其特征在于，所述样本为血清或血浆。5.一种抗磷脂抗体检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括固相载体和包被于固...

【专利技术属性】
技术研发人员：吕力为，马孔阳，肖凡，
申请(专利权)人：重庆国际免疫研究院，
类型：发明
国别省市：