【技术实现步骤摘要】
一种培养液及分离和体外培养小鼠附睾上皮细胞的方法
[0001]本专利技术涉及分离和培养附睾上皮细胞
，具体涉及一种培养液及分离和体外培养小鼠附睾上皮细胞的方法。
技术介绍
[0002]附睾(Epididymal)是男性生殖系统重要的器官之一，也是精子储存的主要场所。附睾管折叠成一个高度组织化的结构，由许多离散的、区域内的节组成，这些节在结构上由结缔组织隔开。哺乳动物的附睾按照解剖学可以分为四个区段，分别是起始端(Initial segment)、头(Caput)、体(Corpus)和尾(Cauda)，与哺乳动物不同的是，人附睾通常包括后三部分[1]。每个区段被认为是一个独立的“器官”，创建其独特的腔内微环境，称为“区段特异性微环境”，不同的上皮细胞类型拥有各自的重叠基因、调节蛋白和信号转导[2]。附睾的这种区段式的特殊结构，与其不同区段的功能密不可分，它不但是精子储存的场所，也是精子成熟的主要器官，能够为精子成熟所需的微环境提供必要的基础条件。研究表明附睾能分泌附睾小体，它包含了蛋白质，小分子RNA以及脂滴，这些物质被...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种用于培养小鼠附睾上皮细胞的培养液，其特征在于，所述培养液为RPMI 1640工作液，其成份包括RPMI 1640基础培养液、丙酮酸盐、胰岛素、氢化可的松、转铁蛋白、视黄醇乙酸酯、二氢睾酮、睾酮、胎牛血清、抗生素和成纤维抑制剂。2.根据权利要求1所述的一种用于培养小鼠附睾上皮细胞的培养液，其特征在于，其各个成份的浓度分别为1mM、100nM、200nM、5μg/mL、1μg/mL、1μM、200nM、10％、1％和30μg/mL。3.基于权利要求1或2任一所述培养液的分离和体外培养小鼠附睾上皮细胞的方法，其特征在于，包括如下步骤：获取小鼠头部、体部和尾部三个不同区段的附睾组织，利用胰蛋白酶消化液和胶原蛋白酶I消化液分别消化不同区段的小鼠附睾组织，进而分离附睾上皮细胞，然后分别对不同区段附睾上皮细胞进行差速贴壁培养。4.根据权利要求3所述的一种分离和体外培养小鼠附睾上皮细胞的方法，其特征在于，消化步骤包括：向获取的小鼠附睾组织中加入胰蛋白酶消化液，消化若干分钟；加入等量的含有胎牛血清培养液终止消化，去上清；加入胶原蛋白酶I消化液，连续消化若干小时，离心后去上清，得到分离后的附睾上皮细胞。5.根据权利要求4所述的一种分离和体外培...
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