一种抗缪勒氏管激素测定试剂盒制造技术

本发明专利技术涉及生物分析技术领域，提供了一种抗缪勒氏管激素测定试剂盒，其特征在于，包括彼此独立的试剂1和试剂2，试剂1由稳定剂和防腐剂置于pH为6～7.5的缓冲液中组成，稳定剂的浓度为0.05～0.3mol/L，防腐剂的浓度为0.01～0.06wt％；试剂2由牛血清白蛋白、表面活性剂、防腐剂和包被有抗缪勒氏管激素抗体的胶乳颗粒置于pH为6～8的缓冲液中组成，牛血清白蛋白的浓度为0.5～2wt％，吐温20的浓度为0.5～2wt％，防腐剂的浓度为0.01～0.06wt％，包被有抗缪勒氏管激素抗体的胶乳颗粒的浓度为0.2～3wt％。本发明专利技术的试剂盒采用胶乳免疫比浊法为检测原理，与现有技术相比，本发明专利技术具有特异性强、灵敏度高、准确性高、操作方便、检测成本低、无放射性污染的优点，能在生化分析仪上使用，不需要昂贵的检测仪器，适合临床推广使用。适合临床推广使用。

【技术实现步骤摘要】
一种抗缪勒氏管激素测定试剂盒


[0001]本专利技术涉及生物分析
，尤其涉及一种抗缪勒氏管激素测定试剂盒。

技术介绍

[0002]抗缪勒氏管激素(AMH)是一种转化生长因子β超家族多肽类物质，在女性体内由卵巢的初级卵泡、窦前卵泡和小窦卵泡颗粒细胞合成并分泌。血清AMH水平检测不仅能更早、更准确地反映卵巢储备功能，预测绝经年龄，且在卵巢相关疾病，如多囊卵巢综合症，卵巢早衰等的诊断，儿童性别发育异常的诊断及辅助生殖技术中有着重要意义。
[0003]对于AMH的检测，目前临床的方法包括：酶联免疫法、化学发光、电化学发光法等方法。目前最常用的是酶联免疫法利用酶联免疫法检测抗缪勒氏管激素含量，灵敏度高，特异性强，但检测时间长，不能自动化；化学发光法检测血清中AMH，能自动化检测，但需要昂贵化学发光检测系统。

技术实现思路

[0004]本专利技术旨在至少克服上述现有技术的缺点与不足其中之一，提供一种抗缪勒氏管激素测定试剂盒。本专利技术目的基于以下技术方案实现：
[0005]一种抗缪勒氏管激素测定试剂盒，包括彼此独立的试剂1和试剂2，其中：
[0006]所述试剂1由稳定剂和防腐剂置于pH为6～7.5的缓冲液中组成，所述稳定剂的浓度为0.05～0.3mol/L，所述防腐剂的浓度为0.01～0.06wt％；
[0007]所述试剂2由牛血清白蛋白、表面活性剂、防腐剂和包被有抗缪勒氏管激素抗体的胶乳颗粒置于pH为6～8的缓冲液中组成，所述牛血清白蛋白的浓度为0.5～2wt％，吐温20的浓度为0.5～2wt％，防腐剂的浓度为0.01～0.06wt％，包被有抗缪勒氏管激素抗体的胶乳颗粒的浓度为0.2～3wt％。
[0008]优选地，所述试剂1中缓冲液的浓度为50～150mmol/L，所述试剂2中缓冲液的浓度为50～150mmol/L。
[0009]优选地，所述缓冲液包括柠檬酸钠、2
‑
吗啉乙磺酸、4
‑
羟乙基哌嗪乙磺酸、三羟甲基氨基甲烷或PBS缓冲液。
[0010]优选地，所述表面活性剂包括吐温20、吐温40、吐温60、吐温80、曲拉通X
‑
100中的一种或多种。
[0011]优选地，所述稳定剂包括氯化钠、和/或氯化钾。
[0012]优选地，所述防腐剂包括叠氮钠、Procline300、山梨酸钾、苯甲酸钠、亚硝酸钠中的一种或多种。
[0013]优选地，所述试剂1包括柠檬酸钠100mmol/L，氯化钠0.15mol/L，防腐剂0.03wt％；
[0014]所述试剂2包括柠檬酸钠100mmol/L，牛血清白蛋白1wt％，吐温20 1wt％，防腐剂0.03wt％，包被有抗缪勒氏管激素抗体的胶乳颗粒1wt％。
[0015]优选地，本专利技术提供的一种抗缪勒氏管激素测定试剂盒，还包括校准品，所述校准
品包含50wt％人血清、25～100mmol/L缓冲剂、2～10wt％保护剂、0.05～0.3mol/L氯化钠、0.01～0.06wt％防腐剂、靶值浓度范围为(42，56)ng/mL的抗缪勒氏管激素抗原。
[0016]优选地，本专利技术提供的一种抗缪勒氏管激素测定试剂盒，还包括质控品，所述质控品包含50wt％人血清、25～100mmol/L缓冲剂、0.01～0.06wt％防腐剂、2～10wt％保护剂、0.05～0.3mol/L氯化钠、抗缪勒氏管激素抗原，所述抗缪勒氏管激素抗原的水平1目标浓度范围为(2，10)ng/mL，所述抗缪勒氏管激素抗原的水平2目标浓度范围为(16，24)ng/mL。
[0017]优选地，所述缓冲剂的pH为6.0～8.0。
[0018]优选地，所述校准品和/或质控品的性状为冻干粉。
[0019]优选地，所述试剂1和2按照体积比1.5～5：1进行免疫凝集反应。
[0020]本专利技术可至少取得如下有益效果其中之一：
[0021]本专利技术的试剂盒采用胶乳免疫比浊法为检测原理测定血清抗缪勒氏管激素抗体，在反应体系中，标本中抗缪勒氏管激素抗原与包被有抗缪勒氏管激素抗体的胶乳颗粒试剂反应，形成免疫复合物，在600nm波长下测定浊度的变化，参照校准曲线可计算出标本中AMH的含量。与现有技术相比，本专利技术所提供试剂盒具有特异性强、灵敏度高、准确性高、检测时间短、操作方便、检测成本低、无放射性污染的优点，能在生化分析仪上使用，不需要昂贵的检测仪器，适合临床推广使用。
具体实施方式
[0022]下面将对本专利技术的实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。
[0023]实施例1试剂盒的制备
[0024]一、试剂1和试剂2
[0025]1.试剂主要原料
[0026]抗缪勒氏管激素测定试剂盒(胶乳免疫比浊法)的主要原料是包被有抗缪勒氏管激素抗原的胶乳颗粒，经过对国内外厂家的调研和筛选，选择了两个厂家的产品，分别为北京百尚利德和北京华元山水生物科技有限公司。
[0027]缓冲液及pH值：
[0028]缓冲体系pH值Tris
‑
HCl(三羟甲基氨基甲烷)7.5PBS(NaH2PO4·
Na2HPO4·
12H2O)7.5柠檬酸钠6.5HEPES(4
‑
羟乙基哌嗪乙磺酸)7.5MES(2
‑
吗啉乙磺酸)6.5
[0029]2.实验仪器及条件
[0030]全自动生化分析仪(型号Olympus AU400)
[0031]检验方法：终点法检验温度：37℃
[0032]检验波长：600nm比色杯光径：1cm
[0033]以水作为空白对照
[0034]3.实验方法
[0035]每种缓冲液各取60mL，作为试剂1使用，另外，每种缓冲液各取20mL，分别加入包被有抗缪勒氏管激素抗体胶乳颗粒0.2mL，充分混匀，作为试剂2使用。
[0036]试剂1：样品：试剂2＝120:2:40，按照比例加入试剂1和20ng/mL的抗缪勒氏管激素样品混匀，37℃反应5分钟，加入试剂2混匀，30秒后在600nm下读取吸光度值A1，5分钟后读取吸光度值
△
A2。计算A＝A2
‑
A1，
△
A应≥0.01；用纯化水代替样本检测试剂空白，A≤2.0。
[0037]1)定标数据
[0038]缓冲体系MESPBS柠檬酸钠HEPESTris
‑
HCl0
‑
0.0021
‑
0.0013
‑
0.0020
‑
0.0011
‑
0.00122.8750.01970.01030.02040.01180.01135.7本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种抗缪勒氏管激素测定试剂盒，其特征在于，包括彼此独立的试剂1和试剂2，其中：所述试剂1由稳定剂和防腐剂置于pH为6～7.5的缓冲液中组成，所述稳定剂的浓度为0.05～0.3mol/L，所述防腐剂的浓度为0.01～0.06wt％；所述试剂2由牛血清白蛋白、表面活性剂、防腐剂和包被有抗缪勒氏管激素抗体的胶乳颗粒置于pH为6～8的缓冲液中组成，所述牛血清白蛋白的浓度为0.5～2wt％，吐温20的浓度为0.5～2wt％，防腐剂的浓度为0.01～0.06wt％，包被有抗缪勒氏管激素抗体的胶乳颗粒的浓度为0.2～3wt％。2.根据权利要求1所述的一种抗缪勒氏管激素测定试剂盒，其特征在于，所述试剂1中缓冲液的浓度为50～150mmol/L，所述试剂2中缓冲液的浓度为50～150mmol/L。3.根据权利要求1所述的一种抗缪勒氏管激素测定试剂盒，其特征在于，所述缓冲液包括柠檬酸钠、2
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吗啉乙磺酸、4
‑
羟乙基哌嗪乙磺酸、三羟甲基氨基甲烷或PBS缓冲液；所述表面活性剂包括吐温20、吐温40、吐温60、吐温80、曲拉通X
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100中的一种或多种。4.根据权利要求1所述的一种抗缪勒氏管激素测定试剂盒，其特征在于，所述稳定剂包括氯化钠、和/或氯化钾；所述防腐剂包括叠氮钠、Procline300、山梨酸钾、苯甲酸钠、亚硝酸钠中的一种或多种。5.根据权利要求3所述的一种抗缪勒氏管激素测定试剂盒，其特征在于，所述试剂1包括柠檬酸钠100mmol/...

【专利技术属性】
技术研发人员：郝立颖，彭勇，曹培杰，陈白燕，周晶，
申请(专利权)人：北京世纪沃德生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：