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带有His标签的重组新城疫病毒的构建方法及用途技术

技术编号:34781908 阅读:78 留言:0更新日期:2022-09-03 19:39
本发明专利技术公开了带有His标签的重组新城疫病毒的构建方法及用途。基于已建立的基因VIId亚型新城疫病毒I4强毒株反向遗传操作系统,将His标签(6

【技术实现步骤摘要】
带有His标签的重组新城疫病毒的构建方法及用途


[0001]本专利技术涉反向遗传学技术及用途,特别涉及标签蛋白与HN蛋白融合构建重组新城疫病毒。

技术介绍

[0002]新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)可感染家禽和野禽,引起一种急性、高度传染性呼吸道和神经系统疾病,给全球养禽业的健康发展造成严重威胁。NDV基因组包括6个编码基因,按3
’‑
NP

P

M

F

HN

L
‑5’
顺序排列,依次编码6种结构蛋白:核衣壳蛋白(NP)、磷酸化蛋白(P)、基质蛋白(M)、融合蛋白(F)、血凝素

神经氨酸酶蛋白(HN)和大蛋白(L)。这些病毒蛋白通过与宿主蛋白相互作用以调控细胞相关生理过程和病毒生命周期,可能诱导细胞出现凋亡、坏死以及代谢失衡等现象。因此,了解NDV感染期间与宿主蛋白的相互作用有助于进一步了解病毒感染和致病机理,对建立新的治疗方法和免疫策略具有重要意义[石金本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.带有His标签的重组新城疫病毒的构建方法,其特征在于:以新城疫病毒基因组全长克隆为骨架,将His标签置于HN基因之后,获得带有His标签的重组新城疫病毒基因组全长cDNA感染性克隆,将该感染性克隆与辅助质粒共转染细胞后获得相应表型的重组新城疫病毒。2.根据权利要求1所述的带有His标签的重组新城疫病毒株构建方法,其特征在于:包括以下具体步骤:1)全长克隆pNDVI4

HN

His的构建以基因VIId亚型新城疫病毒I4强毒株基因组全长转录载体pNDVI4为研究对象,通过基因克隆得到HN和His相互融合的中间质粒pCR2.1

HN

His,最后将中间质粒pCR2.1

HN

His中的HN

His

L片段等位替换至I4基因组全长转录载体pNDVI4,构建得到全长克隆pNDVI4

HN

...

【专利技术属性】
技术研发人员:胡顺林刘秀梵王文莉陈玉王晓泉刘晓文
申请(专利权)人:扬州大学
类型:发明
国别省市:

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