一种活性有核细胞的保存方法技术

本发明专利技术提供一种活性有核细胞的保存方法，所述方法包括以下步骤：步骤1、活性有核细胞样本的制备：组织样本采用红细胞裂解液或基于密度原理的密度梯度离心液，以去除红细胞等非有核细胞；步骤2、活性有核细胞沉降与吸附：将含有活性有核细胞的细胞悬液滴加到包被有带电荷物质的载体上，进行沉降，吸附；步骤3、固定：使用醛类或醇类固定剂或其组合固定上述沉降并吸附到载体上的细胞。步骤4、保存：对固定后的载体进行冷藏或冷冻保存。的载体进行冷藏或冷冻保存。

【技术实现步骤摘要】
一种活性有核细胞的保存方法

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[0001]本专利技术主要涉及活性有核细胞的保存方法，包括有核活性细胞样本制备与配套载体的修饰方法，结合使用了电荷吸附、活细胞沉降、层层包被的方法，达到无损、全面、温和、经济地保存活性有核细胞的目的。

技术介绍
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[0002]根据经济合作与发展组织(OECD)的定义，“生物样本库(Biobank)是一种集中保存各种人类生物材料(Human biological material)，用于疾病的临床治疗和生命科学研究的生物应用系统”。这些生物样本库(Biobank)为血液病、免疫系统疾病、糖尿病、恶性肿瘤等重大疾病的研究起到了非常重要的推动作用。
[0003]有核细胞的样本制备与保存是生物样本库非常重要的组成部分。目前最常用的方式，是采用液基细胞学或超低温冷冻法。液基细胞学是脱落细胞学的一部分，是把按传统方式难以处理的脱落细胞学标本放入一种中介的液体中去，以去除血液、粘液等影响诊断的干扰成分，达到提高诊断率的目的。处理方法包含离心法、自然沉降法和膜式负压吸引法。离心法因采用较高的转速使细胞瞬间与玻片接触，会导致本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种活性有核细胞保存方法，所述方法包括以下步骤：步骤1、活性有核细胞样本的制备：组织样本采用红细胞裂解液或基于密度原理的密度梯度离心液，以去除红细胞等非有核细胞；步骤2、活性有核细胞沉降与吸附：将含有活性有核细胞的细胞悬液滴加到包被有带电荷物质的载体上，进行沉降，吸附；步骤3、固定：使用醛类或醇类固定剂或其组合固定上述沉降并吸附到载体上的细胞；步骤4、保存：对固定后的载体进行冷藏或冷冻保存；其特征在于，步骤2所述的包被有带电荷物质的载体为一种包被带电荷物质并经过羟基化修饰的载玻片，其中载玻片材质选自：玻璃、石英、PDMS等；所述羟基化修饰，即向载玻片分子中引入羟基的步骤，选自：使用等离子体清洗、酸洗、过氧化物清洗、碱洗载玻片的步骤；所述带电荷物质选自：聚乙烯亚胺(PEI)，PLL，聚对苯乙烯磺酸钠(PSS)，PAH，PLGA，PDDA，PVAM，PVA，Chitosan，PAA，HA，AlG，DeX等分子量大于等于20000的物质，优选分子量40000
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80000的带正电荷或带负电荷的物质；所述包被其方法为，先将载体用带正电荷物质包被，再将载体用带负电荷物质包被的步骤，重复该步骤2
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8次，最后再包被一层带正电荷物质。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，其中，所述羟基化方法优选为暴露于O2等离子体中。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，其中，所述带正电荷物质优选是聚乙烯亚胺，带负电荷物质优选是聚对苯乙烯磺酸钠。4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，其中，所述包被优选是带正电荷物质聚乙烯亚胺配制成重量百分浓度0.01
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5％的溶液中涂布于被羟基化的载体表面，再将配制好的浓度为0.01
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5％聚对苯乙烯磺酸钠溶液涂布于已经涂布聚乙烯亚胺的载体表面。5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，其中，优选聚乙烯亚胺配制成重量百分浓度0.01
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2％的溶液，聚对苯乙烯磺酸钠配制成重量百分浓度0.01
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2％的溶液。6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，其中，优选聚乙烯亚胺配制成重量百分浓度1％的水溶液，聚对苯乙烯磺酸钠配制成重量百分...

【专利技术属性】
技术研发人员：詹厅，
申请(专利权)人：安徽德维洛生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：