一种提高白桦耐盐能力的BpbHLH10基因及其编码的蛋白制造技术

本发明专利技术提供了一种提高白桦耐盐能力的BpbHLH10基因及其编码的蛋白，属于基因工程技术领域，所述白桦BpbHLH10基因的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。本发明专利技术提供的BpbHLH10基因可用于培育耐盐转基因白桦植株，研究成果为白桦耐盐性品种改良提供了依据，对揭示林木基因工程育种的优良基因具有重要科学意义。白桦BpbHLH10基因具有明显的耐盐能力，且不影响植物的生长，因此将该基因用于生长转基因植物尤其是转基因林木具有非常重要的应用前景。其是转基因林木具有非常重要的应用前景。其是转基因林木具有非常重要的应用前景。

【技术实现步骤摘要】
一种提高白桦耐盐能力的BpbHLH10基因及其编码的蛋白


[0001]本专利技术属于基因工程
，尤其涉及一种提高白桦耐盐能力的BpbHLH10基因及其编码的蛋白。

技术介绍

[0002]植物的生长发育过程中经常会受到各种逆境胁迫的影响，包括生物胁迫(病虫害、草害等)和非生物胁迫(干旱、高低温、高盐、弱光、重金属等)，这些逆境胁迫会给植物生长带来严重的损伤，制约植物生长发育，甚至直接影响植物的品质及产量。为了抵抗逆境胁迫带来的损伤，植物自身会根据所处环境产生一系列应答响应，基因表达调控在这一系列过程中起着至关重要的作用,而转录因子是基因表达中最重要的调控元件。转录因子通过与顺式调控元件结合特异性的激活或抑制靶基因的表达,从而调控植物体内不同的信号通路，最终提高植物在逆境胁迫下的抗逆能力。
[0003]白桦(Betulaplatyphylla Suk.)为桦木科桦属植物，为落叶乔木，生长速度快、是东北地区次生林的先锋树种，耐寒能力强，喜酸性土壤，桦木汁营养丰富，药食兼用，在保健、食品、医药、日用行业均有价值，白桦中含有多种次生代谢物，具有很高的药用和经济价值。由于其重要的生态、观赏和实用经济价值，历来被列为国家科技计划研究的重要树种之一。对其遗传改良的范围也在不断扩大，其主要目标是培育速生、优质和高抗的林木新品种。当前，土壤盐渍化已经成为一个全球性的问题，盐渍化土壤因较高的盐分含量，不利于植物的正常生长，其立地植被重建困难、生态恢复缓慢、植被保存率低等问题严重制约着林业的产出和发展。

技术实现思路
<br/>[0004]有鉴于此，本专利技术的目的在于提供一种提高白桦耐盐能力的BpbHLH10基因及其编码的蛋白，本专利技术提供的BpbHLH10基因提高了白桦耐盐胁迫能力。
[0005]为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供了以下技术方案：
[0006]本专利技术提供了一种提高白桦耐盐能力的BpbHLH10基因，所述BpbHLH10基因的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。
[0007]本专利技术还提供了上述技术方案所述的BpbHLH10基因在白桦耐盐胁迫中的应用。
[0008]本专利技术还提供了上述技术方案所述的BpbHLH10基因在降低白桦叶片过氧化氢含量中的应用。
[0009]本专利技术还提供了上述技术方案所述的BpbHLH10基因在降低白桦叶片超氧阴离子含量中的应用。
[0010]本专利技术还提供了上述技术方案所述的BpbHLH10基因在提高白桦超氧化物歧化酶活性中的应用。
[0011]本专利技术还提供了上述技术方案所述的BpbHLH10基因在提高白桦过氧化物酶活性中的应用。
[0012]本专利技术还提供了上述技术方案所述的BpbHLH10基因编码的蛋白质，所述蛋白质的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示。
[0013]本专利技术还提供了一种培育耐盐胁迫白桦的方法，包括以下步骤：
[0014]1)将上述技术方案所述的BpbHLH10基因连接到pROKII载体中，得到过表达载体；
[0015]2)将所述步骤1)得到的过表达载体采用电导法转入到根癌农杆菌中，得到重组菌；
[0016]3)将所述步骤2)得到的重组菌采用高效瞬时侵染技术侵染白桦，得到耐盐胁迫白桦植株。
[0017]优选的，扩增BpbHLH10基因使用的引物为上游引物和下游引物，所述上游引物的核苷酸序列如SEQ ID No.3所示，所述下游引物的核苷酸序列如SEQ ID No.4所示。
[0018]优选的，所述根癌农杆菌为根癌农杆菌EHA105。
[0019]本专利技术的有益效果为：
[0020]本专利技术提供了一个抵抗盐胁迫的白桦BpbHLH10基因，可用于培育耐盐转基因白桦植株，研究成果为白桦耐盐性品种改良提供了依据，对揭示林木基因工程育种的优良基因具有重要科学意义白桦BpbHLH10基因具有明显的耐盐能力，且不影响植物的生长，因此将该基因用于生长转基因植物尤其是转基因林木具有非常重要的应用前景。
附图说明
[0021]图1为白桦BpbHLH10与其它植物bHLH蛋白多序列比对图，其中PmbHLH：乌梅bHLH；FvbHLH：野草莓bHLH；AtbHLH：拟南芥bHLH；MnbHLH：川桑bHLH；ZjbHLH：枣bHLH；GmbHLH：大豆bHLH；JcbHLH：麻风树bHLH；PebHLH：胡杨bHLH；GabHLH：木棉bHLH；
[0022]图2为白桦BpbHLH10与拟南芥bHLH蛋白系统树构建图；
[0023]图3为盐胁迫下BpbHLH10基因在白桦根组织中的表达分析；
[0024]图4为BpbHLH10转基因白桦在盐胁迫下DAB染色结果；
[0025]图5为BpbHLH10转基因白桦在盐胁迫下NBT染色结果；
[0026]图6为BpbHLH10转基因白桦在盐胁迫下Evans blue染色结果；
[0027]图7为BpbHLH10转基因白桦在盐胁迫下超氧化物歧化酶(SOD)活性测定；
[0028]图8为BpbHLH10转基因白桦在盐胁迫下过氧化物酶(POD)活性测定；
[0029]图9为BpbHLH10转基因白桦在盐胁迫下H2O2含量的测定；
[0030]图10为BpbHLH10转基因白桦在盐胁迫下总蛋白浓度的测定；
[0031]图11为BpbHLH10转基因白桦在盐胁迫下相对电导率的测定。
具体实施方式
[0032]本专利技术提供了一种提高白桦耐盐能力的BpbHLH10基因，所述BpbHLH10基因的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示，具体如下：
[0033]atggaagagctcataatctctccctcttcatcttcctctctagtatctttgccccaagaaaccccaccaacccttcaacaaaggctccaattcgtagtccaaagccaaccggactggtggacttacgccattttctggcaatccgccaacgacgacaatggccagatgttcttggcctggggcgacggccatttcctaggcaccaaagacacatcccctaagctctcccacatcaacagtacccaccaccaccaccccatgtcagtcctacattccgaaagaagaaaattcatgag
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种提高白桦耐盐能力的BpbHLH10基因，其特征在于，所述BpbHLH10基因的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。2.权利要求1所述的BpbHLH10基因在白桦耐盐胁迫中的应用。3.权利要求1所述的BpbHLH10基因在降低白桦叶片过氧化氢含量中的应用。4.权利要求1所述的BpbHLH10基因在降低白桦叶片超氧阴离子含量中的应用。5.权利要求1所述的BpbHLH10基因在提高白桦超氧化物歧化酶活性中的应用。6.权利要求1所述的BpbHLH10基因在提高白桦过氧化物酶活性中的应用。7.一种权利要求1所述的BpbHLH10基因编码的蛋白质，其特征在于，所述蛋白质的氨基酸序列如SEQ ID No....

【专利技术属性】
技术研发人员：国会艳，吴迪，及晓宇，王玉成，孙虎，
申请(专利权)人：沈阳农业大学，
类型：发明
国别省市：