一种纳米硒益生菌制剂及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种纳米硒益生菌制剂的制备方法，包括：将活化后的益生菌发酵乳杆菌接种于预先改良的MRS液体培养基中，厌氧培养，得到纳米硒

【技术实现步骤摘要】
一种纳米硒益生菌制剂及其制备方法和应用


[0001]本专利技术属于纳米抑菌制剂
，特别涉及一种纳米硒益生菌制剂及其制备方法和应用。

技术介绍

[0002]目前，真菌感染已造成全球约25％的农产品损失，是农业生产面临的主要威胁；小麦赤霉病在中国南方冬麦区及东北三江平原春麦区经常流行，造成产量严重损失，而且病麦含有致呕毒素和类雌性激素等毒素，人畜食后可引起急性中毒。为了抑制真菌感染，大量化学农药被广泛使用，农药残留严重威胁人体健康，并对环境造成极大污染。因此，开发无毒、高效的真菌病原菌抑菌药物是当前亟需解决的关键问题之一。

技术实现思路

[0003]针对现有技术中存在的技术问题，本专利技术提供了一种纳米硒益生菌制剂及其制备方法和应用，以解决现有采用化学农药的抑制真菌方法中，存在农药残留及环境污染的技术问题。
[0004]为达到上述目的，本专利技术采用的技术方案为：
[0005]本专利技术公开了一种纳米硒益生菌制剂的制备方法，包括以下步骤：
[0006]步骤1、对益生菌发酵乳杆菌进行活化处理，得到活化后的益生菌发酵乳杆菌；
[0007]步骤2、将活化后的益生菌发酵乳杆菌接种于预先改良的MRS液体培养基中，厌氧培养，得到纳米硒
‑
发酵乳杆菌发酵醪液；其中，所述预先改良的MRS液体培养基为采用在MRS液体培养基中加入亚硒酸钠制备得到；
[0008]步骤3、从所述纳米硒
‑
发酵乳杆菌发酵醪液中，收集得到纳米硒
‑
发酵乳杆菌复合物；
[0009]步骤4、将所述纳米硒
‑
发酵乳杆菌复合物与保护剂混合，冻干处理，得到所述纳米硒
‑
发酵乳杆菌制剂，即得到所述纳米硒益生菌制剂。
[0010]进一步的，步骤1中，对益生菌发酵乳杆菌进行活化处理，得到活化后的发酵乳杆菌的过程，具体如下：
[0011]将益生菌发酵乳杆菌接种于蔗糖改良的MRS液体培养基中，厌氧培养；
[0012]重复上述操作，连续活化处理预设次数后，得到所述活化后的益生菌发酵乳杆菌。
[0013]进一步的，厌氧培养温度为35℃
‑
37℃，培养时间为14
‑
20h；连续活化2
‑
3次。
[0014]进一步的，步骤2中，将活化后的益生菌发酵乳杆菌接种于预先改良的MRS液体培养基中，厌氧培养，得到纳米硒
‑
发酵乳杆菌发酵醪液的过程中，具体如下：
[0015]将所述活化后的益生菌发酵乳杆菌按1％
‑
3％的接种量接种于预先改良的MRS液体培养基中，置于35
‑
37℃的条件下，厌氧培养36
‑
48h，得到所述纳米硒
‑
发酵乳杆菌发酵醪液。
[0016]进一步的，步骤2中，预先改良的MRS液体培养基中，亚硒酸钠的终浓度为3
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30mmol/L；所述亚硒酸钠采用单独灭菌后加入MRS液体培养基中。
[0017]进一步的，步骤3中，从所述纳米硒
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发酵乳杆菌发酵醪液中，收集得到纳米硒
‑
发酵乳杆菌复合物的过程，具体如下：
[0018]对所述纳米硒
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发酵乳杆菌发酵醪液进行离心，弃上清液，得到沉淀产物；其中，离心转速为8000
‑
10000r/min，离心时间为10
‑
15min；
[0019]对所述沉淀产物进行重复洗涤，离心，得到所述纳米硒
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发酵乳杆菌复合物；其中，洗涤过程采用无菌生理盐水悬浮洗涤；离心转速为8000
‑
10000r/min，离心时间为10
‑
15min。
[0020]进一步的，步骤4中，保护剂为海藻糖和低聚果糖；其中，海藻糖的质量百分数为6.0％
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8.0％，低聚果糖的质量百分数为12.0％
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14.0％。
[0021]进一步的，步骤4中，冻干处理过程，具体为：采用在
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80℃的条件下，预冻2
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6h后，冻干处理12
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36h。
[0022]本专利技术还提供了一种纳米硒益生菌制剂，所述纳米硒益生菌制剂采用所述的一种纳米硒益生菌制剂的制备方法制备得到。
[0023]本专利技术还提供了一种纳米硒益生菌制剂的应用，所述纳米硒益生菌制剂应用于小麦赤霉菌的抑制。
[0024]与现有技术相比，本专利技术的有益效果为：
[0025]本专利技术提供了一种纳米硒益生菌制剂及其制备方法和应用，利用活化后的益生菌发酵乳杆菌将无机硒转化为低毒、活性强的纳米硒，将纳米硒
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发酵乳杆菌复合物冻干处理，制备成纳米硒
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益生菌制剂；由于活化后的益生菌发酵乳杆菌转化合成纳米硒能力强，形成的纳米硒均匀、分散、粒度小的特点；纳米硒
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益生菌制剂中的纳米硒不仅能显著抑制小麦赤霉菌，而且纳米硒还具有促进植物生长、提高产品富硒水平等功效；并且益生菌发酵乳杆菌具有安全、抑菌、有益等功效；利用纳米硒和益生菌制备成的高活性纳米硒
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益生菌制剂，具有双重功效，与现有抑制真菌的产品，更安全、更有效；所述的纳米硒益生菌制剂安全无毒，同时，能够避免了环境污染。
附图说明
[0026]图1为实施例1中纳米硒
‑
发酵乳杆菌复合物的扫描电镜图；
[0027]图2为实施例1中纳米硒
‑
发酵乳杆菌复合物中纳米硒的透射电镜图；
[0028]图3为实施例1中纳米硒
‑
发酵乳杆菌复合物中纳米硒的粒度分布图；
[0029]图4为实施例1中不同浓度的纳米硒
‑
发酵乳杆菌制剂对小麦赤霉菌的孢子萌发率柱状图；
[0030]图5为实施例2中不同浓度的纳米硒
‑
发酵乳杆菌制剂对小麦赤霉菌的孢子萌发率柱状图。
具体实施方式
[0031]为了使本专利技术所解决的技术问题，技术方案及有益效果更加清楚明白，以下具体实施例，对本专利技术进行进一步的详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本专利技术，并不用于限定本专利技术。
[0032]本专利技术提供了一种纳米硒益生菌制剂的制备方法，包括以下步骤：
[0033]步骤1，菌种活化
[0034]将冰箱保存的发酵乳杆菌接种于蔗糖改良MRS液体培养基，35℃
‑
37℃厌氧培养14
‑
20h，连续活化2
‑
3次；其中，所述蔗糖改良的MRS液体培养基为采用蔗糖等量替换MRS液体培养基配方中的葡萄糖。
[0035]步骤2，纳米硒转化
[0036]将步骤1活化后的发酵乳杆菌分别以1
‑
3％的接种量，接种于亚本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种纳米硒益生菌制剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1、对益生菌发酵乳杆菌进行活化处理，得到活化后的益生菌发酵乳杆菌；步骤2、将活化后的益生菌发酵乳杆菌接种于预先改良的MRS液体培养基中，厌氧培养，得到纳米硒
‑
发酵乳杆菌发酵醪液；其中，所述预先改良的MRS液体培养基为采用在MRS液体培养基中加入亚硒酸钠制备得到；步骤3、从所述纳米硒
‑
发酵乳杆菌发酵醪液中，收集得到纳米硒
‑
发酵乳杆菌复合物；步骤4、将所述纳米硒
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发酵乳杆菌复合物与保护剂混合，冻干处理，得到所述纳米硒
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发酵乳杆菌制剂，即得到所述纳米硒益生菌制剂。2.根据权利要求1所述的一种纳米硒益生菌制剂的制备方法，其特征在于，步骤1中，对益生菌发酵乳杆菌进行活化处理，得到活化后的发酵乳杆菌的过程，具体如下：将益生菌发酵乳杆菌接种于蔗糖改良的MRS液体培养基中，厌氧培养；重复上述操作，连续活化处理预设次数后，得到所述活化后的益生菌发酵乳杆菌。3.根据权利要求2所述的一种纳米硒益生菌制剂的制备方法，其特征在于，厌氧培养温度为35℃
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37℃，培养时间为14
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20h；连续活化2
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3次。4.根据权利要求1所述的一种纳米硒益生菌制剂的制备方法，其特征在于，步骤2中，将活化后的益生菌发酵乳杆菌接种于预先改良的MRS液体培养基中，厌氧培养，得到纳米硒
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发酵乳杆菌发酵醪液的过程中，具体如下：将所述活化后的益生菌发酵乳杆菌按1％
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3％的接种量接种于预先改良的MRS液体培养基中，置于35
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37℃的条件下，厌氧培养36
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48h，得到所述纳米硒
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发酵乳杆菌发酵醪液。5.根据权利...

【专利技术属性】
技术研发人员：王丽红，王天娇，邓帆，孔阳，王蕊昕，王敏敏，
申请(专利权)人：陕西科技大学，
类型：发明
国别省市：