一种抗菌肽GW18及其应用制造技术

本发明专利技术提供了一种抗菌多肽GW18及其应用，涉及抗菌肽技术领域。本发明专利技术所述抗菌多肽GW18的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，经实施例验证，所述抗菌多肽GW18具有较强的抗菌功能，对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和鲍曼不动杆菌具有良好的抑菌活性；并且所述抗菌多肽GW18可直接杀灭病原菌，功能显著，作用快速；GW18溶血活性低、无细胞毒性，且稳定性较高，可以运用于抗细菌感染药物或者医美产品。菌感染药物或者医美产品。菌感染药物或者医美产品。

【技术实现步骤摘要】
一种抗菌肽GW18及其应用


[0001]本专利技术属于抗菌肽
，具体涉及一种抗菌多肽GW18及其应用。

技术介绍

[0002]宿主自身的天然免疫系统是其抵御外界病原体入侵的重要保障，它依靠多种免疫细胞和活性小分子物质发挥作用。抗菌肽正是动物主动防御体系中的一种重要多肽，其是由宿主基因编码，在各种生物体内分布广泛。作为天然免疫应答的重要物质基础，抗菌肽可以在宿主的获得性免疫启动之前快速对外界细菌的感染作出应答。天然的抗菌肽在水环境中溶解性良好，在极端的温度条件下和强酸强碱环境中依旧能保持结构稳定性和抗菌活性。相关研究表明抗菌肽的杀菌机制通常是作用于细菌的细胞膜表面使得细胞膜凹陷或出现孔洞导致细菌内容物外泄而引起细菌死亡，包括利用静电作用吸附在细菌细胞膜表面，然后插入其疏水区来改变膜的构象，再进一步引起离子通道开放离子外泄而杀菌。
[0003]抗生素是最伟大的药物专利技术之一，它的出现挽救了无数患者的生命，可是随着抗生素被越来越多的使用，耐药菌株的数量也随之增加，临床治疗的药物选择面临困难，因此新型抗菌药物的开发迫在眉睫。抗菌肽具有杀菌速度快、热稳定性和酸碱稳定性良好且不易产生耐药性的特点，在感染的药物开发方面有着广阔的应用前景。但是，现有抗菌肽虽然有生物学活性，但是存在溶血、细胞毒性等副作用，体内稳定性差等缺陷，很难实现临床应用。

技术实现思路

[0004]有鉴于此，本专利技术的目的在于提供一种抗菌多肽GW18及其应用，所述抗菌多肽GW18具有较高的抗菌效果，同时溶血活性低，无细胞毒性，稳定性高，具有较好的优势和运用前景。
[0005]为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供以下技术方案：
[0006]本专利技术提供了一种抗菌多肽GW18，所述抗菌多肽GW18的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。
[0007]优选的，所述抗菌多肽GW18为直链多肽，且C末端酰胺化。
[0008]优选的，所述抗菌多肽GW18的分子量为2365.70Da，等电点为6.84。
[0009]本专利技术提供了一种抗菌组合物，包括上述抗菌多肽GW18和辅料。
[0010]优选的，所述辅料包括填充剂、润湿剂、粘合剂、崩解剂、润滑剂和表面活性剂中的一种或多种。
[0011]优选的，还包括药品原料，所述药品原料包括抗生素、蛋白、多肽、植物提取物和细胞因子中的一种或多种。
[0012]本专利技术还提供了上述抗菌多肽GW18或上述抗菌组合物在制备消杀细菌的药品中的应用。
[0013]优选的，所述细菌包括金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、大肠杆菌
(Escherichia coli)和鲍曼不动杆菌(Acinetobacter baumannii)。
[0014]本专利技术还提供了上述抗菌多肽GW18或上述抗菌组合物在制备调节皮肤微生物的医美产品中的应用。
[0015]本专利技术还提供了一种调节皮肤微生物的医美产品，包括上述抗菌多肽GW18或上述抗菌组合物。
[0016]有益效果：本专利技术提供了一种氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的抗菌多肽GW18，经实施例验证，所述抗菌多肽GW18具有较强的抗菌功能，对金黄色葡萄球菌标准菌株(Staphylococcus aureus，ATCC2592)、大肠杆菌标准菌株(Escherichia coli，ATCC25922)、鲍曼不动杆菌(Acinetobacter baumannii，ATCC22933)的最小抑菌浓度均为分别是2.38μg/ml、4.76μg/ml和9.52μg/ml；并且所述抗菌多肽GW18可直接杀灭病原菌，功能显著，作用快速；GW18溶血活性低、无细胞毒性，且稳定性较高，可以运用于抗细菌感染药物或者医美产品。
附图说明
[0017]图1为本专利技术所述抗菌多肽GW18对鲍曼不动杆菌的杀菌动力学研究结果，图中Co：多粘菌素，GW：GW18；
[0018]图2为本专利技术所述抗菌多肽GW18的溶血活性测定结果；
[0019]图3为本专利技术所述抗菌多肽GW18的细胞毒活性测定结果；
[0020]图4为本专利技术所述抗菌多肽GW18的血浆稳定性结果。
具体实施方式
[0021]本专利技术提供了一种抗菌多肽GW18，所述抗菌多肽GW18的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示：Gly
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Trp
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Gly
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Ala
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Lys
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Arg
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Trp
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Gly
‑
Lys
‑
Arg
‑
Gly
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Trp
‑
Lys
‑
Trp
‑
Lys
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Arg
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His
‑
Trp。
[0022]本专利技术所述抗菌多肽GW18为直链多肽，且C末端酰胺化，因此完整序列为Gly
‑
Trp
‑
Gly
‑
Ala
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Lys
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Arg
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Trp
‑
Gly
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Lys
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Arg
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Gly
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Trp
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Lys
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Trp
‑
Lys
‑
Arg
‑
His
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Trp
‑
NH2或GWGAKRWGKRGWKWKRHW
‑
NH2。通过基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MAL DI
‑
TO F)进行测定，本专利技术所述抗菌多肽的分子量优选为2365.70Da；通过等电聚焦电泳测定纯化后的多肽的等电点为6.84。
[0023]本专利技术对所述抗菌多肽GW18的制备方法并没有特殊限定，优选包括直接合成、原核表达和真核表达等，实施例中通过固相合成的方法制备所述抗菌多肽GW18，但是不能仅将其认定为本专利技术的全部保护范围。在本专利技术实施例中，优选根据SEQ ID NO.1所示的序列固相合成法合成得到粗多肽，而后通过HPLC反相柱层析脱盐纯化，鉴定其纯度，直到多肽的纯度不低于95％，再通过基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MAL DI
‑
TO F)测定其分子量，并通过等电聚焦电泳测定纯化后的多肽的等电点；最后采用自动氨基酸测序仪测定纯化后多肽的氨基酸序列结构是否与SEQ ID NO.1所示结构一致。
[0024]本专利技术所述HPLC反相柱层析脱盐纯化的方法，优选包括：将0.1mg待测样品溶于1mL含有0.1％三氟醋酸的超纯水中，若有不溶解的杂质，用0.45μm滤膜过滤，流动相A为0.1％三氟醋酸
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水，流动相B为0.1％三氟醋酸
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乙腈，本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种抗菌多肽GW18，其特征在于，所述抗菌多肽GW18的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。2.根据权利要求1所述抗菌多肽GW18，其特征在于，所述抗菌多肽GW18为直链多肽，且C末端酰胺化。3.根据权利要求1所述抗菌多肽GW18，其特征在于，所述抗菌多肽GW18的分子量为2365.70Da，等电点为6.84。4.一种抗菌组合物，其特征在于，包括权利要求1～3任一项所述抗菌多肽GW18和辅料。5.根据权利要求4所述抗菌组合物，其特征在于，所述辅料包括填充剂、润湿剂、粘合剂、崩解剂、润滑剂和表面活性剂中的一种或多种。6.根据权利要求4所述抗菌组合物，其特征在于，还包括药品原料，所述药品原料包括抗生素、蛋白、多肽、植物...

【专利技术属性】
技术研发人员：赖仞，王爱丽，
申请(专利权)人：南方海洋科学与工程广东省实验室广州，
类型：发明
国别省市：