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一种菠萝苗再生方法及腋芽生长点转化方法技术

技术编号:34771430 阅读:62 留言:0更新日期:2022-08-31 19:33
本发明专利技术公开了一种菠萝苗再生方法及腋芽生长点转化方法,包括以下步骤:在无菌操作台中将处于壮年时期的完整菠萝苗植株逐一剥开叶片,直至将叶片全部除去,留下根;用小刀微微平行切根,直至露出生长点,再用小刀在生长点处下轻划一刀,放入1ml的菌液中浸泡20min;将浸泡好的菠萝苗用无菌水清洗2~3遍,放在垫有滤纸的空皿中晾干;将处理好的菠萝苗插入共培养基中,光照培养,14天后原生长点处会产生小的圆白色突起,即是新的丛生芽;新的丛生芽用小刀切去,并将菠萝苗转移至筛选培养基进行培养,19天后,原生长点出长出新的愈伤;70天后,愈伤长出新的愈伤芽,将愈伤芽和愈伤分别进行鉴定,选出阳性菠萝苗植株。选出阳性菠萝苗植株。选出阳性菠萝苗植株。

【技术实现步骤摘要】
一种菠萝苗再生方法及腋芽生长点转化方法


[0001]本专利技术属于菠萝育苗
,具体涉及一种菠萝苗再生方法及腋芽生长点转化方法。

技术介绍

[0002]菠萝(Ananas comosus(L.)Merr.)又称凤梨,属凤梨科(Bromeliaceae)凤梨属(Ananas)草本植物,是热带水果之一。我国是世界菠萝主产国之一,种植面积和总产量分别约占全球总量的7.2%和8.1%。菠萝是特色高效的热带经济作物,也是热区农民重要的经济来源。菠萝既可鲜食,又可加工成糖水罐头、果汁等多种副产品。
[0003]但由于菠萝自然繁殖系数低,进而导致新品种的推广常因种苗缺乏而进展缓慢,且种植技术研推体系不健全进而不能满足市场需求。所以菠萝组织培养苗的技术提升也显得格外重要。与传统菠萝种苗繁育不同,菠萝腋芽原基再生体系可通过组织培养技术短期内获得大量无菌菠萝种苗,对菠萝种苗繁育巨大的应用价值。
[0004]由于菠萝生长周期长、许多性状的遗传机理不明等因素限制,使菠萝基因转化技术已成为限制菠萝基因工程研究发展的重要因素,严重阻碍依靠传统菠萝育种手本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种菠萝苗再生方法,其特征在于,包括以下步骤:1)挑选生长处于壮年时期的完整菠萝苗植株,其高度可为5~8cm,将菠萝苗叶片在无菌操作台中用镊子逐一剥除,直至叶片全部剥除,作为新菠萝苗;2)无菌操作台中用小刀平行切新菠萝苗,直至露出生长点,用小刀在生长点处轻划一刀;3)将处理好的新菠萝苗放入再生培养基培养,光照培养,14天后,原生长点处会产生小的圆白色突起,即是新的丛生芽;4)在再生培养基培养20天,原生长点将会长出愈伤;5)在再生培养基培养70天,愈伤上将会生出新的菠萝苗。2.根据权利要求1所述的一种菠萝苗再生方法,其特征在于,所述再生培养基配方为1/2MS固体培养基+0.5mg/LNAA+2mg/L 6

BA。3.根据权利要求1所述的一种腋芽生长点转化方法,其特征在于,包括侵染菌液制备和菠萝苗再生处理;其中侵染菌液制备包括以下步骤:1)菌培养:将携带有目标基因载体的农杆菌GV3101涂抹在含有50mg/L卡那霉素的固体LB培养基上,温度为28℃,培养时间为36

48h;2)摇菌:挑取单克隆放入含有50mg/L卡那霉素的LB液体培养基中,温度为28℃,转速为200rpm,过夜培养12~16h;3)扩培:按照1:15的比例进行2次活化,培养至OD600=0.6~0.8。4)将步骤3)中培养好的菌液进行离心,再用等体积侵染液重悬两次即得到侵染菌液;5)上述步骤...

【专利技术属性】
技术研发人员:郭笑彤李蓓陈乐乐杨帅威
申请(专利权)人:鲁东大学
类型:发明
国别省市:

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