裸花紫珠SSR分子标记及其核心引物对、试剂盒和应用制造技术

技术编号:34808021 阅读:14 留言:0更新日期:2022-09-03 20:15
本发明专利技术提供了裸花紫珠SSR分子标记及其核心引物对、试剂盒和应用,属于分子生物学技术领域。本发明专利技术从裸花紫珠转录组序列中,开发并筛选出扩增效果好、多态性高的14对SSR分子标记引物,采用上述SSR分子标记引物,可对裸花紫珠进行种质资源遗传多样性评价、聚类分析、构建SSR指纹图谱、分子辅助育种等,对后续裸花紫珠种质资源管理、育种、遗传保护、群体间和群体内的遗传多样性分析具有重要意义。内的遗传多样性分析具有重要意义。内的遗传多样性分析具有重要意义。

【技术实现步骤摘要】
裸花紫珠SSR分子标记及其核心引物对、试剂盒和应用


[0001]本专利技术涉及分子生物学
,具体涉及裸花紫珠SSR分子标记及其核心引物对、试剂盒和应用。

技术介绍

[0002]裸花紫珠为马鞭草科紫珠属植物,干燥叶入药,具有消炎、止血、抗菌、解肿毒之功效,收载于2020年版《中国药典》,也是《中国药典》2015年版增补本收录品种。裸花紫珠主产于海南、广东、广西等省份,国外主要分布于印度、越南和马来西亚。裸花紫珠中含有黄酮、苯乙醇苷、萜类等化学成分,作为国家医保乙类、中药保护品种以及多省地方的基药,其市场需求量较大,应用前景广阔。
[0003]目前药农种植的裸花紫珠均为野生驯化的栽培种,优良品种缺乏的现状仍未改变,裸花紫珠产业的品种需求与种质资源发掘利用明显滞后的矛盾突出。裸花紫珠种质资源群体变异丰富,不同产地的裸花紫珠有效成分差异较大,且品质性状均为数量性状,由多基因控制,易受环境影响。因此,建立一套简便、快速、可靠的裸花紫珠种质资源鉴定技术体系应用于育种和品种鉴定,对于提高育种效率,加快育种进程,保障裸花紫珠产业的健康快速发展等具有重要意义。
[0004]SSR分子标记技术以其多态性高、重复性好、检验简便等优点,在种质资源分子标记研究中应用广泛。目前于福来等对裸花紫珠进行了基因组调研及SSR特征分析,提示裸花紫珠为高杂合、高重复的复杂基因组,研究发现单、双、三核苷酸重复基序占比较高。彭云露等对6份不同地区的裸花紫珠进行了转录组测序,同时开发了部分SSR标记,但标记的多样性较差,22对标记引物中只有1对引物观测等位基因为3个,其余均为1~2个,香农指数和期望杂合度均较小,满足不了裸花紫珠种质鉴定、构建指纹图谱等后续研究。
[0005]基于此,本专利技术基于收集海南、广东、广西等裸花紫珠主要产区的103份自然群体的基础上,开发筛选出了条带清晰、多态性高及稳定性好的SSR分子标记及其核心引物对,并将其应用于裸花紫珠种质资源遗传多样性评价、聚类分析、构建SSR指纹图谱、分子辅助育种等领域。

技术实现思路

[0006](一)解决的技术问题
[0007]针对现有技术的不足,本专利技术提供了裸花紫珠SSR分子标记及其核心引物对、试剂盒和应用,解决了现有技术开发出的核心引物对条带不清晰、多态性低、稳定性差以及将核心引物对应用到种质资源鉴定领域的分析效果差的问题。
[0008](二)技术方案
[0009]一种裸花紫珠SSR分子标记,包括14个SSR分子标记,具体包括:
[0010][0011][0012][0013][0014]其中,n≥5。
[0015]一种裸花紫珠SSR分子标记的核心引物对,包括使用上述SSR分子标记扩增出的引物对:
[0016]所述针对SSR分子标记LHZZCnH147扩增的引物序列(5'

3')为:
[0017]F:CCGAGGCAAAGTTCCAACCA;
[0018]R:CCACTGATAAACCAACGAGCC;
[0019]所述针对SSR分子标记LHZZCnH138扩增的引物序列(5'

3')为:
[0020]F:GGCTGTGGTCCAAGAAAGGT;
[0021]R:AGAAGTTACAGAGCCAAACCA;
[0022]所述针对SSR分子标记LHZZCnH182扩增的引物序列(5'

3')为:
[0023]F:ATCTCTGTCTCACAAGCGCC;
[0024]R:CACCGGAACCCTGCATGTAA;
[0025]所述针对SSR分子标记LHZZCnH107扩增的引物序列(5'

3')为:
[0026]F:ACGCCTTCCATTATGCACGA;
[0027]R:GCCCGAGTTTGTAGTGGTGA;
[0028]所述针对SSR分子标记LHZZCnH220扩增的引物序列(5'

3')为:
[0029]F:CCCAAGAAGAGCTGTCCACA;
[0030]R:CCTCAGCATGCAGAAACTGG;
[0031]所述针对SSR分子标记LHZZCnH205扩增的引物序列(5'

3')为:
[0032]F:GGTATGTCTCATGTCGCCGA;
[0033]R:TTGCGTTCACGATGCTTTGG;
[0034]所述针对SSR分子标记LHZZCnH078扩增的引物序列(5'

3')为:
[0035]F:AGGCACCTAGCTAGACACCA;
[0036]R:ACGCTCAGGTAGTTGGTGTG;
[0037]所述针对SSR分子标记LHZZCnH275扩增的引物序列(5'

3')为:
[0038]F:GAGGCTGGTTTGGAGTGGAA;
[0039]R:TGTGTCCAAAGGCATCGTGA;
[0040]所述针对SSR分子标记LHZZCnH080扩增的引物序列(5'

3')为:
[0041]F:ACATCCGGTGCATCCTTTCT;
[0042]R:TTCCTTCAAGCACCTGTCCC;
[0043]所述针对SSR分子标记LHZZCnH357扩增的引物序列(5'

3')为:
[0044]F:CCCACCAGTGAAAGGCTTCT;
[0045]R:CGATGTGGGCTGTGATCGTA;
[0046]所述针对SSR分子标记LHZZCnH155扩增的引物序列(5'

3')为:
[0047]F:CACAGAAACAACACGGCCAG;
[0048]R:GCGTTTCGACTGCATTCGAT;
[0049]所述针对SSR分子标记LHZZCnH305扩增的引物序列(5'

3')为:
[0050]F:CAGCGCAGGATTGTTGATCA;
[0051]R:GGGTAAACAGTGGGTGGAGG;
[0052]所述针对SSR分子标记LHZZCnH304扩增的引物序列(5'

3')为:
[0053]F:ACCAAGCTGCAATTCCCAAG;
[0054]R:ACCAAATCTTAGGTCCACATCCT;
[0055]所述针对SSR分子标记LHZZCnH156扩增的引物序列(5'

3')为:
[0056]F:GGCCCTGATGCTTCTTCTGT;
[0057]R:CCTTATAACGCACGCATGGC。
[0058]优选的,所述引物正向序列的5'端均标记有荧光基团,所述荧光基团为FA本文档来自技高网
...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种裸花紫珠SSR分子标记,其特征在于,包括14个SSR分子标记,具体包括:
其中,n≥5。2.一种裸花紫珠SSR分子标记的核心引物对,其特征在于,包括使用权利要求1的SSR分子标记扩增出的引物对:所述针对SSR分子标记LHZZCnH147扩增的引物序列(5'

3')为:F:CCGAGGCAAAGTTCCAACCA;R:CCACTGATAAACCAACGAGCC;所述针对SSR分子标记LHZZCnH138扩增的引物序列(5'

3')为:F:GGCTGTGGTCCAAGAAAGGT;R:AGAAGTTACAGAGCCAAACCA;所述针对SSR分子标记LHZZCnH182扩增的引物序列(5'

3')为:F:ATCTCTGTCTCACAAGCGCC;R:CACCGGAACCCTGCATGTAA;所述针对SSR分子标记LHZZCnH107扩增的引物序列(5'

3')为:F:ACGCCTTCCATTATGCACGA;R:GCCCGAGTTTGTAGTGGTGA;所述针对SSR分子标记LHZZCnH220扩增的引物序列(5'

3')为:F:CCCAAGAAGAGCTGTCCACA;R:CCTCAGCATGCAGAAACTGG;所述针对SSR分子标记LHZZCnH205扩增的引物序列(5'

3')为:F:GGTATGTCTCATGTCGCCGA;
R:TTGCGTTCACGATGCTTTGG;所述针对SSR分子标记LHZZCnH078扩增的引物序列(5'

3')为:F:AGGCACCTAGCTAGACACCA;R:ACGCTCAGGTAGTTGGTGTG;所述针对SSR分子标记LHZZCnH275扩增的引物序列(5'

3')为:F:GAGGCTGGTTTGGAGTGGAA;R:TGTGTCCAAAGGCATCGTGA;所述针对SSR分子标记LHZZCnH080扩增的引物序列(5'

3')为:F:ACATCCGGTGCATCCTTTCT;R:TTCCTTCAAGCACCTGTCCC;所述针对SSR分子标记LHZZCnH357扩增的引物序列(5'

3')为:F:CCCACCAGTGAAAGGCTTCT;R:CGATGTGGGCTGTGATCGTA;所述针对SSR分子标记LHZZCnH155扩增的引物序列(5'

3')为:F:CACAGAAACAACACGGCCAG;R:GCGTTTCGACTGCATTCGAT;所述针对SSR分子标记LHZZCnH305扩增的引物序列(5'

3')为:F:CAGCGC...

【专利技术属性】
技术研发人员:黄梅于福来李鑫陈振夏张红瑞胡璇王凯王丹陈晓鹭谢小丽官玲亮
申请(专利权)人:中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所
类型:发明
国别省市:

网友询问留言 已有0条评论
  • 还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。

1