一种肠杆菌Y1-10及其应用制造技术

本发明专利技术涉及一种高效释硅的肠杆菌（Enterobacter cancerogenus）Y1

【技术实现步骤摘要】
一种肠杆菌Y1
‑
10及其应用


[0001]本专利技术属于环境微生物
，具体涉及一种肠杆菌Y1
‑
10及其应用。

技术介绍

[0002]硅是氮、磷、钾之外植物健康生长所必须的第四大元素，在世界农业生产中作用显著。硅的缺乏在一定程度上影响着作物的产量和品质，同时也影响作物与环境及作物与其他生物间的生态关系。据统计，欧盟内土壤约有60%~70%归属不健康，我国缺硅或潜在缺硅土壤占耕地面积的80%，土壤里的硅元素能被植物根系吸收利用的有效硅只占土壤全硅0.1%~0.2%。寻找多种途径提高土壤硅素营养与植物硅素吸收一直是国内外研究的重点。
[0003]提高土壤硅素营养的途径很多，生产实践表明施用化学硅肥是改善土壤供硅能力，促进作物提质增产的有效技术措施之一。然而化学硅肥的大量施用造成了诸如土壤结构破坏、有机质含量下降、地下水及地表污染严重等一系列生态环境问题，对农业可持续发展构成威胁和挑战。随着生态农业在世界范围内迅速兴起，出于食品安全、环境保护的需要，对肥料、农药提出了一系列的要求和限制。
[0004]因此，开辟新的效果好、成本低又不污染环境的高效释硅微生物，开发新型生物硅肥，将囤积在土壤中的“硅元素”释放出来，提质增产的同时调节土壤酸碱度、改良土壤结构、修复污染土壤等，对发展生态、经济农业具有十分重要的意义。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的是提供一种既可高效释硅，又具有良好解磷、解钾和固氮能力的耐盐肠杆菌Y1
‑
10及其应用。
[0006]本专利技术采用如下技术方案：一种肠杆菌（Enterobacter cancerogenus）Y1
‑
10，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，保藏编号为CGMCC No. 24892。
[0007]所述的肠杆菌Y1
‑
10在LB培养基上生长良好，单个菌落表面湿润光滑，边缘整齐；菌体呈短小杆状，大小约为0.6~1.0
×
1.2~1.5μm，革兰氏染色呈阴性，兼性厌氧、无芽孢；V
‑
P、柠檬酸盐、D
‑
葡萄糖产酸、产H2S、吲哚试验均呈阳性，明胶、甲基红、脲酶试验均为阴性。
[0008]进一步的，该菌株具有释硅、溶磷、解钾、固氮的能力。
[0009]进一步的，该菌株可产嗜铁素和IAA。
[0010]进一步的，该菌株在pH为4~10均能生长。
[0011]进一步的，该菌株在培养温度20
‑
40℃均能生长。
[0012]进一步的，该菌株具有耐盐能力。
[0013]一种上述肠杆菌Y1
‑
10在植物促生中的应用。
[0014]一种包含上述肠杆菌Y1
‑
10的生物硅肥，其中肠杆菌Y1
‑
10的含量不低于108个/mL。
[0015]一种上述肠杆菌Y1
‑
10在土壤修复中的应用，特别是在盐碱土壤修复和改良中的应用。
[0016]一种包含上述肠杆菌Y1
‑
10的土壤改良剂，其中肠杆菌Y1
‑
10的含量不低于108个/mL。
[0017]一种上述肠杆菌Y1
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10在制备产嗜铁素和/或IAA中的应用。
[0018]本专利技术的有益效果在于：（1）利用本专利技术的肠杆菌Y1
‑
10，可以用于富硅地区如铁尾矿区土壤改良。
[0019]（2）利用本专利技术的肠杆菌Y1
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10应用于土壤，不仅有释硅作用，还能解磷、解钾、固氮、产嗜铁素和IAA，为植物生长提供养分，促进植物生长等作用。
[0020]（3）本专利技术的肠杆菌Y1
‑
10，在盐碱土耐受性方面优势显著，最适生长NaCl浓度为4%，最高NaCl耐受浓度为12%，定殖能力强，可用于盐碱地土壤改良及质量提升；另外还可以为释硅、解磷解钾功能微生物的开发提供优质的菌种资源，有着切实的经济、社会效益和广阔的应用前景。
附图说明
[0021]图1为肠杆菌Y1
‑
10系统发育树。
[0022]图2为不同初始pH对肠杆菌Y1
‑
10生长的影响图。
[0023]图3为NaCl浓度对肠杆菌Y1
‑
10生长的影响图。
[0024]图4为温度对肠杆菌Y1
‑
10生长的影响图。
具体实施方式
[0025]下面结合实施例和附图对本专利技术做进一步的说明。本专利技术保护范围不限于实施例，本领域技术人员在权利要求限定的范围内做出任何改动也属于本专利技术保护的范围。
[0026]实施例1肠杆菌Y1
‑
10分离和保藏由河北省武安市采集铁矿尾矿砂样品，研磨过200目筛，制备成10
‑3、10
‑4、10
‑5的3个稀释度菌悬液，均匀涂布于亚历山大罗夫培养基上，于30℃恒温培养箱中培养2~3天，挑取不同形态单菌落重复划线2~3次，直至获得纯培养，转接到斜面4℃冰箱保存备用。
[0027]以铁尾矿砂为底物，以发酵液中有效硅含量的增加为标准，对初筛得到的单菌落进行释硅能力复筛。复筛过程中，种子液由LB培养基发酵至对数生长期，按10%体积接入浸矿脱硅培养基，30℃摇床180r/min振荡培养，第5d取样，离心发酵液取上清，用硅钼蓝比色法测定有效硅含量。
[0028]培养基配方：（1）亚历山大罗夫培养基（g/L）：蔗糖5.0g、Na2HPO42.0g、MgSO4·
7H2O0.5g、FeCl30.005g、CaCO30.1g、土壤矿样1.0g、琼脂15~20g，pH调为7.0~7.4。
[0029]（2）浸矿脱硅培养基（g/L）：葡萄糖10g、KH2PO40.2g、MgSO4·
7H2O0.2g、NaCl0.2g、CaCl2·
2H2O0.2g、CaCO35g、pH7.0~7.2。
[0030]（3）LB培养基（g/L）：胰蛋白胨10g、酵母提取物5g、NaCl10g，固体培养基需加琼脂15~20g，pH7.2~7.5。
[0031]实验发现，菌株Y1
‑
10在LB培养基上生长良好，菌落圆形、淡黄色，边缘整齐，隆起、
表面光滑，粘稠。菌体呈短小杆状，革兰氏染色呈阴性，无芽孢；兼性厌氧，大小约为0.6~1.0
×
1.2~1.5μm；V
‑
P、柠檬酸盐、D
‑
葡萄糖产酸、产H2S、吲哚试验均呈阳性，明胶、甲基红、脲酶试验均为阴性。
[0032]取菌株Y1
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10对数生长期菌液，按照常规方法提取菌株基因组总DNA，以此为模板进行16SrDNAPCR扩增，经上海生工测本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种肠杆菌（Enterobacter cancerogenus）Y1
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10，其特征在于，保藏编号为CGMCC No. 24892。2.根据权利要求1所述的一种肠杆菌Y1
‑
10，其特征在于，其具有释硅、溶磷、解钾、固氮的能力。3.根据权利要求1所述的一种肠杆菌Y1
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10，其特征在于，其可产嗜铁素和IAA。4.根据权利要求1所述的一种肠杆菌Y1
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10，其特征在于，其在pH为4~10均能生长。5.根据权利要求1所述的一种肠杆菌...

【专利技术属性】
技术研发人员：程辉彩，杨玲，习彦花，何强，王馨芝，张丽萍，
申请(专利权)人：河北省科学院生物研究所，
类型：发明
国别省市：